An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the <em>In Vivo</em> Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

Gabriella Bergamini; Fabio Stellari; Angela Sandri; Maria M. Lleo; Gaetano Donofrio; Francesca Ruscitti; Federico Boschi; Andrea Sbarbati; Gino Villetti; Paola Melotti; Claudio Sorio

doi:10.3791/55499

Un modello di topo transgenizzato IL-8 per il In Vivo Monitoraggio a lungo termine delle...

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Immunology and Infection

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An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

Un modello di topo transgenizzato IL-8 per il In Vivo Monitoraggio a lungo termine delle risposte infiammatorie

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08:16 min

July 7, 2017

DOI: 10.3791/55499-v

Gabriella Bergamini*¹, Fabio Stellari*², Angela Sandri*³, Maria M. Lleo³, Gaetano Donofrio⁴, Francesca Ruscitti^5,2, Federico Boschi⁶, Andrea Sbarbati⁷, Gino Villetti², Paola Melotti⁸, Claudio Sorio¹

¹Department of Medicine, General Pathology Division, Cystic Fibrosis Translational Research Laboratory "D. Lissandrini",University of Verona, ²Corporate Preclinical R&D,Chiesi Farmaceutici S.p.A., ³Department of Diagnostic and Public Health, Microbiology Division,University of Verona, ⁴Dipartimento di Scienze Medico-Veterinarie,University of Parma, ⁵Department of Biomedical Biotechnological and Translational Sciences,University of Parma, ⁶Department of Computer Science,University of Verona, ⁷Department of Neurological, Biomedical and Movement Sciences,University of Verona, ⁸Cystic Fibrosis Regional Center (CFC),AOUI Verona

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Il metodo descritto qui consente la visualizzazione dell'attivazione dell'infiammazione dipendente dal promotore IL-8 nei polmoni dei topi attraverso la bioluminescenza non invasiva (BLI). Lo stesso animale può essere sottoposto a più volte BLI per un massimo di due mesi a partire dal momento della consegna del costruttore di reporter luciferasi.

L'obiettivo generale di questa procedura è monitorare in tempo reale l'infiammazione polmonare nei topi dopo una sfida non invasiva con uno stimolo pro-infiammatorio come un surnatante di coltura batterica. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande specifiche riguardanti le interazioni ospite-patogeno, come ad esempio quali prodotti batterici sono responsabili delle malattie da infezione respiratoria. I principali vantaggi di questa tecnica sono che non è invasiva e che consente di monitorare ripetutamente gli stessi animali nel tempo.

La dimostrazione visiva di questo metodo è importante perché i passaggi di installazione sono difficili da apprendere solo con il testo. A dimostrare la procedura saranno Francesca Ruscitti, Angela Sandri, Federico Boschi, tutti collaboratori esterni del mio gruppo di ricerca. Per la consegna genica in vivo, riscaldare prima il complesso di acidi nucleici a temperatura ambiente.

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