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DOI: 10.3791/56340-v
Kayla Huemer*1,2, Jayne M. Squirrell*3, Robert Swader2, Kirsten Pelkey2, Danny C. LeBert4, Anna Huttenlocher5,6, Kevin W. Eliceiri1,2,3
1Department of Biomedical Engineering,University of Wisconsin-Madison, 2Morgridge Institute for Research,University of Wisconsin-Madison, 3Laboratory for Optical and Computational Instrumentation,University of Wisconsin-Madison, 4Cellular and Molecular Pathology Graduate Program,University of Wisconsin-Madison, 5Department of Medical Microbiology and Immunology,University of Wisconsin-Madison, 6Department of Pediatrics,University of Wisconsin-Madison
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Questo manoscritto descrive la zWEDGI (zebrafish ferire e dispositivo di allettamento per la crescita e la formazione immagine), che è un dispositivo compartimenti progettato per orientare e trattenere le larve di zebrafish. Il design permette di coda transection e a lungo termine raccolta di immagini di microscopia fluorescente ad alta risoluzione di guarigione delle ferite e la rigenerazione.
L'obiettivo generale della fabbricazione di questo dispositivo di imaging è quello di creare una piattaforma modificabile per l'analisi microscopica della guarigione delle ferite nelle larve di pesce zebra vive. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della guarigione delle ferite, come ad esempio qual è il contributo della riorganizzazione delle fibre di collagene e le risposte cellulari alla successiva ricrescita dei tessuti dopo una lesione. Il vantaggio principale di questa tecnica è che la ferita e l'imaging avvengono all'interno di un unico dispositivo, mentre la ricrescita della coda non è ostacolata dal dispositivo.
Inoltre, i molteplici compartimenti funzionali di zWEDGI potrebbero essere modificati in modo indipendente per adattarsi a diversi stadi larvali e a una serie di protocolli sperimentali. Per iniziare, modellare il componente PDMS del dispositivo con le geometrie e gli attributi desiderati in base al protocollo di testo. Dopo aver stampato gli stampi utilizzando una stampante 3D fotopolimerica, pulire gli stampi utilizzando un pennello fine, alcol denaturato in un flacone spray e aria compressa.
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