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DOI: 10.3791/56778-v
Matthew B. O'Rourke1,2, Matthew P. Padula2, Caine Smith3, Priscilla Youssef4, Stuart Cordwell1, Paul Witting4, Greg Sutherland3, Ben Crossett1
1Mass Spectrometry Core Facility,University of Sydney, 2Proteomics Core Facility,University of Technology Sydney, 3Neuropathology Group, Discipline of Pathology, School of Medical Sciences,University of Sydney, 4Redox Biology Group, Discipline of Pathology, School of Medical Sciences,University of Sydney
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Questo protocollo descrive un metodo attendibile e riproducibile per la preparazione di base di sublimazione di formalina riparata tessuto destinato per imaging spettrometria di massa.
L'obiettivo generale di questa procedura è preparare in modo riproducibile un campione di tessuto per l'imaging con spettrometria di massa peptidica. Questo metodo consente agli utenti inesperti di spettrometria di massa di sviluppare i propri flussi di lavoro di spettrometria di massa per immagini senza passare attraverso lunghe determinazioni empiriche. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è altamente riproducibile, semplice da implementare e utilizza metodologie convenienti.
Per preparare i vetrini rivestiti di nitrocellulosa, pipettare 40 microlitri di nitrocellulosa liquida su un bordo del vetrino da microscopio conduttivo in ossido di indio e stagno. Utilizzando un normale vetrino da microscopio in vetro, trascinare la nitrocellulosa sotto tensione superficiale sul vetrino per creare un rivestimento uniforme a film sottile. Lasciare asciugare la nitrocellulosa a temperatura ambiente per 20 secondi, quindi conservarla fino al momento dell'utilizzo a temperatura ambiente.
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