Stimolazione del nervo cavernoso e registrazione della pressione intracavernosa in un ratto

Gli obiettivi generali di questo metodo sono descrivere una tecnica chirurgica semplificata di incannulamento del crus penieno per la registrazione della pressione intracavernosa e la dissezione e l'isolamento del nervo cavernoso per l'elettrostimolazione. Questo protocollo sperimentale può essere utilizzato per studiare la fisiopatologia della disfunzione erettile e testare nuove terapie. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è riproducibile, veloce e affidabile.

Ha affrontato ed eliminato le principali insidie descritte in questo tutorial. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulla disfunzione erettile, l'isolamento del complesso di elettrodi nervosi con colla siliconica biocompatibile è applicabile all'elettrostimolazione di qualsiasi nervo periferico, consentendo test fisiologici di altri organi. Per iniziare questa procedura, dopo aver anestetizzato l'animale, radere la metà inferiore dell'addome e del perineo.

Strofinare l'animale con alcol al 70% e iodio povidone tre volte alternativamente. Successivamente, posiziona il ratto su un cuscinetto chirurgico riscaldato in posizione supina. Applicare un unguento sugli occhi e mantenere il ratto anestetizzato tramite un cono nasale con isoflurano al 2,5%.

Quindi, eseguire l'intera procedura chirurgica al microscopio operatorio su un telo. Successivamente, praticare un'incisione cutanea di un centimetro cinque millilitri lateralmente alla linea mediana partendo dal livello della base del pene ed estendendosi verso il basso. Utilizzare un cotton fioc per separare con cura la fascia laterale allo scroto.

Dopo aver sezionato la fascia, utilizzare un paio di divaricatori per tirare indietro i bordi della pelle e il testicolo e localizzare la tuberosità ischiatica utilizzando la palpazione con un tampone di cotone. Sezionare medialmente il tessuto adiposo fino a quando il muscolo ischiocavernoso è visibile. Usa un paio di pinze per separare il muscolo longitudinalmente ed esporre la tunica albuginea.

La tunica albuginea apparirà come una struttura bianca brillante. Dopo aver calibrato le impostazioni del sistema, inserire il tubo attraverso la pelle del perineo, assicurandosi che scorra parallelo alla crus del pene. Quindi, lasciare la linea in posizione e mantenere l'incisione umida con soluzione fisiologica.

In questa procedura, praticare un'incisione addominale della linea mediana inferiore di due centimetri attraverso la pelle. Crea un'incisione corrispondente attraverso la fascia lungo la linea alba per esporre la vescica e la prostata. Utilizzare i divaricatori per ottenere una buona esposizione.

Quindi, utilizzare tamponi con punta di cotone per separare la prostata dal tessuto adiposo. Regolare i divaricatori e completare la dissezione fino ad ottenere una chiara visualizzazione del MPG e del CN che corrono sulla faccia laterale dorsale della prostata. Dopo aver individuato l'MPG e il CN, incidere con cura la fascia sovrastante il nervo da due a cinque millimetri distalmente all'MPG.

Successivamente, stendere il tessuto su ciascun lato del nervo e sotto di esso per liberare una porzione lunga quattro millimetri e quindi far scorrere una sutura sotto il nervo. Sollevare leggermente il nervo con l'aiuto della sutura per facilitare il posizionamento dei ganci dell'elettrodo bipolare attorno al nervo. Lascia che un assistente mescoli la colla siliconica bicomponente con la punta di un ago da insulina per cinque secondi.

Asciugare il nervo e applicare la colla sull'area intorno ai ganci e al nervo. Mantieni il nervo sollevato tirando leggermente l'elettrodo per circa un minuto per consentire alla colla di asciugarsi. Successivamente, rimuovere i divaricatori, ad eccezione di quelli sul lato destro per evitare qualsiasi trazione o torsione dell'elettrodo.

Successivamente, bagnare gli organi esposti con soluzione fisiologica e stendere una garza imbevuta di soluzione fisiologica sopra l'incisione. In questa procedura, ripristinare la visualizzazione della tunica albuginea utilizzando i divaricatori. Assicurati di non attaccare i divaricatori al muscolo ischiocavernoso, poiché distorcerà le crus.

Quindi, collegare l'ago al tubo PE50 e lavare il tubo con soluzione fisiologica eparinizzata prima di introdurlo nella tunica albuginea. Mantieni la tunica albuginea tesa e tieni il muscolo sovrastante distale fino al punto di inserimento con la mano dominante. Quindi, tieni l'ago nella mano non dominante e introducilo nel corpo cavernoso.

Lavare la linea per confermare il corretto posizionamento nei corpi cavernosi senza perdite. L'inserimento dell'ago nel corpo cavernoso per la registrazione della pressione costituisce un passaggio critico. Quando si distribuisce l'ago nei cru, è importante che i cru siano allungati e che l'ago sia distribuito parallelamente al suo corso.

Lavare il tubo e premere sul crus per testare la linea. Assicurarsi che non vi siano perdite. Successivamente, fissare il tubo al tavolo con del nastro adesivo per evitare di tirare accidentalmente la linea.

Quindi, rimuovere i divaricatori. Imposta i parametri su uno stimolatore e applica la stimolazione per 50 secondi con un minimo di un minuto di riposo tra le stimolazioni. Questa figura mostra una prima risposta diminuita con una stimolazione di 50 millimetri di mercurio, seguita dalla seconda e dalla terza stimolazione di 66 millimetri di mercurio.

Quindi, le misurazioni successive sono state registrate al livello normale a 73 millimetri di mercurio. E qui viene mostrata la stabilità dei risultati utilizzando questo protocollo con 10 stimolazioni back-to-back tra 75 e 78 millimetri di mercurio. Questa figura mostra le dosi di anestesia efficaci sulla pressione intracavernosa.

Nelle prime due e nelle ultime tre stimolazioni è stata osservata una risposta ridotta e più fluttuante all'aumento dell'isoflurano rispetto alla risposta stabile del 2%. La traccia blu in alto mostra la pressione arteriosa principale costante. Questa figura mostra l'effetto del tipo di anestesia sulla pressione intracavernosa.

Le stimolazioni iniziali eseguite in anestesia con isoflurano hanno mostrato un aumento della pressione di 80 millimetri di mercurio. Una volta somministrato il fentanil midazolam, c'è stato un aumento della risposta a 110 millimetri di mercurio. Questa figura dimostra l'effetto della somministrazione di ossigeno attraverso il cono del naso.

L'interruzione della somministrazione di ossigeno attraverso il cono nasale ha comportato una significativa riduzione dell'aumento della pressione cavernosa con la stimolazione del nervo cavernoso. Non è stato osservato alcun effetto sulla pressione arteriosa principale. Una volta padroneggiata e se eseguita correttamente, questa procedura può essere completata in 30 minuti.

Durante l'esecuzione delle stimolazioni, è importante ricordare che sia il tipo che il livello di anestesia e ossigenazione hanno un impatto importante sulla pressione intracavernosa. Seguendo questa procedura, diversi agenti possono essere testati per rispondere a domande relative alla fisiopatologia della disfunzione erettile e all'introduzione di nuovi trattamenti. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una conoscenza approfondita di come eseguire la stimolazione del nervo cannula, incluso l'isolamento dell'elettrocomplesso nervoso con colla sigillante e la registrazione della pressione intracavernosa dopo la dissezione minimamente invasiva e l'incannulamento delle parti cavernose.