Ingegneria fluorescenza 'D'oro' per incorporazione di pressione selettiva di aminoacidi Non canonico e l'analisi della proteina di fluorescenza e di spettrometria di massa

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27 aprile 2018

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Biologia sintetica consente l'ingegneria delle proteine con proprietà senza precedenti tramite l'inserimento co-translational di aminoacidi non canonico. Qui, abbiamo presentato come una variante spettralmente rosso-spostato di un fluoroforo GFP-tipo con proprietà spettroscopiche di fluorescenza romanzo, chiamato proteina fluorescente "oro" (GdFP), viene prodotto in e. coli tramite incorporazione di pressione selettiva (SPI).

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Proteina fluorescente dell'oro

Chapters in this video

0:05

Titolo

1:46

Espressione di proteine ricombinanti

4:05

Purificazione della proteina target tramite cromatografia di affinità per ioni metallici immobilizzati

5:20

Analisi della massa della proteina intatta mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni accoppiata a spettrometria di massa time-of-flight con ionizzazione elettrospray

6:38

Misurazioni della vita media di fluorescenza e spettri associati al decadimento della GdFP

7:59

Risultati: Analisi della proteina fluorescente gold mediante spettrometria di massa e fluorescenza

10:13

Conclusione

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