Un nuovo metodo per indurre un comportamento depressione-come in ratti

L'obiettivo generale di questo modello è stabilire il contagio della depressione nei ratti. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campo comportamentale come il meccanismo d'azione, la prevenzione, il contenimento e il trattamento della depressione contagiosa. Il vantaggio principale di questa tecnica è che si tratta di un nuovo modello per stabilire la depressione contagiosa.

Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla terapia della depressione perché al momento non esiste un formato esistente per studiare la depressione contagiosa. Per la procedura sperimentale, selezionare ratti maschi Sprague Dawley senza patologia conclamata di peso compreso tra 300 e 350 grammi ciascuno. Ospita tre ratti per gabbia con cibo e acqua disponibili ad libitum.

Consentire un minimo di due settimane di adattamento su un ciclo di luce e buio di 12 ore. Prima dell'inizio dell'esperimento, testare tutti i ratti per la presenza di comportamenti depressivi utilizzando un test di preferenza del saccarosio di tre giorni. Per fare ciò, posizionare i ratti in gabbie individuali nella stessa stanza dell'alloggiamento durante il ciclo di buio.

Mettere una bottiglia da 100 millilitri di soluzione di saccarosio all'1% in ogni gabbia per 24 ore e lasciare che si adatti. Trascorse le 24 ore, togliete le bottiglie e privatele i ratti di cibo e acqua per 12 ore. Dopo 12 ore, mettere due bottiglie, una contenente 100 millilitri di soluzione di saccarosio all'1% e l'altra 100 millilitri di acqua di rubinetto in ogni gabbia per quattro ore.

Dopo quattro ore, registrare il volume in millilitri della soluzione di saccarosio consumata e dell'acqua e calcolare l'affinità con la preferenza per il saccarosio come mostrato. Elimina i ratti che risultano positivi alla depressione, quindi elimina i ratti che erano alloggiati nelle stesse gabbie dei ratti depressi. Se necessario, escludere altri ratti a caso per creare i gruppi finali.

Etichetta i ratti usando adesivi numerati. Per indurre la depressione, sottoporre i 60 ratti nel gruppo esposto a stress cronico imprevedibile a due dei seguenti sette fattori di stress. In ordine casuale per cinque settimane consecutive, usa un fattore di stress durante il giorno e l'altro di notte.

Alloggia i ratti in gruppi più grandi posizionando sei ratti invece dei soliti tre per gabbia per 18 ore. Metti i ratti in una gabbia inclinata di 45 gradi lungo l'asse verticale per tre ore. Il cibo priva i ratti per 18 ore.

Privare i ratti dell'acqua per 18 ore, esponendoli a bottiglie d'acqua vuote dopo un'ora. Metti i ratti in una gabbia con lettiera bagnata per otto ore durante il ciclo notturno. Esporre i ratti all'illuminazione continua per 24 ore in un ciclo inverso luce-buio due volte a settimana.

Metti i ratti in un ambiente caldo impostato a 40 gradi Celsius per cinque minuti durante il ciclo notturno. Dopo l'esposizione ai due fattori di stress scelti, confermare lo sviluppo della depressione eseguendo il test di preferenza del saccarosio. Per prima cosa, posiziona due ratti esposti al CUS per gabbia in 30 gabbie diverse.

Quindi aggiungere un ratto del gruppo di contagio della depressione a ciascuna gabbia contenente due ratti esposti al CUS e consentire la convivenza per cinque settimane in condizioni standard. Dopo cinque settimane di convivenza, sottoporre tutti i gruppi ai test di preferenza per il saccarosio, in campo aperto e di nuoto forzato. Pulire l'apparecchio con il 5% di alcol prima dell'introduzione di ogni animale.

Posiziona il topo nell'angolo del campo aperto di fronte al muro. Registra il comportamento del ratto con una videocamera per cinque minuti. Analizza le registrazioni post della distanza totale percorsa, della velocità nella parte centrale del campo e del tempo trascorso nella parte centrale del campo.

Per l'assuefazione, metti il ratto in un cilindro di vetro contenente acqua a temperatura ambiente per una sessione di nuoto di 15 minuti. Rimuovi il topo dal cilindro, asciugalo con carta assorbente e mettilo in una gabbia calda per 15 minuti prima di rimetterlo nella gabbia di casa. Il giorno seguente, registra una sessione di nuoto di cinque minuti e analizza le registrazioni per l'immobilità, l'arrampicata e la defecazione.

Dopo aver esposto i ratti a cinque settimane di CUS per l'induzione della depressione e poi aver successivamente esposto ratti sani ai ratti esposti al CUS per altre cinque settimane, entrambi i gruppi di ratti hanno mostrato comportamenti depressivi alla fine, come dimostrato dalla ridotta preferenza per il saccarosio. Nel test in campo aperto, i ratti in entrambi i gruppi con infezione da CUS, esposti e depressione, avevano una riduzione delle distanze totali di viaggio e una diminuzione delle velocità medie rispetto al gruppo di controllo. Il tempo trascorso al centro del campo aperto dai ratti del gruppo di controllo nei due gruppi sperimentali non era significativamente diverso.

Sia i ratti esposti a CUS che quelli con contagio da depressione hanno mostrato un'immobilità prolungata dopo il test di nuoto forzato. Tuttavia, un tempo di inattività significativamente prolungato è stato registrato solo nel gruppo esposto al CUS rispetto al gruppo di controllo. In un altro parametro del test di nuoto forzato studiato, il tempo di arrampicata, entrambi i gruppi di ratti esposti al CUS e di ratti con depressione da contagio hanno mostrato proprietà di arrampicata molto limitate rispetto al gruppo di controllo.

La valutazione del tasso di defecazione ha portato alla registrazione di elevate quantità di feci per entrambi i gruppi sperimentali rispetto al controllo. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di pianificare in anticipo la rotazione casuale dei fattori di stress durante il modello di stress cronico imprevedibile a causa della sua elevata richiesta di lavoro manuale. Dopo questa procedura, possono essere eseguiti altri test come il test del labirinto elevato o lo specchio per indagare ulteriormente i cambiamenti comportamentali successivi alla depressione.