Name: Un nuovo metodo per indurre un comportamento depressione-come in ratti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-22T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 57 s
Description: Scopri un nuovo modello di depressione contagiosa nei ratti Sprague Dawley utilizzando stress cronico imprevedibile e coabitazione. Questo metodo permette di studiare meccanismi, prevenzione e trattamento della trasmissione comportamentale.

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Gli autori riconoscono con gratitudine Dr. R. Bilyar, residente, dipartimento di urologia, il centro medico Soroka, per il suo aiuto in laboratorio così come l'analisi dei video. Il supporto di Shira Ovadia, direttore dell'unità risorse di animale, si ringraziano. Molte grazie a r. Alir e a tutto il personale il Critical Care Unit, il centro medico Soroka per il loro supporto e discussioni utili.

La procedura seguente è stata condotta secondo le raccomandazioni della dichiarazione di Helsinki e Tokyo e le linee guida per l'uso di animali da esperimento della Comunità europea. Gli esperimenti sono stati approvati dal comitato di cura animale presso l'Università di Ben-Gurion del Negev.
1. preparazione ratti per la procedura sperimentale
Nota: Per la procedura sperimentale, selezionare ratti Sprague-Dawley maschi senza patologia conclamata, ciascuno di peso tra 300 e 350 g.
<ol><li>Casa tre ratti per gabbia, con chow e acqua disponibile ad libitum e consentire per almeno due settimane di adattamento, alternando 12h di luce e 12 ore di buio.</li>
	<li>Prima dell'inizio dell'esperimento, tutti i ratti per la presenza di comportamenti simil-depressivi utilizzando un 3 giorni di test test di preferenza di saccarosio (vedere il passaggio 4).
</li>
	<li>Escludi ratti che sono percepiti per visualizzare i comportamenti simil-depressivi e quelli che sono alloggiati nelle stesse gabbie come tale ratti, in modo da evitare la possibile diffusione della depressione ai ratti inalterate prima che l'esperimento ha cominciato in primo luogo, eliminano i ratti che test positivo per depressione; quindi, eliminare i ratti che sono alloggiati in gabbie stesse come i ratti depressi.</li>
	<li>Se necessario, escludere ulteriori ratti in modo casuale per creare gruppi di finali di 60 ratti per l'esperimento di depressione, 30 ratti per il gruppo di contagio e 30 ratsforthe gruppo di controllo.</li>
	<li>Tag ratti (utilizzando adesivi numerati), durante le procedure sperimentali. Temporaneamente trasferire singole gabbie ratti durante gli esperimenti (nella stessa camera e ciclo scuro per il CUS, saccarosio e prove in campo aperto e in una camera diversa e il ciclo scuro per il test di nuoto forzato e per uno dei fattori di stress (Vedi 2.1.7)) e restituirle la IR originale gruppi sociali alla fine.</li>
</ol>2. la procedura per l'induzione della depressione in ratti
Nota: Al fine di indurre depressione, sottoporre i 60 ratti nel gruppo CUS-esposti a diverse manipolazioni del CUS per cinque settimane20.
<ol><li>Esporre i ratti al giorno per 2 qualsiasi dei seguenti fattori di 7 sforzo, in ordine casuale; per un fattore di stress durante il giorno e l'altro di notte, per 5 settimane consecutive.<ol>
<li>Casa dei ratti in gruppi (sei ratti, invece dei soliti tre, per gabbia per 18 h);</li>
		<li>Posizionare i ratti in una gabbia inclinata (45° lungo l'asse verticale per 3 h);</li>
		<li>Privare i ratti di cibo (18 h);</li>
		<li>Privare i ratti dell'acqua (18 h) ed esporli alla bottiglie vuote di acqua immediatamente dopo un periodo di privazione acuta dell'acqua (1 h);</li>
		<li>Posizionare i ratti in una gabbia di biancheria bagnata (con 300 mL di acqua versata nella biancheria da letto) per 8 h (ciclo di notte);</li>
		<li>Esporre i ratti per illuminazione continua (24 h) e invertito il ciclo luce/buio (12 h) due volte a settimana;</li>
		<li>Posizionare i ratti in un ambiente caldo (40° C, 5 min - ciclo notte), con un altro apparecchio utilizzato per aumentare il calore.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Confermare lo sviluppo della depressione eseguendo un test di preferenza di saccarosio (vedere il passaggio 4). Nota: Il protocollo può essere sospeso dopo tutti i passaggi di cui sopra. Inoltre, se qualsiasi comportamento aberrante viene visualizzata da qualsiasi rat, quindi, eliminare il ratto e qualsiasi altro ratto che potrebbe aver risentito il ratto irregolare.</li>
</ol>3. la procedura per determinare la depressione-contagio nei ratti Naive
<ol><li>Stabilire 30 gruppi sociali con i ratti dal CUS-esposti (60) e depressione-contagio (30):<ol>
<li>Casa due CUS-ratti esposti per gabbia in 30 diverse gabbie.</li>
		<li>Aggiungere un ratto dal gruppo depressione-contagio per ogni gabbia contenente due CUS - esposti ratti.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Consentire la convivenza per 5 settimane , in condizioni standard, con chow e acqua disponibile ad libitum.</li>
	<li>Dopo 5 settimane di convivenza, soggetto tutti i gruppi per la preferenza di saccarosio, campo aperto e test di nuoto forzato nell'ordine mostrato in Figura 1.</li>
</ol>4. la preferenza di saccarosio prova21
<ol><li>Durante il ciclo scuro, posizionare i ratti in gabbie individuali nella stessa camera come l'alloggiamento.</li>
	<li>Mettere una bottiglia di 100 mL di soluzione di 1% (p/v) saccarosio in ogni gabbia per 24 h e consentire per adattamento.</li>
	<li>Rimuovere le bottiglie e privare i ratti di cibo e acqua per 12 h.</li>
	<li>Posizionare due bottiglie, una contenente 100 mL di soluzione di saccarosio (1%, p/v) e l'altra, 100 mL di acqua di rubinetto, in ogni gabbia per 4 h.</li>
	<li>Registrare il volume (in mL) di soluzione di saccarosio consumato sia acqua e calcolare l'affinità alla preferenza di saccarosio come segue: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57137/57137eq1.jpg">
</li>
</ol>5. la prova di campo aperto
Nota: Il test di campo aperto standard è comunemente usato per valutare i comportamenti dell'apparato locomotore, esplorativi e tipo di ansia e le risposte comportamentali alle novità in laboratorio animali22, 23. Questo test ha dimostrato anche di analizzare i comportamenti depressivi24. La prova sul campo aperto esamina due parametri opposti; paura dei roditori per la brillante luce che brilla al centro del campo contro il loro desiderio espressivo verso la novità. Quando ansioso, roditori tendono ad evitare di scoperta e soggiorno messo dalle mura (tigmotassia). Questa ansia è determinata dal grado di scongiurare il campo centrale illuminato. Campo aperto, costituito da una scatola nera di acrilico distorta (120 × 60 cm × 60 cm), è diviso in parte centrale (25%) e il resto della scatola (75%). Questo test si svolge nella stessa camera come l'alloggiamento durante il ciclo scuro. Una videocamera, sospesa a circa 200 cm sopra il campo, viene utilizzata per la registrazione il campo aperto prova22, 23.
<ol><li>Pulire l'apparecchio con 5% di alcool prima dell'introduzione di ogni animale. Posizionare il ratto nell'angolo del campo aperto rivolto verso la parete.</li>
	<li>Registrare il comportamento del ratto con una videocamera per 5 min.</li>
	<li>Analisi post-registrazioni dei seguenti parametri: tempo totale di percorrenza, velocità nella parte centrale del campo e tempo trascorso nella parte centrale del campo.</li>
</ol>6. la prova di nuoto forzato
Nota: Il principio della prova forzata di nuotata è basata sul fatto che quando i ratti sono costretti a nuotare in uno spazio ristretto, alla fine rinunciare e rimanere immobile, occasionalmente loro corpi in movimento per evitare l'annegamento21, 23. Dovuto l'enormità dell'apparato già assemblato, questo test è stato effettuato in camera diversa durante il ciclo scuro.
<ol><li>Per assuefazione, posizionare il ratto in un cilindro di vetro (altezza 100 cm, 40 cm di diametro e 40 cm di profondità) contenente acqua a temperatura ambiente per 15 minuti sessione di nuoto.</li>
	<li>Rimuovere il ratto dal cilindro, asciugare con carta assorbente e posto in una gabbia calda per 15 min.</li>
	<li>Ratto di ritorno alla sua casa gabbia (originale); Nota: Il protocollo può essere messo in pausa qui. Inoltre, se qualsiasi ratto nel corso di questa prova sta annegando, rimuoverla immediatamente.</li>
	<li>Il giorno seguente, filmare una sessione di nuoto 5-min e analizzare post-registrazioni dei seguenti parametri: immobilità, arrampicata e defecazione.</li>
</ol>

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<li>Lenze, E. J., Mulsant, B. H., Shear, M. K., Alexopoulos, G. S., Frank, E., Reynolds, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comorbidity+of+depression+and+anxiety+disorders+in+later+life%5BTitle%5D)+AND+%22Depress+Anxiety%22%5BJournal%5D)">Comorbidity of depression and anxiety disorders in later life.</a> Depress Anxiety. 14 (2), 86-93 (2001).</li>
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</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Secondo i risultati ottenuti con l'applicazione del presente protocollo, ratti sani, come gli esseri umani, sono stati influenzati negativamente da ratti depressi quando alloggiati insieme per un periodo prolungato. I ratti contagiosa depressi sono stati colpiti dai loro omologhi già depressi dopo cinque settimane di convivenza, che stabilisce un modello di depressione-contagio animale distinto per la prima volta. Uno studio più iniziale con maiali aveva anche suggerito statuti emotivi condivisi tra suini depresso e sano...

Prove effettuate in tempi recenti hanno suggerito che le malattie psichiatriche potrebbero essere facilmente diffondersi in individui in buona salute tramite contagio1. In questo caso, esso è chiamato contagio sociale ed è sparsa attraverso effetto, atteggiamento o comportamento. Questo richiede solo un individuo depresso di interagire con uno o più individui in buona salute, facilitando così la condivisione delle emozioni. Le relazioni sociali sono quindi una componente molto importante dell'umore, come essi definiscono il trasferimento di emozioni da un individuo a altro, a titolo di mimetismo e "contagio emotivo". Tempi per contagio effettive variano2, inevitabilmente a seconda della gravità dell'emozione e la forza di resistenza del destinatario.
Le significative conseguenze del contagio emotivo hanno assicurato che gli studi effettuati in passato principalmente focalizzata sugli aspetti negativi. Il risultato di effetti negativi assicurata depressione contagio ricevuto enorme attenzione, con studi che mostrano che la depressione di contagio aumenta la probabilità che le famiglie e gli amici di un individuo depresso che esibiscono comportamenti depressivi3 , 4 , 5 , 6.
Non ci sono motivi sia personali che economiche per affrontare la depressione. E ' comunemente causa la morbosità; e la sua incidenza di vita è tra 13,3 e 17,1% in Stati Uniti d'America7. I file dell'organizzazione mondiale della sanità mostrano che la depressione è quarto nella lista delle malattie globali con enorme fardello, che si verificano nelle persone di tutti i sessi, età, ceto sociale ed è ugualmente in grado di infliggere danni di salute cagionevole, influire sulla capacità di interagire con altri8,9,10,11e che causano disabilità in eccesso12,13. 850.000 vite sono stimate essere perso al suicidio depressivo ogni anno14. I pazienti sono in genere prescritto farmaci antidepressivi o consiglia di sottoporsi a terapia cognitivo-comportamentale. Questi treatmentshelp circa il 60-80% dei pazienti. Tuttavia, affrontare la malattia pone ancora un grosso problema; trattamento non è disponibile per tutti i pazienti depressi. Per coloro che ottengono il trattamento, alcuni soffrono di effetti collaterali, mentre gli altri mal conformi alle linee guida15. Il numero di pazienti resistenti al trattamento è fino a circa il 40%14. Con la depressione, l'economia ha sofferto frequentemente sotto forma di costose cure, una diminuzione della forza lavoro e i pensionamenti anticipati16. Una perdita annuale stimata di $ 44 miliardi negli Stati Uniti è causata dalla depressione, rappresentano quasi la metà di di perdita di produttività del paese17. Trattamento costoso richiede particolare attenzione medica, che comporta una serie di costi medici aumentati e rende necessaria la previsione di risultati indesiderati, come pure la scarsa risposta al trattamento18.
Non avendo incontrato un già collaudato modello animale per studiare il meccanismo di depressione-contagio, prevenzione e trattamento, questo ipotetico protocollo animale è stato utilizzato per la prima volta. Essa suggerisce che, attraverso la convivenza con i ratti esposti a CUS, ratti sani tendono ad esprimere comportamenti depressivi. L'obiettivo principale di questo esperimento era di istituire una procedura di laboratorio che hanno evidenziato il trasferimento della depressione, tramite contagio, da ratti CUS-esposti a quelle sane. Successivamente, i risultati sono stati valutati per determinare se la depressione-contagio era limitata solo a sintomi depressivi, o se era imparentato con altri disturbi dell'umore, come ansia. L'obiettivo finale dell'esperimento è quello di avvicinarsi al meglio la comprensione del meccanismo di depressione-contagio in gara per sviluppare nuovi approcci terapeutici19.

<table><tbody><tr><td>Gabbie per ratti</td><td>Techniplast</td><td>2000P</td><td>Custodia convenzionale per roditori. È stato utilizzato per l'alloggiamento dei ratti durante l'esperimento</td></tr> <tr><td></td><td>Acqua -</td><td></td> <td>Acqua di rubinetto comune utilizzata durante l'esperimento in diverse fasi</td></tr><tr><td>Purina Chow</td><td>Purina</td><td>5001</td><td>Il cibo da laboratorio per roditori somministrato a ratti, topi e criceti è una nutrizione del ciclo di vita che è stata utilizzata nella ricerca biomedica per oltre 5 decenni. Fornito ai ratti ad libitum in questo esperimento</td></tr><tr><td>Bottiglie</td><td>Techniplast</td><td>ACBT0262SU</td><td>Bottiglie da 150 ml riempite con 100 ml di acqua e 100 ml di soluzione di saccarosio all'1% (p/v)</td></tr><tr><td>Scatola di perspex nero senza lucentezza</td><td></td>-<td>-</td><td>(120 cm & volte; 60 cm & volte; 60 cm), divisa in una zona centrale del 25% e la zona di confine circostante</td></tr><tr><td></td><td>Videocamera Canon</td><td>-</td><td>Videocamera digitale per la registrazione ad alta definizione del comportamento del ratto durante il test in campo aperto</td></tr><tr><td>Alcol</td><td>Farmacia-99</td><td></td><td>% alcol farmaceutico diluito al 5% e utilizzato per lceaning la scatola di prova in campo aperto prima dell'introduzione di ogni ratto</td></tr><tr><td>Cilindro di vetro</td><td>-</td><td>-</td><td>100 cm di altezza, 40 cm di diametro e 40 cm di profondità cilindro utilizzato per eseguire il test di nuoto forzato</td></tr><tr><td>Asciugamani di carta</td><td>Farmacia</td><td>-</td><td>Asciugamani asciutti utilizzati per mantenere asciutti i ratti dopo averli immersi in acqua</td></tr><tr><td>Marcatori in grassetto</td> <td>-</td><td></td> <td>Marcatori in grassetto comuni utilizzati per etichettare i ratti</td></tr></tbody></table>

un nuovo metodo per indurre un comportamento depressione-come in ratti

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Contagiosa, la depressione è un fenomeno che deve ancora essere pienamente riconosciuto e questo deriva dal materiale insufficiente sul tema. Al momento, esiste un formato esistente per studiare il meccanismo di azione, prevenzione, contenimento e trattamento della depressione contagiosa. Lo scopo di questo studio, pertanto, era di stabilire il primo modello animale di depressione contagiosa.
Ratti sani possono contrarre i comportamenti depressivi se esposti ai ratti depressi. Depressione è indotta in ratti, sottoponendoli a diverse manipolazioni dello sforzo cronico imprevedibile (CUS) oltre 5 settimane, come descritto nel protocollo. Un test di preferenza successo saccarosio ha confermato lo sviluppo della depressione nei ratti. I ratti esposti CUS sono stati quindi ingabbiati con ingenuo ratti dal gruppo di contagio (ingenuo 1 ratto/2 depresso ratti in una gabbia) per altre 5 settimane. 30 gruppi sociali sono stati creati dalla combinazione di ratti naive e CUS-esposti.
Questo protocollo proposto depressione-contagio negli animali consiste principalmente di conviventi ratti esposti CUS e sani per 5 settimane. Per garantire che questo metodo funziona, una serie di test sono effettuati - in primo luogo, il test di preferenza di saccarosio al momento di indurre depressione ai ratti, quindi, la preferenza di saccarosio testare, a fianco di campo aperto e test di nuoto forzato alla fine del periodo di convivenza. In tutto l'esperimento, i ratti sono dati tag e vengono sempre restituiti alle loro gabbie dopo ogni test.
Alcune limitazioni a questo metodo sono le deboli differenze registrate tra lo sperimentale e gruppi nella prova della preferenza di saccarosio e l'esito traumatico irreversibile della prova forzata di nuotata di controllo. Questi possono essere opportuno prendere in considerazione l'idoneità prima di qualsiasi futura applicazione del protocollo. Ciò nonostante, seguito all'esperimento, i ratti ingenui sviluppato depressione di contagio dopo 5 settimane di condividere la stessa gabbia con i ratti esposti a CUS.

Il test di preferenza del saccarosio: Dopo esposizione di ratti a 5 settimane di CUS per l'induzione della depressione e poi successivamente esporre ratti sani ai ratti esposti CUS per altre 5 settimane, entrambi i gruppi di ratti visualizzato depressivo-come behaviorsat alla fine dell'esperimento (Figura 2). Le prove di questo comportamento è stata veduta nella preferenza ridotta per saccarosio dai ratti depressi, dopo CUS (65 ± 2,8%, p &lt; 0,001, Figu...

Questo protocollo descrive un nuovo modello con cui ratti sani potrebbero contrarre la depressione in un dato tempo periodthrough contagio dall'esposizione all'imprevedibile cronico ha sottolineato ratti (CUS).

Un nuovo metodo per indurre un comportamento depressione-come in ratti

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

L'obiettivo generale di questo modello è stabilire il contagio della depressione nei ratti. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campo comportamentale come il meccanismo d'azione, la prevenzione, il contenimento e il trattamento della depressione contagiosa. Il vantaggio principale di questa tecnica è che si tratta di un nuovo modello per stabilire la depressione contagiosa.Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla terapia della depressione perché al momento non esiste un formato esistente per studiare la depressione contagiosa. Per la procedura sperimentale, selezionare ratti maschi Sprague Dawley senza patologia conclamata di peso compreso tra 300 e 350 grammi ciascuno. Ospita tre ratti per gabbia con cibo e acqua disponibili ad libitum.Consentire un minimo di due settimane di adattamento su un ciclo di luce e buio di 12 ore. Prima dell'inizio dell'esperimento, testare tutti i ratti per la presenza di comportamenti depressivi utilizzando un test di preferenza del saccarosio di tre giorni. Per fare ciò, posizionare i ratti in gabbie individuali nella stessa stanza dell'alloggiamento durante il ciclo di buio.Mettere una bottiglia da 100 millilitri di

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Questo video dimostra il metodo per indurre lo stress cronico in un topo attraverso l'immobilizzazione ripetuta, che porta al rilascio di corticosterone e alla riduzione dell'attività del recettore del glutammato nei neuroni, che si traduce in un comportamento simile alla depressione.

Indurre un comportamento simile alla depressione in un topo attraverso lo stress da immobilizzazione

Fonte: Rich, M. T., et al. Utilizzo dell'optogenetica per invertire la neuroplasticità e inibire la ricerca di cocaina nei ratti. J. Vis. Exp. (2021)Questo video dimostra l'uso dell'optogenetica per indurre la depressione a lungo termine (LTD) nelle sinapsi del nucleo genicolato mediale all'amigdala laterale (MGN-LA), indebolendo il comportamento di ricerca di narcotici indotto da indizi in un modello di ratto. Il ratto, impiantato chirurgicamente con fibre ottiche e trasdotto viralmente per...

Induzione optogenetica della depressione a lungo termine per sopprimere il comportamento di ricerca di stupefacenti nei ratti

Questo protocollo descrive il test di nuoto forzato, che viene utilizzato per lo studio del comportamento depressivo nei roditori. Questa procedura consiste nel mettere un animale in un contenitore pieno d'acqua che alla fine porterà all'esibizione di un comportamento di immobilità, che è considerato riflettere la disperazione comportamentale.

Il Swim test forzato come modello di depressione-come Behavior

Qui vi presentiamo il protocollo sforzo delicato cronico imprevedibile nei topi. Questo protocollo induce un fenotipo simile a depressione a lungo termine e permette di valutare l'efficacia degli antidepressivi putativi a invertire i deficit di tipo di depressiva comportamentistici e neuromolecular.

Il protocollo di sforzo delicato cronico imprevedibile per indurre anedonia in topi

Qui presentiamo un protocollo per indurre la depressione post-ictus nei ratti, occludendo l'arteria cerebrale centrale attraverso l'arteria carotide interna. Usiamo il test di nuoto forzato Porsolt e il test di preferenza del saccarosio per confermare e valutare gli Stati d'animo depressivi indotti.

Una tecnica di occlusione dell'arteria cerebrale media per indurre la depressione post-ictus nei ratti

Questo articolo fornisce un protocollo semplificato e standardizzato per l'induzione del comportamento depressivo in topi cronicamente immobilizzati utilizzando un rimboschimento. Inoltre, vengono spiegati il comportamento e le tecniche fisiologiche per verificare l'induzione della depressione.

Un protocollo di stress cronico per indurre comportamenti simili alla depressione nei topi

Presentato qui è un protocollo per studiare il comportamento depressionico e anedonico nei ratti. Combina due metodi comportamentali consolidati, la preferenza per il saccarosio e i test di ipofagia indotti dalla novità, con un sistema automatizzato di monitoraggio dell'assunzione di cibo e liquidi, per indagare indirettamente il comportamento dei roditori utilizzando parametri surrogati.

Preferenza per il saccarosio e test di ipofagia indotti dalla novità nei ratti utilizzando un sistema automatizzato di monitoraggio dell'assunzione di cibo

Questo protocollo descrive un metodo per esaminare la gerarchia sociale in un modello di ratto. I ratti svolgono un complesso compito di immersione per cibo in cui formano una gerarchia distinta in base alla loro volontà di immergersi sott'acqua e nuotare per ottenere un pellet alimentare. Questo metodo viene utilizzato per comprendere il processo decisionale e le relazioni sociali tra animali altamente sociali in piccoli gruppi.

Un complesso compito subacqueo per il cibo per indagare l'organizzazione sociale e le interazioni nei ratti

Il modello murino di disperazione cronica (CDM) della depressione consiste in sessioni di nuoto forzate ripetitive e un'altra fase di nuoto ritardata come lettura. Rappresenta un modello idoneo per l'induzione di uno stato depressivo cronico stabile per almeno 4 settimane, modificabile per valutare interventi di trattamento subcronico e acuto.

Modelli animali di depressione - Modello di disperazione cronica (CDM)

Questo articolo copre le procedure per indurre risposte allo stress utilizzando lo stress di contenzione fisica nei topi e nei ratti. Vengono discusse ulteriori considerazioni che dovrebbero essere osservate quando si seleziona e si utilizza lo stress di ritenuta nei modelli di roditori.

Contenzione per indurre stress in topi e ratti

Questo articolo presenta un protocollo per l'induzione di un modello unico di disturbo bipolare nel ratto che cattura sia il comportamento maniacale che quello depressivo.

Sviluppo di un modello di ratto per il disturbo bipolare

Scopri un nuovo modello di depressione contagiosa nei ratti Sprague Dawley utilizzando stress cronico imprevedibile e coabitazione. Questo metodo permette di studiare meccanismi, prevenzione e trattamento della trasmissione comportamentale.

Un nuovo metodo per indurre un comportamento depressione-come in ratti

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