Name: Un ratto di modello di affaticamento centrale utilizzando una versione modificata più piattaforma metodo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-14T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Scopri il metodo della piattaforma multipla modificata per indurre affaticamento centrale nel ratto. Questo modello combina fattori fisici e psicologici per studiare i meccanismi della stanchezza e le alterazioni dei neurotrasmettitori.

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Questo lavoro è stato supportato da Natural Science Foundation di Pechino (No.7162124) e Xin-ao Foundation per Pechino all'Università di medicina cinese.

Tutti gli animali sono stati mantenuti in conformità con le linee guida dalla legislazione cinese sull'uso etico e cura degli animali di laboratorio.
1. pre-modellazione preparazione
<ol><li>
Preparazione in laboratorio
	<ol>
<li>Eseguire la lampada UV per almeno 30 min prima dell'esperimento.</li>
		<li>Controllo della temperatura di laboratorio a 25 ± 3 ° C e umidità relativa 30% circa.</li>
		<li>Accendere il luce alle 06:00 laboratorio e spegnerlo alle 18:00 per stabilire un ciclo luce/buio di 12 h/12 h.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Costruzione di box piattaforma multiple
	<ol>
<li>Costruire un serbatoio di plastica opaco senza una copertura di 110 × 60 × 40 cm3.</li>
		<li>Difficoltà quindici piattaforme circolari (h = 8 cm, d = 6,5 cm) sul fondo del serbatoio, quale inserviente distribuire in tre righe e cinque colonne. Lasciare spazio sufficiente tra ogni piattaforma, circa 10 cm tra colonne e 13 cm tra le righe.</li>
		<li>Impostare una presa di acqua sulla parte laterale del serbatoio e installare un rubinetto.</li>
		<li>Fare un coperchio di ferro-rete metallica per il carro armato con una scatola di cibo appesi su di esso.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Raggruppamento e ratti di alloggiamento Nota: I ratti maschii di Wistar di 8 settimane di vita, peso di circa 200-210 g, sono utilizzati nell'esperimento. I ratti vivono in gruppi durante il processo di modellazione.<ol>
<li>Numero di radici di coda dei ratti con un pennarello.</li>
		<li>Pesare i ratti, escludere l'estremamente leggeri o pesanti e dividere il resto in modo casuale nei gruppi modello e controllo.</li>
		<li>Mettere delicatamente i ratti in gabbie pulite e consentire loro di ambientarsi al laboratorio per almeno 3 giorni. Fornire acqua sufficiente e approvvigionamento di generi alimentari.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. modellazione con MMPM
Nota: Il processo inizia alle 18:00 e finisce alle 08:00 del giorno successivo, per un totale di 14 h al giorno, per 21 giorni. Per evitare i fattori di interferenza, la stessa persona è tenuta ad effettuare l'intero esperimento, mentre indossa il cappotto del laboratorio stesso. 10 ratti Wistar sono usati nell'esperimento.
<ol><li>Appoggiate il serbatoio su una superficie piana, ad esempio, il piano. Quindi riempire il serbatoio con circa 7 cm di acqua tiepida (25 ± 3 ° C), circa 1 cm sotto la piattaforma piana.</li>
	<li>Preparare abbastanza cibo e bevande per tutti i ratti nel serbatoio per 1 giorni. Messo di foraggio e acqua nel contenitore di cibo e appenderlo sulla copertina. Nota: Alcuni ratti intelligenti imparano a riposare sulla casella di cibo. Se è così, li guida nel serbatoio.</li>
	<li>Prendere i ratti del gruppo modello fuori dalla gabbia, li afferra per la coda e metterli delicatamente nel serbatoio. Avviare tutti i ratti nell'acqua invece le piattaforme per motivare la loro paura dell'acqua. Assicurarsi che ogni ratto ottiene una piattaforma per stare su, mentre ratti del gruppo di controllo rimangono nelle loro gabbie originale con cibo e acqua sufficienti.</li>
	<li>Coprire il serbatoio. Monitorare i ratti per evitare lesioni accidentali. Se un ratto rimane in acqua per più di 1 ora senza salire sulla piattaforma, prenderlo dal serbatoio e rimuoverlo dal test.</li>
	<li>Dopo 14h, prendere i ratti di modello dal serbatoio e asciugare i capelli con un phon. Re-mark code dei ratti se si affievolisce. Restituire i ratti a loro gabbie originale e fornire loro cibo e acqua sufficienti.</li>
	<li>Lavare ogni angolo della vasca. Elevare un lato del carro armato e aprire il rubinetto per il liquame di deflusso.</li>
	<li>Disinfettare il serbatoio con uno spray di etanolo 75% ed esporlo alla luce UV.</li>
</ol>3. modello di valutazione: Test comportamentali
Nota: Tutte le prove sono eseguite in laboratorio comportamentale. Rumore e luce supplementare non consentiti durante la prova per evitare disturbi. Se possibile, utilizzare la stessa persona (e) per condurre ogni test. Un cappotto scuro e guanti sono necessari per il riconoscimento di scala di grigi nell'elaborazione dell'immagine. Eseguire l'OFT prima come ha il minimo effetto sul comportamento del ratto.
<ol><li>
OFT
	<ol>
<li>Controllare il registratore sulla casella campo aperto per assicurarsi che esso sia collegato correttamente alla workstation e copre ogni angolo della scatola. Regolare l'illuminazione per eliminare le ombre nella casella.</li>
		<li>Spostare i ratti in laboratorio comportamentale nelle loro gabbie originale. Consentire loro di acclimatare per almeno 1 h prima del test.</li>
		<li>Pulire e disinfettare la casella con etanolo al 75% per garantire che non c'è nessun escremento o odore lasciato da esperimento precedente.</li>
		<li>Rimuovere un ratto dalla gabbia con il suo schienale e inserirlo delicatamente l'area centrale della finestra. Ritirarsi rapidamente le braccia dalla casella per non bloccare il tiro.</li>
		<li>Inserire il numero del ratto e avviare la registrazione. Contare e registrare la frequenza di attività verticali del ratto, tra cui l'allevamento e l'arrampicata.</li>
		<li>Dopo 5 min, interrompere la registrazione, prendere il topo fuori dalla scatola e restituirlo alla gabbia.</li>
		<li>Ripetere i passaggi da 3.1.3 - 3.1.6 finché tutti i ratti hanno terminato il test.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
EPM
	<ol>
<li>Eseguire la procedura di verifica preliminare e acclimatazione per quanto riguarda l'OFT (passaggi 3.1.1 - 3.1.2).</li>
		<li>Rimuovere un ratto dalla gabbia con il suo schienale e metterla delicatamente sulla parte di giunzione dei due bracci. Atterrare il topo verso il braccio sinistro aperto e lasciare in fretta per non bloccare il tiro.</li>
		<li>Inserire il numero del ratto e avviare la registrazione. Contare e registrare la frequenza delle entrate differenti del braccio. Se il ratto scende il labirinto nel test, pick up e rispedirlo a labirinto. Registrare informazioni dettagliate per l'analisi dei dati.</li>
		<li>Dopo 5 min, interrompere la registrazione, prendere il topo fuori e restituirlo alla gabbia.</li>
		<li>Rimuovere gli escrementi e pulire il labirinto con etanolo di 75% per eliminare l'odore del ratto ex.</li>
		<li>Ripetere i passaggi 3.2.2 - 3.2.5 finché tutti i ratti hanno terminato il test.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Test di ES
	<ol>
<li>Riempire il serbatoio di nuoto (70 × 30 × 110 cm3) con 80 centimetri di acqua calda (25 ± 3 ° C). Nota: Se c'è un termostato nel serbatoio, la temperatura dell'acqua dovrebbe essere impostata circa 37 ° C, che è simile alla temperatura corporea del ratto. In caso contrario, impostarlo a temperatura ambiente per mantenere costante.</li>
		<li>Fanno un carico per ogni ratto con perno grappoli e legarlo delicatamente sulla sua radice della coda. Il carico pesa 10% del peso del ratto.</li>
		<li>Afferrare un topo dalla coda e gettarlo nel carro armato di swimming. Se i ratti huddle o aggrappano alla parete, li contraddistingue e spingerli indietro nell'acqua.</li>
		<li>Avviare il cronometraggio al momento quando il ratto viene messo in acqua e i tempi di arresto quando è esaurita, che è dimostrato come il fallimento a lottare fuori dall'acqua con la bocca e il naso sotto l'acqua per più di 10 s. Nota: A volte, esaurimento e annegamento si verificano all'improvviso. Essere sicuri di avere abbastanza sperimentatori per registrare e salvare l'animale allo stesso tempo.</li>
		<li>Rimuovere i ratti esausti fuori dall'acqua senza interrompere gli altri. Asciugare i capelli, ri-contrassegnare i loro numeri e rimandarli a gabbia.</li>
		<li>Al termine di un gruppo, cambiare l'acqua nel serbatoio. Al termine di tutti i ratti, svuotare il serbatoio di nuoto e pulire e sterilizzarlo con etanolo e luce UV.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. modello di valutazione: Neurotrasmettitore centrale rilevazione
<ol><li>Anestetizzare il topo con l'iniezione intra-peritoneale di idrato di cloralio 10% (3 mL/kg) fino a quando è incosciente.</li>
	<li>Decapita il ratto.</li>
	<li>Fare un'incisione longitudinale lungo la linea post-mediale, aprire il cranio ad entrambi i lati ed esporre il cervello. Capovolgere il cranio, il cervello di rimuovere e mettere il cervello su un sacchetto di ghiaccio.</li>
	<li>Separare e rimuovere l'ipotalamo, che è la zona a forma di diamante nella parte centrale della base del cervello che ha un chiaro confine con tessuti circostanti. Posto in una provetta sterile e congelarlo con azoto liquido. Conservare tutti i campioni in frigorifero-80 ° C.</li>
	<li>Rilevare il contenuto di DA e 5-HT nell'ipotalamo mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC)8.</li>
</ol>

<ol><li>Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neural+substrates+of+physical+fatigue+sensation+to+evaluate+ourselves%3A+a+magnetoencephalography+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study.</a> Neuroscience. 261, 60-67 (2014).</li>
<li>Dalsgaard, M. K., Secher, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Brain+at+Work%3A+A+Cerebral+Metabolic+Manifestation+of+Central+Fatigue%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">The Brain at Work: A Cerebral Metabolic Manifestation of Central Fatigue?</a> Journal of Neuroscience Research. 85 (15), 3334-3339 (2007).</li>
<li>Chaudhuri, A., Behan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatigue+in+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Fatigue in neurological disorders.</a> The Lancet. 363, 978-988 (2004).</li>
<li>Baston, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise-induced+central+fatigue%3A+a+review+of+the+literature+with+implications+for+dance+science+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dance+Medicine+%26+Science%22%5BJournal%5D)">Exercise-induced central fatigue: a review of the literature with implications for dance science research.</a> Journal of Dance Medicine & Science. 17 (2), 53-62 (2013).</li>
<li>Yamashita, M., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tryptophan+and+Kynurenic+Acid+May+Produce+an+Amplified+Effect+in+Central+Fatigue+Induced+by+Chronic+Sleep+Disorder%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Tryptophan+Research%22%5BJournal%5D)">Tryptophan and Kynurenic Acid May Produce an Amplified Effect in Central Fatigue Induced by Chronic Sleep Disorder.</a> International Journal of Tryptophan Research. 7, 9-14 (2014).</li>
<li>Lee, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+duration+of+one+bout+treadmill+exercise+on+cell+proliferation+and+central+fatigue+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Exercise+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">The impact of duration of one bout treadmill exercise on cell proliferation and central fatigue in rats.</a> Journal of Exercise Rehabilitation. 9 (5), 463-469 (2013).</li>
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<li>Machado, R. B., Hipo'lide, D. C., Benedito-Silva, A. A., Tufik, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+deprivation+induced+by+the+modified+multiple+platform+technique%3A+quantification+of+sleep+loss+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Sleep deprivation induced by the modified multiple platform technique: quantification of sleep loss and recovery.</a> Brain Research. 1004 (1-2), 45-51 (2004).</li>
<li>Alzoubi, K. H., Khabour, O. F., Tashtoush, N. H., AI-Azzam, S. I., Mhaidat, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Effect+of+Pentoxifylline+on+Sleep-Deprivation+Induced+Memory+Impairment%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Effect of Pentoxifylline on Sleep-Deprivation Induced Memory Impairment.</a> Hippocampus. 23 (9), 812-819 (2013).</li>
<li>Pires, G. N., Tufik, S., Andersen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grooming+analysis+algorithm%3A+Use+in+the+relationship+between+sleep+deprivation+and+anxiety-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+and+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Grooming analysis algorithm: Use in the relationship between sleep deprivation and anxiety-like behavior.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 41, 6-10 (2013).</li>
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<li>Arai, M., Yamazaki, M., Inoue, K., Fushiki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intracranial+injection+of+transforming+growth+factor-beta+relevant+to+central+fatigue+on+the+waking+electroencephalogram+of+rats+Comparison+with+effects+of+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+and+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Effects of intracranial injection of transforming growth factor-beta relevant to central fatigue on the waking electroencephalogram of rats Comparison with effects of exercise.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 26 (2), 307-312 (2002).</li>
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<li>Tang, X., Yang, L., Sanford, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+variation+in+sleep+and+motor+activity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Individual variation in sleep and motor activity in rats.</a> Behavioural Brain Research. 180 (1), 62-68 (2007).</li>
<li>Stanford, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Open+Field+Test%3A+reinventing+the+wheel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The Open Field Test: reinventing the wheel.</a> Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134-135 (2007).</li>
<li>Ahn, S. H., et al. <a target="_blank" href="https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/19768354.2013.790840">Basal anxiety during an open field test is correlated with individual differences in contextually conditioned fear in mice.</a> Animal Cells and Systems. 17 (3), 154(2013).</li>
<li>Costa, A. A., Morato, S., Roque, A. C., Tin ós, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+computational+model+for+exploratory+activity+of+rats+with+different+anxiety+levels+in+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A computational model for exploratory activity of rats with different anxiety levels in elevated plus-maze.</a> Journal of Neuroscience Methods. 236, 44-50 (2014).</li>
<li>Liu, Z., Wu, Y., Liu, T., Li, R., Xie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+regulation+in+a+rat+model+of+exercise-induced+chronic+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Serotonin regulation in a rat model of exercise-induced chronic fatigue.</a> Neuroscience. 349, 27-34 (2017).</li>
<li>Foley, T. E., Fleshner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroplasticity+of+dopamine+circuits+after+exercise%3A+implications+for+central+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroMolecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neuroplasticity of dopamine circuits after exercise: implications for central fatigue.</a> NeuroMolecular Medicine. 10 (2), 67-80 (2008).</li>
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</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Il MMPM è originariamente progettato per privazione di sonno9. Ratti sono lanciati in un serbatoio d'acqua con piattaforme fissate sul fondo. Spinti dalla paura istintiva di acqua, ratti rimangono in piedi sulle piattaforme e si verifica senza dormire. Lo studio dimostra che diverse ore di privazione di sonno conducono ai vari cambiamenti nel comportamento del ratto e dell'umore, tra cui riconoscimento danno10, emozioni negative11e fatica centrale. A...

La fatica è uno dei fattori principali che minacciano la salute umana1. Negli ultimi decenni, varie ricerche hanno dimostrato che la stanchezza è marginalmente-triggered ma centrale-driven e sempre accompagnato con disturbi emotivi e cognitivi. Fisiologo italiano r. Mosso inizialmente proposto la parola fatica centrale2. È generalmente definito come attività volontaria limitata e cognizione danno dovuto disfunzione della trasmissione degli impulsi nel sistema nervoso centrale (SNC)3. Confrontato con affaticamento muscolare periferico, affaticamento centrale sottolinea cambiamenti nel SNC, nonché il conseguenti disturbi emozionali/comportamentistici, tra cui depressione, ansia, cognizione danno e perdita di memoria. Uno studio mostra che molti fattori possono indurre fatica centrale, tra cui un'eccessiva attività fisica e lo stress mentale sono abbastanza indispensabile4. Per quanto riguarda la patogenesi, le teorie come il triptofano-kynurenine pathway ipotesi5 spiegano i cambiamenti in determinate vie; Tuttavia, studi più approfonditi sono comunque tenuti a rivelare le correlazioni di centrale-periferico di affaticamento centrale.
Poiché il meccanismo di fondo di affaticamento centrale è ancora chiaro, un modello animale efficace è molto importante per ulteriori ricerche. I modelli esistenti di affaticamento sono per lo più indotta da esercizio fisico eccessivo, come tapis roulant6 e nuoto peso caricato7, con poca preoccupazione su fattori mentali. Per meglio simulare lo sviluppo di affaticamento centrale, il nostro gruppo ha sviluppato un modello del ratto con la MMPM. Durante il processo di modellazione, ratti rimangono in piedi sulle piattaforme strette nella casella piattaforma Multiple per lunghe ore, tra cui parte del tempo di sonno. Diverso dai modelli di esercizio fisico eccessivo, il modello MMPM utilizza privazione parziale di sonno come un fattore mentale in considerazione la patogenesi complessa di affaticamento centrale.
Per la valutazione del modello, usiamo i test OFT ed EPM per determinare ansia umore e attività di volontariato. Il test di ES viene eseguito per misurare le prestazioni dei muscoli periferici. Inoltre, prendiamo del cervello del ratto e rilevare la dopamina (DA) / contenuto di serotonina (5-HT) in entrambi hypothalamuses per osservare le differenze di neurotrasmettitore centrale.
Il protocollo presentato di seguito è progettato per affaticamento centrale modello indotto da ripetute attività fisica e la mancanza di sonno, che imita una condizione comune nella vita umana. Tuttavia, regolando la durata del modello, può essere utilizzato in molti altri campi, come negli studi di osservazione e lo stress di sonno. In futuro ricerca, speriamo che questo modello vi aiuterà a scoprire altre CNS cambiamenti e la loro connessione con il sistema periferico, per rivelare il meccanismo di patogenesi di affaticamento centrale.

<table><tbody><tr><td>Serbatoio dell'acqua per la privazione del sonno a piattaforma multipla</td><td>Personalizzazione, è fornito dal laboratorio neuroimmunologico dell'Università di Medicina</td><td></td> Cinese di Pechino <td>110 cm x 60 cm x 40 cm. Ci sono 15 piccole piattaforme di plastica nella parte inferiore. La piccola piattaforma ha un diametro di 6,5 cm e un'altezza di 8 cm</td></tr><tr><td>Ratti Wistar</td><td>Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Company</td><td>numero di licenza SYXK (Pechino) 2016-0011</td><td>Utilizzare 32 ratti maschi sani Wistar, di 8 settimane (200-210 g)</td></tr> <tr><td>Cromatografo liquido ad alte prestazioni Agilent 1100LC</td><td>Agilent</td><td>&nbsp; G1379A, G1311A, G1313A , G1316A&nbsp;</td><td>&nbsp; G1379A, pompa cromatografica tipo G1311A, campionatore automatico G1313A, scatola di temperatura della colonna G1316A</td></tr><tr><td>Rivelatore elettrochimico DECADE II SDC elettrodo</td> di carbonio vetroso <td>dell'azienda</td><td></td> olandese ANTEC<td>, elettrodo di riferimento Ag/AgCl, stazioni di lavoro (Clarity CHS)</td></tr><tr><td>Centrifuga di refrigerazione ad alta velocità Biofuge Stratos</td><td>HERAEUS</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VCX130 Strumento di fratturazione ad ultrasuoni</td><td>SONICS</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bilancia elettronica ACS-ZEAS</td><td>Sviluppo della tecnologia Phos, Pechino.</td><td></td><td>Il peso dei ratti pesati può essere preciso fino a 0,1 g.</td></tr><tr><td>Personalizzazione della scatola a campo aperto</td><td>, è fornita dal laboratorio neuroimmunologico dell'Università di Medicina Cinese di Pechino scatola</td><td></td><td>di legno di campo aperto&nbsp; 100 cm per 100 cm x 40 cm, parete interna e fondo come il grigio. Il fondo è diviso in 25 quadrati di uguale area, ognuno dei quali misura 20 cm x 20 cm, e le 16 griglie lungo la parete esterna sono quelle esterne, mentre le altre 9 griglie sono centrali. La telecamera è montata sopra la mediana.</td></tr><tr><td>Elevato Plus-labirinto</td><td>Pechino zhongshi dechuang sviluppo tecnologico co. LTD.</td><td></td><td>Le braccia aperte e le braccia chiuse della croce sono composte da 30 cm x 5 cm x 15 cm, e l'area centrale è di 5 cm x 5 cm, con una telecamera montata sopra il centro e alta 45 cm.</td></tr><tr><td>secchio da nuoto per topi.</td><td>Zhenhua strumento biologico equipment co., LTD. Anhui, Cina.</td><td></td><td>Il volume del tamburo di plastica è di 70 cm x 30 cm x 110 cm, che viene utilizzato per nuotare nei ratti.</td></tr><tr><td>Termometro</td><td>Shiya strumento co., LTD., changzhou, Cina.</td><td></td><td>Controllare la temperatura dell'acqua</td></tr><tr><td>Piccola pompa dell'acqua</td><td>Xincheng technology co., LTD., chengdu, Cina.</td><td></td><td>Utilizzato per il serbatoio dell'acqua e il comportamento di nuoto.</td></tr><tr><td>Software comportamentale Ethovition3.0.</td><td>Nuldus, Paesi Bassi</td><td></td><td>Analisi della misurazione dei video sul comportamento dei ratti.</td></tr></tbody></table>

un ratto di modello di affaticamento centrale utilizzando una versione modificata più piattaforma metodo

A Rat Model of Central Fatigue Using a Modified Multiple Platform Method

In questo articolo, abbiamo introdotto un modello del ratto di affaticamento centrale utilizzando la modifica metodo di piattaforma multiplo (MMPM). La casella più piattaforma è stata progettata come un serbatoio di acqua con piattaforme strette sul fondo. I ratti di modello sono state inserire nel serbatoio e levato in piedi sulle piattaforme per 14 h (18:00-08:00) al giorno per 21 giorni consecutivi, con un gruppo di controllo vuoto impostato per contrasto. Alla fine della modellazione, ratti nel gruppo modello hanno mostrato un'evidente aspetto affaticato. Per valutare il modello, abbiamo effettuato numerosi test comportamentali, tra cui il campo aperto test (OFT), l'elevato plus prova del labirinto (EPM) e la prova di nuoto esaustivo (ES). I risultati hanno mostrato quell'ansia, compromissione della cognizione spaziale, performance muscolare povero e rifiutato attività volontaria presentata nei ratti di modello confermano la diagnosi di affaticamento centrale. Modifiche dei neurotrasmettitori centrali inoltre verificato il risultato. In conclusione, il modello simulato con successo centrale fatica, e lo studio futuro con il modello può aiutare a rivelare il meccanismo patologico della malattia.

Descriviamo un modello del ratto di affaticamento centrale utilizzando MMPM. 24 ratti Wistar sono divisi a caso nel gruppo di controllo e il gruppo di modelli, con 12 ratti in ogni gruppo. L'apparato di modello è stato progettato come un serbatoio di acqua con piattaforme strette sul fondo (Figura 1). Ratti di modello stanno sulle piattaforme per 14 h al giorno, compreso il tempo parziale di sonno, per 21 giorni (Figura 2).
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Qui, presentiamo un protocollo per introdurre un modello del ratto di affaticamento centrale utilizzando la modifica metodo di piattaforma multiplo (MMPM).

Un ratto di modello di affaticamento centrale utilizzando una versione modificata più piattaforma metodo

In this article, we introduced a rat model of central fatigue using the modified multiple platform method (MMPM). The Multiple Platform box was designed ...

Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nella costruzione del modello di fatica centrale. Ad esempio, come produrre la stanchezza sia dal punto di vista fisico che psicologico e come valutarla. Il vantaggio principale di questa tecnica è quello di combinare i fattori mentali con il metodo della piattaforma multipla modificata per simulare meglio l'insorgenza della fatica centrale.L'idea ci è venuta per la prima volta quando abbiamo notato la stretta associazione tra la privazione intermittente del sonno e l'affaticamento centrale. Abbiamo provato diverse ore e giorni di privazione per indurre l'affaticamento centrale e, infine, abbiamo scoperto che 14 ore su 21 giorni era il modello giusto. Il modello mostra una buona validità nell'affaticamento centrale e può essere utilizzato in studi futuri per aiutare a rivedere il meccanismo alla base della malattia.Inizia costruendo un serbatoio di plastica opaca senza coperchio. Fissa 15 piattaforme circolari sul fondo del serbatoio, che si distribuiscono ordinatamente in tre file e cinque colonne. Lascia abbastanza spazio tra ogni piattaforma, circa 13 centimetri tra le righe e 10 centimetri tra le colonne.Installare un rubinetto nell'uscita dell'acqua sul lato laterale del serbatoio. Infine, fai una copertura in rete metallica di ferro per il serbatoio, con una scatola per il cibo appesa. Inizia numerando le radici della coda di topo con un pennarello.Pesare i ratti, escludendo quelli estremamente leggeri o pesanti, e dividere il resto in modo casuale nel modello e nei gruppi di controllo. Metti delicatamente i ratti nelle gabbie pulite e lasciali acclimatare al laboratorio per almeno tre giorni. Fornire acqua e cibo a sufficienza.Iniziare posizionando il serbatoio su un servizio piatto, quindi riempirlo con sette centimetri di acqua tiepida, circa un centimetro sotto la piattaforma piana. Quindi metti il foraggio e l'acqua di un giorno nella scatola del cibo e appendila al coperchio. Quindi, estrai il gruppo modello di ratti dalla gabbia per la coda e mettili delicatamente nel serbatoio.Lancia tutti i ratti in acqua invece che nelle piattaforme per motivare la loro paura dell'acqua. Assicurati che ogni ratto abbia una piattaforma su cui stare in piedi, mentre i ratti del gruppo di controllo rimangono nelle loro gabbie originali con cibo e acqua sufficienti. Quindi, copri il serbatoio e monitora i topi.Dopo 14 ore, estrarre i ratti modello dalla vasca e asciugare i capelli con un asciugacapelli. Osserva la coda dei topi se svanisce. Quindi, riporta il topo nella gabbia originale con cibo e acqua.Infine, sciacquare il serbatoio e aprire il rubinetto per far defluire le acque reflue. Quindi, sterilizzare il serbatoio con uno spray all'etanolo al 75%. I risultati dei test in campo aperto indicano che, rispetto al gruppo di controllo, vi è una diminuzione significativa sia del movimento di impennata che della velocità media dell'attività volontaria nei ratti modello.Il test del labirinto elevato mostra che 21 giorni di modellazione hanno diminuito significativamente sia gli ingressi che la durata nel braccio aperto rispetto al gruppo di controllo, mentre c'è stato un aumento in quelli nel braccio chiuso. Il test di nuoto esaustivo ha indicato che la durata del nuoto del gruppo modello è significativamente più breve rispetto al gruppo di controllo. Infine, questi risultati indicano che la dopamina nell'ipotalamo, così come il rapporto tra dopamina e serotonina, diminuisce significativamente nel gruppo modello rispetto al gruppo di controllo, mentre il contenuto di serotonina aumenta in modo significativo.Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come costruire un carro armato a piattaforma multipla e applicarlo nel tuo modello di fatica centrale. Questo è un modello non invasivo, facile da padroneggiare. Mentre si prova questo modello, è fondamentale tenere d'occhio il resto, poiché sono piuttosto aggressivi nelle prime due settimane e potrebbero verificarsi lesioni.Sebbene questo modello miri a fornire informazioni sull'affaticamento centrale, può essere applicato anche ad altre malattie combinando fattori o regolando la durata del modello, come l'affaticamento da navigazione e la depressione.

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