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DOI: 10.3791/57936-v
Ofir Klein1, Amit Roded1, Koret Hirschberg2, Mitsunori Fukuda3, Stephen J. Galli4, Ronit Sagi-Eisenberg1
1Department of Cell and Developmental Biology, Sackler Faculty of Medicine,Tel Aviv University, 2Department of Pathology, Sackler Faculty of Medicine,Tel Aviv University, 3Laboratory of Membrane Trafficking Mechanisms, Department of Developmental Biology and Neurosciences, Graduate School of Life Sciences,Tohoku University, 4Departments of Pathology and of Microbiology and Immunology and Sean N. Parker Center for Allergy and Asthma Research, School of Medicine,Stanford University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Qui abbiamo dettaglio un metodo per l'imaging di cellule vive di esocitosi regolata. Questo metodo utilizza FITC-Destrano, che si accumula in organelli lisosoma-correlati, come reporter. Questo semplice metodo permette anche di distinguere tra diverse modalità di esocitosi regolata in cellule che sono difficili da manipolare geneticamente.
Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nella ricerca sull'esocitosi regolata, consentendo ai ricercatori di distinguere tra le diverse modalità di esocitosi nella cellula vivente. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è semplice e richiede una perturbazione minima per le cellule. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sull'esocitosi dei mastociti, può essere applicato anche ad altre cellule secretorie come i neutrofili e gli eosinofili.
Per iniziare, prepara una soluzione madre di 20 volte il tampone di Tyrode secondo il protocollo di testo. Quindi, mescolare tre milligrammi di polvere di FITC-destrano con tre millilitri di terreno di coltura. Filtrare il FITC-destrano disciolto con un'unità filtrante a siringa in acetato di cellulosa.
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