Name: Scelta e analisi biologiche No-scelta per studiare limpupamento preferenza e il successo di emersione di Ectropis grisescens (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 19 s
Description: Scopri i bioassaggi con e senza scelta per studiare le preferenze di impupamento di Ectropis grisescens. Questo metodo analizza l'impatto di umidità e substrato sul successo di emersione, fornendo dati utili per strategie di gestione integrata dei fitofagi del tè.

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Ringraziamo Yuzhen Wen, Shiping Liang, Shengzhe Jian e Li Yanjun (College of Forestry e architettura del paesaggio, South China Agricultural University) per il loro aiuto nel insetto allevamento e set-up sperimentale. Questo lavoro è stato finanziato dal National Natural Science Foundation of China (Grant No. 31600516), la Fondazione di scienze naturali di Guangdong (Grant No. 2016A030310445) e la scienza e tecnologia pianificazione progetto della provincia di Guangdong (Grant No. 2015A020208010) .

1. umidità-scelta le analisi biologiche per determinare impupamento preferenza di E. grisescens
<ol><li>
Come ottenere mature ultimo-instar larve di E. grisescens
	<ol>
<li>Tagliare i germogli freschi (30-40 cm di lunghezza) di piante di tè (Camellia sinensis L.). Inserire 25-30 germogli in un matraccio da triangolare a 250 mL. Riempire il pallone con acqua del rubinetto. Mettere 3-4 boccette (con germogli di tè) in una bacinella di plastica (lato superiore: 51 cm di diametro; lato inferiore: diametro 40 cm; altezza: 16 cm).</li>
		<li>Rilasciare le larve di 1.000-2.000 (secondo al quinto instar) della Colonia laboratorio di E. grisescens sulle foglie dei germogli di tè in ogni bacino. Mantenere queste larve alle condizioni di laboratorio controllate [un fotoperiodo di 14 h di luce seguita da 10 h di buio (14:10 L:D), 60-90% di umidità relativa (RH) e 24-28 ° C]. Trasferire con cautela le larve su foglie fresche di mano ogni 1-2 d. Ogni giorno rimuovere feci e detriti dal fondo dei bacini.</li>
		<li>Selezionare mature ultimo-instar larve che cadono dalle foglie dei germogli tè e vagano attivamente sul fondo del bacino. Ottenere almeno 240 larve mature per garantire che abbastanza larve sono disponibili per le analisi biologiche. Nota: Selezionare solo le larve attivamente errante per gli esperimenti. Non selezionare le larve che rimangono sulle foglie, perché queste non sono pronte a pupate. Inoltre, non selezionare membranose con attività limitate mobile perché essi non attivamente cerca le giuste condizioni dopo essere stato rilasciato in arene analisi biologica.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparazione del substrato
	<ol>
<li>Raccogliere e identificare 4 tipi di substrato (ad es., sabbia, terriccio sabbioso 1, sabbia terriccio 2 e limo del terriccio) utilizzando il metodo di Idrometro20. Sterilizzare il terreno e la sabbia a 80 ° C forno essiccatore per &gt; 3 d e quindi asciugare completamente il terreno e la sabbia a 50 ° C per diverse settimane fino a quando il peso a secco dei campioni substrato non cambia piu ' nel tempo.</li>
		<li>Terreno il terreno asciutto con mortai e pestelli di legno. Setacciare la sabbia e il terreno con messa a terra attraverso un setaccio di 3 mm e conservarle in sacchetti di plastica sigillabili.</li>
		<li>Calcolare il contenuto di umidità di ogni substrato (sabbia, sabbia terriccio 1, sabbia terriccio 2 o limo terriccio) come segue2: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/58126/58126eq1.jpg">
</li>
		<li>Aggiungere la quantità necessaria di acqua distillata in sacchetti di plastica sigillabili contenente il terreno asciutto o sabbia per preparare 5%-, 20%-, 35%-, 50%, 65% e 80%-umidità del substrato. Mescolare bene l'acqua distillata e il terreno o sabbia.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparazione di analisi biologica arena
	<ol>
<li>Dividere equamente i contenitori in polipropilene (lato superiore: 20,0 cm di lunghezza x 13.5 cm in larghezza, lato inferiore: 17,0 cm di lunghezza x 10.0 cm di larghezza, altezza: 6,5 cm) in 6 camere con lenzuola impermeabile cloruro di polivinile (PVC) (altezza: 3,5 cm). Difficoltà i fogli di PVC e sigillare le fessure con colla a caldo. Nota: Sigillare completamente ogni crepa per evitare acqua permeazione.</li>
		<li>Per ogni test, riempire le 6 camere utilizzando lo stesso tipo di substrato con contenuto di umidità differenti (5%-, 20%-, 35%-, 50%, 65% e 80% umidità) (Figura 1a). Nota: Utilizzare solo 1 tipo di substrato del contenuto di umidità in ogni test. Assegnare in modo casuale l'ordine delle sezioni che contengono il substrato con il contenuto di umidità 6.</li>
		<li>Incollare 4-6 pezzi di foglie di tè fresco usando piccoli pezzi di nastro per coprire la superficie interna dei coperchi dei contenitori in polipropilene (Figura 1b).</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58126/58126fig1.jpg"> Figura 1: esempi di arene di analisi biologica per i test scelta. (un) impermeabile fogli di cloruro di polivinile (PVC) vengono utilizzati per dividere equamente i contenitori in polipropilene in 6 camere. Fogli di PVC sono fissati con colla a caldo, e tutte le crepe sono accuratamente sigillate. In questo esempio, terriccio sabbioso 2 con contenuto di umidità differenti (5%, 20%, 35%, 50%, 65% e 80% umidità) vengono utilizzati per riempire le camere negli ordini assegnati in modo casuale. (b) il tè fresco foglie vengono incollate sul lato interno delle palpebre dove il maturo Ectropis grisescens larve saranno rilasciate. (c) PVC fogli vengono utilizzati per dividere equamente i contenitori in polipropilene in 4 alloggiamenti, che sono pieni di 4 tipi di substrati (sabbia, sabbia terriccio 1, sabbia terriccio 2 e limo del terriccio) al 50% di umidità. Questa figura è stata modificata da Wang et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58126/58126fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<ol start="4"><li>
Impostazione di analisi biologica e registrazione dati
	<ol>
<li>Versione 30 mature ultimo-instar larve (ottenute al passaggio 1.1.3) sulle foglie di tè fresco incollate sul coperchio del contenitore in polipropilene. Capovolgere con cautela il coperchio e coprire ermeticamente il contenitore in polipropilene.</li>
		<li>Ripeti ogni prova 8x. Mantenere le arene di analisi biologica in un ambiente di camera ambientale presso un fotoperiodo di 14:10 (L:D) e 26 ° C.</li>
		<li>Il giorno 5, contare il numero di pupe sulla superficie del terreno in ogni camera. Inoltre, smantellare le analisi biologiche e contare il numero di pupe all'interno del substrato. Nota: Solo contare le pupe dal vivo su o all'interno del substrato. Verificare la fattibilità di pupe osservando movimenti addominali dopo aver toccato le pupe usando il forcipe.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Analisi dei dati
	<ol>
<li>Per ogni test, calcolare la percentuale di pupe trovato in ogni alloggiamento di ogni replica. Trasferire i dati di percentuale per il rapporto di log utilizzando il metodo fornito da Kucera e Malmgren21.</li>
		<li>Compara la percentuale delle pupe (dati trasformati) in ogni camera usando un'analisi unidirezionale della varianza (ANOVA). Impostare i livelli di significatività a α = 0.05 per ogni test.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. analisi biologiche substrato-scelta per determinare la preferenza di impupamento di E. grisescens
<ol><li>Ripetere il passaggio 1.1 ottenere mature ultimo-instar larve e passo 1.2 per preparare il substrato con contenuto di umidità diversi. Questa volta, sono necessari solo 20%, 50% e 80%-umidità del substrato.</li>
	<li>
Preparazione delle arene analisi biologica
	<ol>
<li>Simile al punto 1.3.1, ugualmente dividere i contenitori in polipropilene in 4 sezioni utilizzando teli in PVC. Difficoltà i fogli di PVC e sigillare le fessure con colla a caldo.</li>
		<li>Per ogni test, riempire le camere con i 4 tipi di substrati (sabbia, sabbia terriccio 1, sabbia terriccio 2 e limo del terriccio) che hanno lo stesso contenuto di umidità (20%, 50% o 80% umidità) con casualmente assegnato ordini (Figura 1C). Ripetere il passaggio 1.3.3 per preparare i coperchi.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ripetere il passaggio 1.4 per impostare analisi biologiche e registrare i dati e passo 1,5 per analizzare i dati.</li>
</ol>3. No-scelta le analisi biologiche per determinare il comportamento del suolo-burrowing e il successo di emersione di E. grisescens
<ol><li>Ripetere il passaggio 1.1 per ottenere le larve di ultimo-instar mature e passo 1.2 per preparare i 4 substrati (sabbia, sabbia terriccio 1, sabbia terriccio 2 e limo del terriccio) alle 3 contenuto di umidità (20%, 50% e 80% umidità).</li>
	<li>
Impostazione di analisi biologica
	<ol>
<li>Aggiungere il substrato in un contenitore di plastica (lato superiore: 11,5 cm di diametro; lato inferiore: 8,5 cm di diametro; altezza: 6,5 cm) ad una profondità di 3 cm. In totale, assicurarsi che non ci saranno 12 trattamenti (le combinazioni di 4 tipi di substrato e 3 contenuti di umidità). Ripetere ogni trattamento 7 x.</li>
		<li>Versione 15 mature ultimo-instar larve sul substrato di ogni arena di analisi biologica. Sigillare i contenitori ermeticamente coprendo i coperchi. Mantenere le analisi biologiche in un ambiente di camera ambientale presso un fotoperiodo di 14:10 (L:D) e 26 ° C. Nota: Non ci sarà alcun bisogno di incollare le foglie di tè fresco sui coperchi come accennato nelle analisi biologiche scelta.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Analisi e registrazione dei dati
	<ol>
<li>Il giorno 3, contare il numero di pupe e qualsiasi larve morte sulla superficie del substrato di ogni replica. Calcolare la percentuale di individui E. grisescens che scavava nel substrato come segue: <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/58126/58126eq2.jpg">
</li>
		<li>Registrare il numero di adulti emergenti ogni giorno fino a quando non più adulto è emerso per 15 d. calcolare il successo di emergere come segue: <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/58126/58126eq3v2.jpg">
</li>
		<li>Confrontare la percentuale di individui rintanati e il successo di emergere tra i trattamenti utilizzando One-way ANOVA. Impostare i livelli di significatività a α = 0.05.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Dimou, I., Koutsikopoulos, C., Economopoulos, A. P., Lykakis, J. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1046/j.1439-0418.2003.00686.x">Depth of pupation of the wild olive fruit fly, Bactrocera (Dacus) oleae (Gmel.) (Dipt., Tephritidae), as affected by soil abiotic factors.</a> Journal of Applied Entomology. 127 (1), 12-17 (2003).</li>
<li>Chen, M., Shelton, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+soil+type%2C+moisture%2C+and+depth+on+swede+midge+%28Diptera%3A+Cecidomyiidae%29+pupation+and+emergence%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Impact of soil type, moisture, and depth on swede midge (Diptera: Cecidomyiidae) pupation and emergence.</a> Environmental Entomology. 36 (6), 1349-1355 (2007).</li>
<li>Holmes, L. A., Vanlaerhoven, S. L., Tomberlin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrate+effects+on+pupation+and+adult+emergence+of+Hermetia+illucens+%28Diptera%3A+Stratiomyidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Substrate effects on pupation and adult emergence of Hermetia illucens (Diptera: Stratiomyidae).</a> Environmental Entomology. 42 (2), 370-374 (2013).</li>
<li>Renkema, J. M., Cutler, G. C., Lynch, D. H., MacKenzie, K., Walde, S. J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10340-011-0365-2">Mulch type and moisture level affect pupation depth of Rhagoletis mendax Curran (Diptera: Tephritidae) in the laboratory.</a> Journal of Pest Science. 84 (3), 281(2011).</li>
<li>Ellis, J. D. Jr, Hepburn, R., Luckman, B., Elzen, P. J. <a target="_blank" href="http://www.bioone.org/doi/abs/10.1603/0046-225X-33.4.794">Effects of soil type, moisture, and density on pupation success of Aethina tumida (Coleoptera: Nitidulidae).</a> Environmental Entomology. 33 (4), 794-798 (2004).</li>
<li>Pietrantuono, A. L., Enriquez, A. S., Fernández-Arhex, V., Bruzzone, O. A. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10905-015-9499-z">Substrates preference for pupation on sawfly Notofenusa surosa (Hymenoptera: Tenthredinidae).</a> Journal of Insect Behavior. 28 (3), 257-267 (2015).</li>
<li>Buitenhuis, R., Shipp, J. L. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/j.1439-0418.2007.01250.x">Influence of plant species and plant growth stage on Frankliniella occidentalis pupation behaviour in greenhouse ornamentals.</a> Journal of Applied Entomology. 132 (1), 86-88 (2008).</li>
<li>Zheng, X. L., Cong, X. P., Wang, X. P., Lei, C. L. <a target="_blank" href="http://www.bulletinofinsectology.org/pdfarticles/vol64-2011-209-214zheng.pdf">Pupation behaviour, depth, and site of Spodoptera exigua.</a> Bulletin of Insectology. 64 (2), 209-214 (2011).</li>
<li>Wen, Y., et al. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10905-016-9572-2">Effect of substrate type and moisture on pupation and emergence of Heortia vitessoides (Lepidoptera: Crambidae): choice and no-choice studies.</a> Journal of Insect Behavior. 29 (4), 473-489 (2016).</li>
<li>Wen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.bioone.org/doi/abs/10.18474/JES16-12PT.1">Soil moisture effects on pupation behavior, physiology, and morphology of Heortia vitessoides (Lepidoptera: Crambidae).</a> Journal of Entomological Science. 52 (3), 229-238 (2017).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pupation+behaviors+and+emergence+successes+of+Ectropis+grisescens+%28Lepidoptera%3A+Geometridae%29+in+response+to+different+substrate+types+and+moisture+contents%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Pupation behaviors and emergence successes of Ectropis grisescens (Lepidoptera: Geometridae) in response to different substrate types and moisture contents.</a> Environmental Entomology. 46 (6), 1365-1373 (2017).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1226861518300797">No-substrate and low-moisture conditions during pupating adversely affect Ectropis grisescens (Lepidoptera: Geometridae) adults.</a> Journal of Asia-Pacific Entomology. 21 (2), 657-662 (2018).</li>
<li>Ge, C. M., Yin, K. S., Tang, M. J., Xiao, Q. Biological characteristics of Ectropis grisescens Warren. Acta Agriculturae Zhejiangensis. 28 (3), 464-468 (2016).</li>
<li>Xi, Y., Yin, K. S., Tang, M. J., Xiao, Q. <a target="_blank" href="http://www.insect.org.cn/EN/abstract/abstract13974.shtml">Geographic populations of the tea geometrid, Ectropis obliqua (Lepidoptera: Geometridae) in Zhejiang, eastern China have differentiated into different species.</a> Acta Entomologica Sinica. 57, 1117-1122 (2014).</li>
<li>Zhang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detecting+deep+divergence+in+seventeen+populations+of+tea+geometrid+%28Ectropis+obliqua+Prout%29+in+China+by+COI+mtDNA+and+cross-breeding%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Detecting deep divergence in seventeen populations of tea geometrid (Ectropis obliqua Prout) in China by COI mtDNA and cross-breeding.</a> PloS One. 9 (6), e99373(2014).</li>
<li>Ma, T., et al. <a target="_blank" href="https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.jafc.6b00339">Analysis of tea geometrid (Ectropis grisescens) pheromone gland extracts using GC-EAD and GC× GC/TOFMS.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 64 (16), 3161-3166 (2016).</li>
<li>Zhang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymmetrical+reproductive+interference+between+two+sibling+species+of+tea+looper%3A+Ectropis+grisescens+and+Ectropis+obliqua%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Entomological+Research%22%5BJournal%5D)">Asymmetrical reproductive interference between two sibling species of tea looper: Ectropis grisescens and Ectropis obliqua.</a> Bulletin of Entomological Research. , (2016).</li>
<li>Luo, Z. X., Li, Z. Q., Cai, X. M., Bian, L., Chen, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+premating+isolation+between+two+sibling+moths%3A+Ectropis+grisescens+and+Ectropis+obliqua+%28Lepidoptera%3A+Geometridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Evidence of premating isolation between two sibling moths: Ectropis grisescens and Ectropis obliqua (Lepidoptera: Geometridae).</a> Journal of Economic Entomology. 110 (6), 2364-2370 (2017).</li>
<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemosensory+gene+families+in+Ectropis+grisescens+and+candidates+for+detection+of+Type-II+sex+pheromones%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chemosensory gene families in Ectropis grisescens and candidates for detection of Type-II sex pheromones.</a> Frontiers in Physiology. 8, article no: 953 (2017).</li>
<li>Chen, L. Q. Research on structure of soil particle by hydrometer method. Environmental Science Survey. 29 (4), 97-99 (2010).</li>
<li>Kucera, M., Malmgren, B. A. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/228645955_Logratio_transformation_of_compositional_data-a_resolution_of_the_constant_sum_constraint">Logratio transformation of compositional data: a resolution of the constant sum constraint.</a> Marine Micropaleontology. 34 (1-2), 117-120 (1998).</li>
<li>Hulthen, A. D., Clarke, A. R. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1111/j.1440-6055.2006.00518.x">The influence of soil type and moisture on pupal survival of Bactrocera tryoni (Froggatt) (Diptera: Tephritidae).</a> Australian Journal of Entomology. 45 (1), 16-19 (2006).</li>
<li>Alyokhin, A. V., Mille, C., Messing, R. H., Duan, J. J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1023/A:1007849629409">Selection of pupation habitats by oriental fruit fly larvae in the laboratory.</a> Journal of Insect Behavior. 14 (1), 57-67 (2001).</li>
<li>Torres-Muros, L., Hódar, J. A., Zamora, R. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/afe.12188">Effect of habitat type and soil moisture on pupal stage of a Mediterranean forest pest (Thaumetopoea pityocampa).</a> Agricultural and Forest Entomology. 19 (2), 130-138 (2017).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Preferenze di impupamento rispondendo alle variabili differenti del terreno sono state studiate in pochi parassiti6,9,22,23. Ad esempio, per studiare la preferenza delle larve mature di Bactrocera tryoni (Froggatt) (Diptera: Tephritidae) tra condizioni di umidità del terreno, Hulthen e Clarke22 set contenente 9 contenitori riempiti con un design del latino-Piazz...

Rispetto agli stadi larvali e adulti di insetti, stadio pupale è altamente vulnerabile a causa della limitata capacità mobile delle pupe, che non possono sfuggire rapidamente da situazioni pericolose. Pupating sotto la terra è una strategia comune utilizzata da diversi gruppi di insetti (ad es., negli ordini Diptera1,2,3,4,5di coleotteri, imenotteri6, Tisanotteri7e lepidotteri8,9,10,11,12) per proteggerli dai predatori fuoriterra e pericoli per l'ambiente. Molti di loro sono gravi agricolo e forestale parassiti1,2,3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12. Le larve mature di questi insetti del suolo-pupating solitamente lasciano loro padroni di casa, cadono a terra, vagano per trovare un sito idoneo, traforare il suolo e costruire una camera di pupal per pupating8,10.
Il looper di tè, Ectropis grisescens Warren (Lepidoptera: Geometridae), è uno dei più significativi defogliatore parassiti del tè pianta Camellia sinensis L.13. Anche se questa specie venne descritta nel 1894, è stato erroneamente identificato come Ectropis obliqua Prout (Lepidoptera: Geometridae) in passato decenni14,15. Le differenze nella morfologia, biologia e distribuzione geografica tra le due specie di pari livello sono stati descritti in alcuni recenti studi14,15,16. Per esempio, Zhang et al. 15 riferito che obliquo E. si è verificato principalmente ai confini di tre province (Anhui, Jiangsu e Zhejiang) della Cina, mentre E. grisescens ha una distribuzione molto più ampia rispetto ai obliquo E.. Pertanto, le perdite economiche causate da E. grisescens sono in gran parte trascurate, e la conoscenza di questo parassita deve essere ampiamente rivista e rinnovata16,17,18,19 . Nostri studi precedenti hanno mostrato che E. grisescens preferiscono pupate all'interno del terreno, ma potrebbe anche pupate quando il terreno non è disponibile (no-impupamento-substrato condizioni)11,12.
Questo documento fornisce una procedura dettagliata per (1) determinare la preferenza di impupamento di E. grisescens in risposta a fattori quali il tipo di substrato e umidità contenuti utilizzando analisi biologiche a scelta multipla e (2) determinare l'impatto dei fattori abiotici sui comportamenti di impupamento e successo di emersione di E. grisescens utilizzando analisi biologiche no-scelta. Tutte queste analisi biologiche sono condotte in condizioni di laboratorio ben controllato. Inoltre, queste analisi biologiche sono adattate per valutare l'influenza di altri fattori sui comportamenti impupamento e la sopravvivenza di diversi insetti del suolo-pupating.

<table><tbody><tr><td>Pallone triangolare</td><td>Bomex Chemical (Shanghai) Co., LTD</td><td>99</td><td>250 mL</td></tr><tr><td>Bacino in plastica</td><td>Chahua, Fuzhou, Cina</td><td>100</td><td>lato superiore: 51 cm di diametro; lato inferiore: 40 cm di diametro; altezza: 16 cm</td></tr><tr><td>Sacchetti con chiusura a zip</td><td>Glad, Guangzhou, Cina</td><td>126/133</td><td></td></tr><tr><td>Contenitori in polipropilene</td><td>Youyou Plastic Factory, Taian, Cina</td><td>139/155/160/161/190</td><td>lato superiore: 20,0 cm [L] & volte; 13,5 cm [L], lato inferiore: 17,0 cm [L] & volte; 10,0 cm [L], altezza: 6,5 cm</td></tr><tr><td>Foglio di cloruro di polivinia impermeabile</td><td>Yidimei, Shanghai, Cina</td><td>141</td><td></td></tr><tr><td>Nastro</td><td>V-tech, Guangzhou, Cina</td><td>VT-710</td><td></td></tr><tr><td>Essiccatore per forno</td><td>Kexi, Shanghai, Cina</td><td>KXH-202-3A</td><td></td></tr><tr><td>Camera ambientale</td><td>Life Apparatus, Ningbo, Cina</td><td>PSX-280H</td><td></td></tr></tbody></table>

scelta e analisi biologiche no-scelta per studiare l'impupamento preferenza e il successo di emersione di ectropis grisescens

Choice and No-Choice Bioassays to Study the Pupation Preference and Emergence Success of Ectropis grisescens

Molti insetti vivono sopra la terra come larve e adulti e come pupate sotto terra. Rispetto alle fasi sopra-terra dei loro cicli di vita, meno attenzione su influenza di fattori ambientali come questi insetti quando si impupano all'interno del suolo. Il looper di tè, Ectropis grisescens Warren (Lepidoptera: Geometridae), è una grave peste di piante da tè e ha causato le perdite economiche enormi in Cina del sud. I protocolli descritti qui proponiamo di indagare, attraverso analisi biologiche a scelta multipla, se maturo ultimo-instar E. grisescens larve possono discriminare variabili del suolo come il contenuto di tipo e l'umidità del substrato e determinare, attraverso no-scelta le analisi biologiche, l'impatto del contenuto substrato tipo e umidità sui comportamenti impupamento e il successo di emersione del E. grisescens. I risultati sarebbero migliorare la comprensione dell'ecologia impupamento di E. grisescens e possono portare intuizioni tattiche di gestione del suolo per la soppressione E. grisescens popolazioni. Inoltre, queste analisi biologiche possono essere modificate per studiare le influenze di vari fattori sui comportamenti impupamento e sopravvivenza dei parassiti del terreno-pupating.

Le analisi biologiche di umidità-scelta ha mostrato che significativamente più individui E. grisescens popolate su o entro il 5% e 35% umidità sabbia rispetto alla sabbia umidità del 80% (Figura 2a). Tuttavia, significativamente più individui preferiscono pupate su o all'interno del suolo (terriccio sabbioso 1 e 2 e del terriccio limo) che aveva un contenuto di umidità intermedia (figure 2b - 2d).
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Qui, presentiamo un protocollo per studiare la preferenza di impupamento delle larve mature di Ectropis grisescens in risposta a fattori di terreno (ad es., substrato tipo e contenuto di umidità) utilizzando analisi biologiche scelta. Presentiamo anche un protocollo di analisi biologiche no-scelta per determinare i fattori che influenzano i comportamenti di impupamento e sopravvivenza di E. grisescens.

Scelta e analisi biologiche No-scelta per studiare l'impupamento preferenza e il successo di emersione di Ectropis grisescens

Many insects live above the ground as larvae and adults and as pupate below the ground. Compared to the above-ground stages of their life cycles, less ...

Questo metodo può fornire importanti informazioni relative all'ecologia della pupa dei bruchi delle foglie di tè, Ectropis grisescens, come i loro comportamenti di pupa e la sopravvissuta alle pupe in risposta a diversi fattori ambientali. Il principale vantaggio di questa tecnica, ti consente di utilizzare un metodo semplice come misurare la preferenza di pupa e il successo di emergenza di Ectropis grisescens. Per iniziare, tagliare germogli freschi dalle piante da tè.Quindi riempire un pallone triangolare da 250 millilitri con acqua del rubinetto e posizionare i germogli nel pallone. Trasferire da tre a quattro contenitori in un bacino di plastica. Quindi, rilascia da 1.000 a 2.000 larve da una colonia di laboratorio di E.grisescens sulle foglie dei germogli di tè.Mantenere le larve in condizioni di laboratorio controllate. Ottieni le larve mature dell'ultimo instar che cadono dalle foglie dei germogli e vagano attivamente lungo il fondo del bacino. Sterilizzare il terreno e la sabbia in un essiccatore da forno di 80 gradi Celsius per tre giorni.Quindi asciugare sia il terreno che la sabbia a 50 gradi Celsius per diverse settimane. I campioni di substrato sono sufficientemente as

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Resistenza delle piante alla masticazione insetti erbivori possono essere testati in diversi modi. Qui, ci dimostrano come set-up una scelta e una non-scelta sperimentare con il modello vegetale Arabidopsis thaliana per identificare la resistenza contro il parassita specie Rapae di Pieris.

I dosaggi scelta e No-scelta per il test della resistenza di Arabidopsis thaliana per Insetti da masticare

Questo articolo descrive una tecnica per rimuovere il pupario di un insetto mantenendo intatta la pupa interna e quindi adatta per ulteriori indagini. Il protocollo di esempio mostra la procedura con Drosophila guttifera; tuttavia, questa tecnica è applicabile ad altre specie di Drosophila.

Rimozione del pupario degli insetti: un metodo per l'indagine sulle pupe

Le femmine di Drosophila scelgono tra i substrati e selezionano i siti che sono attraenti per la deposizione delle uova. Questo video descrive un test comportamentale che mette alla prova il loro processo decisionale, chiamato saggio delle preferenze di deposizione delle uova. La clip in primo piano mostra la procedura con una configurazione personalizzata, che consente ai ricercatori non solo di testare il comportamento di molte femmine allo stesso tempo, ma è anche compatibile con la...

drosofila Saggio sulle preferenze di deposizione delle uova: un metodo per testare il processo decisionale nelle mosche

C. elegans comportamento di deposizione delle uova può fornire informazioni importanti negli studi sullo sviluppo, la riproduzione e l'anatomia. Questo video introduce le fasi importanti di un test di deposizione delle uova e mostra un esperimento campione in cui un farmaco viene testato per la tossicità riproduttiva.

Saggio di deposizione delle uova: un metodo per quantificare il comportamento di deposizione delle uova di C. elegans

Una verticale, T-labirinto olfattometro è descritto per saggiare la risposta comportamentale degli artropodi. Il olfattometro permette allo sperimentatore di misurare le scelte effettuate da soggetti di prova quando è sottoposto a due campi odore potenziali. Sia attrazione e repulsione per da odoranti può essere misurata con questo dispositivo.

Verticale T-maze test di scelta per risposta artropodi di odori

Questo protocollo descrive un test ad alto rendimento per testare le preferenze di deposizione delle uova di Drosophila melanogaster alla risoluzione di un singolo animale.  Questo test fornisce una piattaforma semplice, efficiente e scalabile per identificare i geni e i componenti dei circuiti che controllano un semplice processo decisionale.

High Throughput test per esaminare Preferenze deposizione delle uova dei singoli<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Trappole efficaci per attirare e catturare il trivellatore di cenere verde smeraldo (EAB) sono un elemento chiave della rilevazione e la gestione di questo parassita invasivo. Trappole a due piani, posizionate in pieno sole nei pressi di frassini, incorporano spunti visivi ed olfattivi ed erano più probabili catturare EAB rispetto agli altri modelli di trappola nelle prove sul campo.

Edificio a due piani trappole per individuazione tempestiva di smeraldo cenere Borer

Qui, presentiamo protocolli per 1) la propagazione in cattività di laboratorio della farfalla blu di Miami in pericolo federale (Cyclargus thomasi bethunebakeri),e 2) valutando le informazioni di base sulla storia della vita come il tempo di sviluppo immaturo e il numero di stadi larvali. Entrambi i metodi possono essere adattati per l'uso con altri programmi di conservazione ex situ.

Programmi di propagazione captive farfalla a rischio per migliorare la conoscenza della storia della vita e le tecniche efficaci di conservazione ex Situ

Qui è presentato un protocollo di microiniezione embrionale Helicoverpa armigera (Hübner) e identificazione di mutanti knockout creati dall'editing del genoma CRISPR / Cas9. Gli insetti mutanti consentono ulteriori ricerche sulla funzione genica e sull'interazione tra diversi geni in vivo.

Microiniezione embrionale e identificazione di mutanti knockout di Helicoverpa Armigera (Hübner) modificata dal genoma CRISPR/Cas9

In questo articolo, vengono descritti in dettaglio due protocolli per valutare la fonte di cibo e le preferenze di ovideposizione nelle larve e nelle femmine di mosconi. Questi comprendono quattro scelte con due fattori interagenti: il tipo di substrato e la temperatura. I saggi consentono di determinare la preferenza per la fonte di cibo delle larve e la preferenza per il sito di ovideposizione per le femmine.

Esplorare le scelte della storia di vita: utilizzare la temperatura e il tipo di substrato come fattori interagenti per le preferenze larvali e femminili del moscone

Sono descritte le procedure per studiare i comportamenti di sondaggio e ingestione delle zanzare Culex tarsalis sulle mani umane utilizzando l'elettropenetragrafia AC-DC.

Elettropenetragrafia AC-DC per lo studio dei comportamenti di sondaggio e ingestione delle zanzare Culex tarsalis sulle mani umane

Scopri i bioassaggi con e senza scelta per studiare le preferenze di impupamento di Ectropis grisescens. Questo metodo analizza l'impatto di umidità e substrato sul successo di emersione, fornendo dati utili per strategie di gestione integrata dei fitofagi del tè.

Scelta e analisi biologiche No-scelta per studiare l'impupamento preferenza e il successo di emersione di Ectropis grisescens

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