30 novembre 2018
Qui, descriviamo la costruzione e l'uso di una galleria del vento per odore mediata saggi comportamentali con gli insetti. Il design di Galleria del vento facilita il rilascio di fonti di odore di diversi metodi, con e senza stimoli visivi. Esperimenti in galleria del vento sono importanti metodi per identificare le sostanze chimiche volatili comportamentale attive.
Questo metodo può rispondere a domande chiave nel campo dell'ecologia chimica, come identificare componenti comportamentalmente attivi. I principali vantaggi di questa tecnica è che possiamo rilasciare odori con molti mezzi diversi e possiamo monitorare l'intero repertorio comportamentale dell'insetto. Preparare i tubi di vetro con garza, utilizzando un elastico.
Separare 10 insetti nei tubi di vetro preparati e coprire l'estremità rimanente con tappi a scatto in plastica. Consentire agli insetti di acclimatarsi alla temperatura, alle condizioni di luce e all'umidità della sala della galleria del vento per almeno due ore. Qui viene dimostrato che il protocollo dello spruzzatore prepara le fonti di odore.
Riempire la siringa a tenuta di un millilitro con un mix di odori sintetici e inserire la siringa nella pompa della siringa. Collegare la punta della siringa al tubo di propilene di etilene fluorurato utilizzando adattatori per tubi. Ora, avvia la pompa della siringa, seguita dal generatore ad ultrasuoni a banda larga.
Il rilascio dell'aerosol dallo spruzzatore può essere confermato punto per punto una luce dal basso del punto di rilascio. Posizionare il tubo di vetro con gli insetti su un supporto a 180 centimetri sottovento dalla fonte visiva dell'odore e a 30 centimetri da terra. L'estremità limitata dovrebbe puntare verso l'alto.
Per avviare il protocollo, aprire il limite e avviare il timer. Osserva il modello di volo e presta particolare attenzione alle caratteristiche del volo e all'orientamento al vento. Mostrato qui, è un volo orientato senza atterraggio.
Il volo orientato con atterraggio è mostrato qui, su una fonte di odore naturale, che è inclusa come controllo. Un primo piano di decollo può essere visto qui, così come un primo piano di un atterraggio su una fonte di odore naturale. Ottieni il punteggio delle prestazioni di volo in base a categorie di comportamento predefinite, come il decollo, il volo orientato su una breve distanza, il volo orientato su una distanza più lunga e l'atterraggio.
Raccogli gli insetti che atterrano sulle pareti della galleria del vento, fuori dal pennacchio dell'odore, e sostituiscili di nuovo sul supporto. Utilizzare una siringa separata, dedicata all'etanolo puro, per tutte le pulizie. Eseguire lo spruzzatore con 96%etanolo per un minimo di 10 minuti tra i trattamenti, per pulire l'interno dei tubi e dell'ugello.
Pulire le siringhe e la punta dell'ugello con il 96% di etanolo, dopo l'uso. Al termine, lavare tutto l'hardware in metallo e vetro con etanolo e acqua e lasciare asciugare. Riscaldare tutto l'hardware in metallo e vetro a 300 gradi Celsius per sei ore, per rimuovere eventuali contaminanti.
Qui vengono mostrate le risposte degli odori guidate visivamente delle mosche del colpo. Sono stati studiati i dettagli del comportamento di volo con e senza stimoli visivi. C'è stato un effetto significativo del segnale visivo sulla risposta all'atterraggio, ma non sugli altri passaggi comportamentali.
Qui viene presentato un confronto delle risposte di atterraggio delle falene di piselli alle piante di pisello e delle corrispondenti collezioni volatili. Atterraggi simili sono stati registrati verso entrambi i tipi di segnali. Una miscela sintetica di volatili dei fiori di pisello ha comportato sbarchi leggermente inferiori, rispetto ai volatili naturali dei fiori.
Qui viene mostrato l'effetto degli sfondi volatili vegetali sulla risposta della falena della frutta di mele alle miscele sintetiche. I distributori di odori con una miscela complessa e una semplice miscela hanno portato a un'attrazione di vento simile, con uno sfondo pulito. Tuttavia, quando sono incorporate in uno sfondo volatile della mela, le tarme preferivano la miscela complessa.
Quando si tenta questa procedura, è importante ricordare che il modello di volo non è uniforme. Varia molto tra gli ordini di insetti. Le mosche del colpo sono forti volantini e hanno movimenti di lancio più ampi, rispetto alle falene.
La galleria del vento facilita numerosi metodi per rilasciare odori nella galleria del vento, a seconda della domanda in questione. Possiamo rilasciare dai distributori di odori, da fonti autentiche, miscele sintetiche e collezioni headspace. Inoltre, un odore specifico può essere rilasciato sopra un odore di sfondo, possiamo usare diversi stimoli visivi e possiamo eseguire biosagia a due scelte.
Gli esperimenti in galleria del vento sono strumenti importanti per identificare composti e sostanze chimiche comportamentalmente attivi, sia nella ricerca applicata che nella ricerca di base. Un buon esempio è se vuoi sviluppare strumenti per il controllo dei parassiti.
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In questo articolo viene descritta la costruzione e l'uso di una galleria del vento per saggi comportamentali mediati da odore con insetti. Il design permette il rilascio di fonti odorose attraverso diversi metodi, facilitando esperimenti importanti in ecologia chimica.
I saggi comportamentali mediati da odori basati su galleria del vento forniscono una piattaforma controllata e quantitativa per analizzare i comportamenti olfattivi negli insetti, fornendo informazioni dirette per la validazione precoce di bersagli nella ricerca e sviluppo di metodi di controllo dei parassiti. Questo approccio consente una misurazione precisa delle risposte comportamentali ai composti volatili candidati, supportando una previsione affidabile nell'identificazione di attrattivi o repellenti. Il metodo collega la scoperta in laboratorio all'applicazione traslazionale, facilitando lo sviluppo mirato e proporzionato ai rischi di nuovi strumenti di ecologia chimica.
Questo saggio in galleria del vento si colloca all'interno del percorso dalla scoperta alla fase preclinica, consentendo la verifica precoce di ipotesi, l'identificazione di composti promettenti e la validazione traslazionale di composti modificatori del comportamento degli insetti.