Valutazione non invasiva della funzione Dorsiflexor muscolare nei topi

Questo modello può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della funzione di contrazione muscolare. Come il meccanismo di produzione della forza, durante la progressione della malattia. Il principale vantaggio di questa tecnica è che questa procedura è non invasiva, che può essere eseguita sullo stesso animale in diversi punti di tempo, per monitorare la progressione e il trattamento della malattia.

La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale, in quanto l'alterazione di uno di questi passaggi può portare ad aumentare la variabilità nei risultati. Pertanto, la pratica può consentire di ottenere risultati più coerenti. Per iniziare questa procedura, impostare il morsetto del ginocchio del mouse sulla piattaforma e la pedpiatta del mouse sul trasduttore.

Quindi accendi la piattaforma di riscaldamento a 37 gradi Celsius. Aprire il software di controllo muscolare dinamico sul desktop. Nell'elenco a discesa setup selezionare lo stelo istantaneo e modificare i parametri del tempo di esecuzione in 120 secondi.

Nella finestra con l'etichetta salva automaticamente la base, immettete il nome del percorso del file di salvataggio automatico. Fare clic sulla casella di controllo a sinistra della finestra di base di salvataggio automatico e modificarla per abilitare il salvataggio automatico. Nella parte superiore della schermata di controllo DMC fare clic su sequencer, che aprirà una nuova finestra popup.

Selezionare la sequenza aperta e selezionare il protocollo da utilizzare. Quindi fare clic su sequenza di caricamento e chiudere la finestra. Per preparare l'animale per l'esperimento, rimuovere i capelli sulla gamba destra del mouse con tosaerba elettriche.

Posizionare l'animale in posizione supina sulla piattaforma riscaldata e pulire la gamba destra con il 70% di alcol e iodio. A questo punto, regolare l'Isoflurane al 2% con flusso di ossigeno a un litro al minuto. Posizionare il piede sulla pedva e fissarlo utilizzando del nastro medico.

Quindi applicare il gel conduttivo sulla pelle in cui verranno posizionati gli elettrodi. Quindi, bloccare il ginocchio per stabilizzare la gamba durante la procedura. Utilizzare le manopole sulla piattaforma per posizionare l'arto posteriore per formare un angolo di 90 gradi alla caviglia.

Una volta fissato il mouse sulla piattaforma, posizionare gli elettrodi sotto la pelle della gamba destra, uno vicino alla testa della fibula e l'altro elettrodo più distally sul lato laterale della gamba. Gli elettrodi sono posizionati con attenzione al fine di ottenere una stimolazione sufficiente del nervo peroneale. Anche questa posizione può essere regolata per raggiungere un picco stabile, visualizzato sullo schermo.

Una volta raggiunti questi passaggi, regolare lo stimolatore bifase ad alta potenza per ottenere una stimolazione del nervo peroneale che si traduce nella massima coppia di dorsiflessione. Durante la stimolazione, ruotare il trasduttore in senso orario per produrre valori negativi, che sono importanti per garantire che gli elettrodi stimolino solo i muscoli flessori dorsi dal nervo peroneale. Una volta raggiunto questo passaggio, stabilizzare gli elettrodi utilizzando un morsetto, al fine di prevenire qualsiasi movimento durante la procedura.

Raggiungere il picco negativo lentamente e gradualmente è importante per verificare che gli elettrodi siano posizionati nella posizione corretta e che la tensione sia sufficiente per ottenere la massima forza. Successivamente, arrestare lo stelo istantaneo sul software. Nella schermata principale, attivare la sequenza iniziale etichettata del pulsante"per avviare la sequenza di configurazione precedente.

Una volta terminate le misurazioni della forza, rimuovere gli elettrodi, rimuovere il nastro del piede e rilasciare il morsetto del ginocchio. Spegnere l'Isoflurane e mantenere l'erogazione di ossigeno per alcuni minuti per aiutare il recupero dell'animale. Una volta che il topo inizia a muoversi e riprende conoscenza, restituiscilo alla gabbia.

Questo grafico mostra i dati rappresentativi della curva di frequenza della forza da un mouse nel tempo, dove la procedura è stata ripetuta una volta alla settimana fino al completamento di cinque punti di tempo. Queste osservazioni hanno mostrato valori di produzione di forza coerenti per tutti i punti di tempo. Questa procedura ha anche dimostrato di essere coerente tra diversi topi, come indicato nell'area rappresentativa, sotto la curva della stimolazione FFC, oltre cinque diverse osservazioni in sei topi testati una volta alla settimana.

Dopo il suo sviluppo, questa tecnica consente ai ricercatori nel campo delle malattie neuromuscolari di indagare i cambiamenti temporali nella funzione muscolare nei modelli speculari della malattia.