Name: Stenosi di sinistra atriale indotta arterializzazione venosa polmonare e lipertensione polmonare gruppo 2 nel ratto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Scopri la tecnica chirurgica di stenosi atriale sinistra nel ratto per studiare l'ipertensione polmonare di gruppo 2. Questo modello induce l'arterializzazione venosa polmonare e aiuta a comprendere i meccanismi fisiopatologici.

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Gli autori riconoscono la Mitacs-Japan Society per il programma estivo di promozione della scienza (JSPS). Ping Yu Xiong è stato sostenuto da finanziamenti dal programma estate Mitacs-JSP per visitare il Jikei University School of Medicine. Dr. Minamisawa è in parte sostenuto da Ministero della pubblica istruzione, cultura, sport, scienza e tecnologia del Giappone (S.M.), il programma di MEXT-Supported per la Fondazione di ricerca strategica alle università Private (S.M.), il veicolo da corsa commemorativa Fondazione (S.M.) e The Jikei University Graduate Research Fund (S.M.) con il supporto finanziario per questo progetto. Dr. Archer è supportato in parte dalla US National Institutes of Health (NIH) sovvenzioni NIH 1R01HL113003-01A1 (s.l.a.) e NIH 2R01HL071115-08 (s.l.a.), la Fondazione canadese per l'innovazione, il Tier 1 Canada Research Chair in dinamica mitocondriale e traduzione Medicina (s.l.a.), la Fondazione di William J. Henderson, la rete vascolare Canada e Unit Cardiopulmonary della Regina (QCPU).
Gli autori riconoscono Mr. Tadashi Kokubo, capo dei servizi fotografici del centro informativo accademico presso il Jikei University School of Medicine, per le riprese video.

Il protocollo sperimentale di LAS è stato approvato dal comitato etico (protocollo #2015-118) e ricerca universitaria e il Jikei University School di medicina animale cura Comitato.
1. preparazione pre-operatoria
<ol><li>Dopo il suo arrivo presso la struttura animale, fornire 5-settimana-vecchio maschio topi Sprague Dawley tra 150-200 g con 1 settimana di acclimatare alla loro nuova casa prima dell'operazione.</li>
	<li>Preparare la seguente attrezzatura prima dell'intervento di sterilizzazione in autoclave: 1) un piccolo animale respiratore, 2) una macchina dell'anestetico, 3) un kit di intubazione (composto da una coppia di pinze pinza emostatica, un abbassalingua e un angiocatheter 18 G), 4) ferri chirurgici (che sono un paio di pinzetta, un paio di pinze dritte, un porta-ago, un riavvolgitore di petto, un paio di forbici, una sutura monofilamento 5-0, un applicatore clip, clip di medie-grandi dimensioni e un tubo della cassa 23 G).</li>
	<li>Sono sterile Q-tips e garza pronto a trattare con sanguinamento.</li>
	<li>Utilizzare un rilievo di riscaldamento per mantenere la temperatura del corpo animale intorno ai 37 ° C durante la chirurgia.</li>
</ol>2. l'anestesia e l'intubazione endotracheale
<ol><li>Anestetizzare il ratto in una camera di induzione con isoflurano 5% mescolato con l'aria ambiente di 2 L/min.</li>
	<li>Prima dell'intubazione, radersi i peli del torace del ratto con un rasoio capelli e applicare la crema depilatoria per rimuovere i capelli fini.</li>
	<li>Controllare il riflesso pedale per confermare il successo anestesia prima dell'intubazione.</li>
	<li>Agganciare i denti anteriori con una stringa e fi ssare la cordicella con due perni.</li>
	<li>Aprire la bocca del ratto con la pinza emostatica e inserire l'abbassalingua in bocca.</li>
	<li>Sollevare il divaricatore di linguetta per visualizzare le corde vocali. Nota: È utile a brillare una luce forte sulla regione della testa del ratto per consentire di visualizzare le corde vocali.</li>
	<li>Inserire il angiocatheter 18 G come un tubo endotracheale nella trachea e poi rapidamente, collegare il catetere al respiratore.</li>
	<li>Impostare il volume corrente a 10 µ l per grammo con una frequenza respiratoria di 100 respiri/minuto.</li>
	<li>Mantenere l'anestesia con isoflurano 2% mescolato con l'aria ambiente di 2 L/min.</li>
</ol>3. preparazione del sito chirurgico
<ol><li>Preparare il sito chirurgico con alternanza di scrub di clorexidina e alcool x3.</li>
	<li>Dare la buprenorfina 0,01 mg/kg per via sottocutanea.</li>
	<li>Coprire il topo con un telo sterile.</li>
	<li>Controllare il riflesso pedale per confermare un'intubazione riuscita e il mantenimento dell'anestesia.</li>
</ol>4. chirurgia stenosi atriale sinistra
<ol><li>Marchio dell'incisione di 2 cm di sotto ascella sinistra del ratto con una regola.</li>
	<li>Fare un 2 cm cassa laterale parete incisione a sinistra con un paio di forbici.</li>
	<li>Separare i muscoli intercostali tra la quarta e la quinta costola, utilizzando il dritto e il forcipe curvo, fino ad entrare la cavità toracica.</li>
	<li>Inserire il divaricatore toracico nella cavità toracica. Continuare a utilizzare le pinze diritte e curve per separare il muscolo intercostale per ottenere una visualizzazione diretta del timo e del cuore.</li>
	<li>Sollevare il timo con un paio di pinze dritte. Rimuovere il timo che copre il cuore con un paio di forbici. Evitare di tagliare o frugando in vasi sanguigni principali.</li>
	<li>Passare accuratamente una sutura monofilamento 5-0 attraverso la superficie del ventricolo sinistro, proprio sotto l'auricola sinistra. Evitare di passare l'ago attraverso le arterie coronarie principali.</li>
	<li>Dopo la sutura è a posto e non c'è Nessun sanguinamento significativo, un nodo sciolto.</li>
	<li>Tirare il filo di sutura e avanti per sollevare il cuore fuori dal petto.</li>
	<li>Una volta che il cuore è alzato fuori dal petto, applicare rapidamente un clip di medio-grandi per l'atrio sinistro, appena sopra la valvola mitrale. Nota: La clip è chiuso, con la punta della clip pizzicare l'atrio di sinistra, causando stenosi atriale sinistra a metà strada.</li>
	<li>Rimettere rapidamente il cuore nel petto. Garantire il cuore non è di fuori del petto per più di 30 s.</li>
	<li>Rimuovere la sutura di soggiorno usata per sollevare il cuore.</li>
	<li>Chiudere il petto con una sutura monofilamento 5-0, utilizzando un semplice modello di interrotto.</li>
	<li>Inserire un tubo della cassa 23 G collegato ad una siringa da 10 mL nel petto e quindi procedere con la chiusura del muscolo della parete di cassa e la pelle con i suturare interrotti semplice.</li>
	<li>Tirare fuori qualsiasi aria, sangue e versamento pleurico tramite il tubo toracico inserito, utilizzando la siringa cc 10 collegata e quindi, tirare il tubo.</li>
	<li>Chiudere lo strato della pelle con una sutura monofilamento 5-0, utilizzando un semplice modello di interrotto.</li>
	<li>Dare la buprenorfina 0,01 mg/kg per via sottocutanea.</li>
	<li>Spegnere l'isoflurano.</li>
	<li>Staccare il respiratore dopo la respirazione spontanea è osservata.</li>
	<li>Mantenere il ratto intubato e consentirle di recuperare il rilievo di riscaldamento fino a quando si sveglia.</li>
	<li>In modo sicuro Estubare il ratto dopo uno o più dei seguenti segni è/sono osservati: il topo inizia a muoversi suoi quattro arti, si riacquista il suo riflesso di raddrizzamento, si riacquista il suo riflesso del vomito o Visualizza minzione spontanea.</li>
</ol>5. post-operatorio
<ol><li>Ogni 8-12 h, dare buprenorfina 0,01 mg/kg per via sottocutanea. Carprofen 5 mg/kg viene somministrato per via sottocutanea su base giornaliera per 2 giorni e, quindi, se necessario, se il topo non si muove intorno bene e si presenta come è nel dolore.</li>
	<li>Dare 5 mL di soluzione salina normale per via sottocutanea subito dopo l'intervento chirurgico, come il ratto può avere difficoltà a bere l'acqua di rubinetto, immediatamente postoperatorio.</li>
</ol>6. conferma del successo della stenosi atriale sinistra con ecocardiografia
<ol><li>Eseguire un ecocardiogramma transtoracico 2 settimane dopo l'intervento chirurgico per determinare la velocità di afflusso di LV.</li>
	<li>Anestetizzare il ratto seguendo le istruzioni riportate nella sezione 1.</li>
	<li>Dopo l'induzione dell'anestesia, mantenere l'anestesia utilizzando un cono di naso con 2% isoflurane mescolato con aria della stanza di 2 L/min.</li>
	<li>Parete toracica del ratto di radersi con un rasoio capelli e utilizzare la crema depilatoria per rimuovere qualsiasi capelli rimanenti.</li>
	<li>Posizionare la sonda ad ultrasuoni all'apice del cuore, che si trova dietro il quinto spazio intercostale sul lato sinistro del petto. Spostare la sonda in questa regione fino ad ottenuta una buona vista del quattro-alloggiamento.</li>
	<li>Misurare la velocità di afflusso di LV utilizzando la modalità Doppler pulsato-onda appena sopra l'anulus della valvola mitrale.</li>
	<li>Una velocità di afflusso di LV superiore a 2.0 m/s è necessaria per lo sviluppo di ipertensione polmonare moderata alla chirurgia post-LAS 8-10 settimane.</li>
</ol>7. operazione finta
<ol><li>Fatta eccezione per l'applicazione della clip (passo 4.9), eseguire tutti i passaggi precedenti per creare i ratti di controllo di pari età, sham-operated (SOC).</li>
</ol>

<ol><li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li>
<li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li>
<li>Moreira, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Pulmonary+Hypertension+in+the+General+Population%3A+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).</li>
<li>Wijeratne, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+Incidence+and+Prevalence+of+World+Health+Organization+Groups+1+to+4+Pulmonary+Hypertension%3A+A+Population-Based+Cohort+Study+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Quality+and+Outcomes%22%5BJournal%5D)">Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada.</a> Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).</li>
<li>Briongos Figuero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+persistent+pulmonary+hypertension+after+mitral+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement.</a> Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).</li>
<li>Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Society%22%5BJournal%5D)">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li>
<li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li>
<li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+arising+from+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).</li>
<li>Alsoufi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Not+a+Cinderella+story%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Not a Cinderella story.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).</li>
<li>Kato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vein+stenosis+and+the+pathophysiology+of+%26%2334%3Bupstream%26%2334%3B+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of &#34;upstream&#34; pulmonary veins.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Il ratto di LAS è un modello di PH romanzo gruppo 2 che ha già ricevuto interesse sostanziale da ricercatori nel campo12,13. Confrontando i due modelli esistenti di gruppo 2, vale a dire la vena polmonare stenosi (PVS) modello14, con suinetti e la supracoronary aortica Bordatrici (SAB) ratto modello8,9,10, modello del ratto di LAS ha diversi vanta...

Lo scopo di questo articolo è di dimostrare la procedura dettagliata di come eseguire l'intervento di LAS in ratti. Chirurgicamente indotta LAS imita molto attentamente il MS e cor triatriatum del cuore negli esseri umani, che comportano la creazione di un'ostruzione meccanica nell' atrio di sinistra1. Ostruzione del afflusso (LV) ventricolare sinistra spesso provoca una congestione del circolo venoso polmonare, e i pazienti sviluppano gradualmente PH. L'organizzazione mondiale della Sanità classifica il PH a causa di malattie del cuore sinistro come gruppo 2, che è il gruppo più prevalente di PH2,3,4. La diagnosi di PH in pazienti con malattie di cuore sinistro è associata a un maggiore rispetto a un aumento di sette volte in mortalità standardizzato 1 anno4. Attualmente, non esiste alcuna terapia approvata per il gruppo 2 PH oltre a trattare il sottostante lasciato malattie cardiache (ad es., sostituire chirurgicamente la valvola mitrale stenotica). Rimontaggio della valvola mitrale anche efficace non risolve tuttavia, PH completamente a fino a metà dei pazienti con MS5. Questo PH persistente è a causa di avverse rimodellamento vascolare polmonare, che è capita male. Quindi, modelli animali sono importanti per migliorare la nostra comprensione dei meccanismi molecolari del rimodellamento vascolare polmonare negativi nel gruppo 2 PH.
Ci sono alcuni modelli animali di legatura dell'arteria coronaria pH. gruppo 26,7 e trasversale aortica Bordatrici8,9,10 nei roditori sono i più comunemente usati modelli animali di gruppo 2 PH. Lo svantaggio principale di questi modelli è il coinvolgimento di LV, che rende difficile interpretare il risultato di studi di gruppo 2 PH. Al contrario, il LV rimane intatto nel modello LAS. Inoltre, il modello di LAS è clinicamente rilevante perché comporta lo sviluppo lento e progressivo di PH nel corso di un periodo di 10 settimane11. In esseri umani, MS è considerata significativa se la velocità di flusso di Doppler transmitral è maggiore di 2.0 m/s11, e utilizziamo anche questo numero come un cut-off per determinare se l'ambulatorio di LAS ha prodotto stenosi significativa. Inoltre, anche se il modello di LAS genera PH lieve o moderata, dimostra cambiamenti istologici caratteristici, simili a quelli in pazienti umani, vale a dire lo sviluppo di arterializzazione venoso intrapolmonare11. Modello del ratto di LAS è un romanzo e modello PH clinicamente rilevanti gruppo 2 con funzione di LV conservata. È adatto per studiare la patofisiologia di rimodellamento vascolare polmonare persistente, identificazione di bersagli molecolari e test di nuove terapie per il gruppo 2 PH.

<table><tbody><tr><td>5-0 Sutura al prolene</td><td>Johnson & Johnson - Sutura in polipropilene Ethicon</td><td>8725H</td><td>con tecnologia HEMO-SEAL</td></tr><tr><td>Macchina per anestesia</td><td>Wakenyaku Co., Ltd.</td><td>BRTK-100A</td><td>Pompa ad aria e macchina per anestesia</td></tr><tr><td>Filo guida per attestato Filo</td> guida <td>autocostruito</td><td></td> da <td>10 cm incollato a una siringa da 1 cc&nbsp;</td></tr><tr><td>Divaricatore toracico</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>F-2</td><td></td></tr><tr><td>Tubo toracico 23G</td> Siringa da 10 cc <td>autocostruita</td><td></td><td>collegata a un ago da 23G più tubo di plastica</td></tr><tr><td>Pinze curve</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-14</td><td></td></tr><tr><td>Termoforo</td><td>Vivaria</td><td>MP-916-NV</td><td>Mantieni la temperatura corporea a 37 gradi Celsius</td></tr><tr><td>Clip per legatura dell'orizzonte</td><td>Teleflex</td><td>REF 003200</td><td>Taglia Medio-grande</td></tr><tr><td>Horizon Applicazione di clip per legatura a carico manuale dell'orizzonte per dimensioni medio-grandi</td> Clip per legatura dell'orizzonte <td>Teleflex</td><td>REF 337085</td><td>mascella angolata, (20 cm)</td></tr><tr><td>Porta ago</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>MC-40</td><td></td></tr><tr><td>Respiratore per roditori</td><td>CWE Inc</td><td>SAR-830/P</td><td>Forbici per ventilatori per piccoli animali</td></tr><tr><td></td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>B-12</td><td>Forbici dritte idealmente con punte rotonde</td></tr><tr><td>Pinze dritte</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-7</td><td></td></tr><tr><td>Abbassalingua</td><td>Uchida Yoko Co., Ltd.</td><td>8-615-2417</td><td>Utilizzare l'estremità larga</td></tr></tbody></table>

stenosi di sinistra atriale indotta arterializzazione venosa polmonare e l'ipertensione polmonare gruppo 2 nel ratto

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Il meccanismo di arterializzazione venosa polmonare indotta da stenosi mitrale e gruppo 2 l'ipertensione polmonare (PH) è poco chiaro. Non c'è nessun modello del roditore del gruppo 2 PH, a causa di stenosi mitrale (MS), per facilitare l'indagine sui meccanismi della malattia e potenziali strategie terapeutiche. Vi presentiamo un modello di romanzo del ratto di polmonare arterializzazione venosa venosa polmonare indotta da congestione e gruppo 2 PH causata da stenosi atriale sinistra (LAS). LAS è raggiunto dalla costrizione dell'atrio sinistro utilizzando una clip di titanio chiusa a metà. Dopo l'intervento di LAS, un ratto modello con una velocità di flusso transmitral maggiore di o uguale a 2,0 m/s su ecocardiografia sviluppa gradualmente arterializzazione venosa polmonare e gruppo 2 PH su un periodo di 8 - 10 settimane. In questo protocollo, forniamo la procedura dettagliata di come eseguire l'intervento di LAS. Il modello di ratto LAS presentato imita MS in esseri umani ed è utile per studiare il meccanismo molecolare di arterializzazione venosa polmonare e per la valutazione preclinica di terapie per il gruppo 2 PH.

L'efficacia del LAS è confermata mediante ecocardiografia, 2 settimane postoperatorie. Ratti con una velocità di afflusso di LV superiore a 2.0 m/s, misurata con una vista del quattro-alloggiamento, sono considerati hanno sviluppato la stenosi significativa (Figura 1) e sviluppare in modo affidabile PH moderato e arterializzazione venosa polmonare 8-10 settimane post-LAS chirurgia.
Chirurgia post-LA...

Stenosi atriale sinistra (LAS) è una tecnica chirurgica utilizzata per studiare i meccanismi sottostanti arterializzazione venosa polmonare e ipertensione polmonare (PH) di gruppo 2. Qui, presentiamo un protocollo per costringere l'atrio sinistro utilizzando una clip di titanio per causare arterializzazione venosa polmonare e moderare il PH in un ratto.

Stenosi di sinistra atriale indotta arterializzazione venosa polmonare e l'ipertensione polmonare gruppo 2 nel ratto

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Grazie per aver guardato i nostri video. Sono Susumu Minamisawa della Jikei University School of Medicine Tokyo, Giappone. La nostra opportunità sull'ipertensione polmonare animale dovuta a malattie cardiache del ratto che è classificata come ipertensione polmonare del secondo gruppo.L'Organizzazione Mondiale della Sanità classifica l'ipertensione polmonare in cinque gruppi. Il ratto stenosi atriale sinistra è un modello animale gruppo due ipertensione polmonare che è la forma più diffusa di ipertensione polmonare e attualmente non ci sono terapie approvate per questo gruppo di ipertensione polmonare. In questi video stiamo dimostrando la procedura passo dopo passo su come eseguire la chirurgia della stenosi atriale sinistra nel ratto.La stenosi atriale destra creata chirurgicamente imita la stenosi mitralica nell'uomo. Quando lo usiamo per studiare la possibilità e sotto il gruppo due ipertensione polmonare. Iniziamo.Preparare le seguenti attrezzature prima dell'intervento chirurgico, un piccolo respiratore animale e una macchina anestetica. Un kit di incubazione compone un paio di forcep emostat, un depressore della lingua e un angio-catetere calibro 18. Gli strumenti chirurgici includono un paio di pini curvi, un paio di pini dritti, un driver dell'ago, un retrattore toracico, un paio di forbici, una sutura monofilamento 5-0, un applicatore a clip, una clip di medie dimensioni e un tubo toracico calibro 23.Anestetizza il topo in una camera di induzione con isoflurane al cinque per cento mescolato con due metri al minuto di aria ambiente. Prima dell'intubazione radere i peli del petto. Applicare la crema per la depilazione per rimuovere i capelli fini non rimossi dal rasoio.Agganciare i denti anteriori con una corda e fissare le corde ai perni. Dopo che la corda è stata fissata aprire la bocca con le forceps emostat e inserire il depressore della lingua in bocca. Sollevare il depressore della lingua per visualizzare la corda vocale.Inserire l'angio-catetere calibro 18 come tubo endotracheale nella trachea e quindi collegare rapidamente il catetere al respiratore. Impostare il volume delle maree su 10 microliter per grammo con una frequenza respiratoria di 100 respiri al minuto. Mantenere l'anestesia con il due percento di isoflurane mescolato con due metri al minuto di aria ambiente.Sterilizzare il sito chirurgico con scrub alternati di clorexidina e alcol. Dare buprenorfina 01 milligrammo per chilogrammo per via sottocutanea. Coprire il topo con un drappo sterile.Controllare il riflesso del pedale per confermare l'anestesia riuscita prima dell'intervento chirurgico. Contrassegnare il sito di incisione due centimetri sotto l'ascella. Fai un'incisione laterale della parete del torace di due centimetri con un paio di forbici.Separare accuratamente il muscolo intercostale tra la quarta e la quinta costola usando una forza dritta e curva fino a entrare nella cavità toracica. Inserire il riavvolgitore toracico nella cavità toracica. Usa una certa forza per aprire il riavvolgitore toracico per dividere la quarta e la quinta costola di circa un centimetro.Sollevare il timo con un paio di forcette dritte. Rimuovere con cura il timo che copre il cuore con un paio di forbici. Passare con cura una sutura monofilamento 5-0 attraverso la superficie del ventricolo sinistro proprio sotto l'appendice atriale sinistra.Si dovrebbe fare attenzione a evitare di passare l'ago attraverso le principali arterie coronarie. Dopo che la sutura è in atto e non c'è sanguinamento significativo legare un nodo sciolto. Tirare il filo di sutura su e in avanti per sollevare il cuore dal petto.Una volta sollevato il cuore all'esterno del torace, applicare rapidamente una clip di medie dimensioni sull'atrio sinistro appena sopra la valvola mitrale. Rimuovere con cura la sutura di permanenza utilizzata per sollevare il cuore. Inizia a chiudere il petto con una sutura monofilamento 5-0 usando un semplice motivo interrotto.Inserire un tubo toracico calibro 23 attaccato a una siringa da 10 cc nella cavità toracica. E poi procedere con la chiusura del petto. Estraggono qualsiasi effusione di aria, sangue e pleura vicino al tubo toracico inserito utilizzando la siringa 10cc attaccata.E poi tirare il tubo quando non esce nulla. Chiudere l'area della pelle con la sutura monofilamento 5-0 utilizzando un semplice motivo interrotto. Rimuovere il drappo chirurgico.Dare buprenorfina 01 milligrammo per chilogrammo per via sottocutanea. Spegnere l'isoflurane. Escava il topo quando inizia a svegliarsi.Due settimane dopo l'uso della cardiografia eco per confermare il successo della chirurgia della stenosi atriale sinistra. L'efficacia della stenosi atriale sinistra è confermata utilizzando la cardiografia eco due settimane dopo l'op. Si ritiene che i ratti con velocità di afflusso del ventricolo sinistro superiore a due metri al secondo misurati su quattro punti di vista a camera abbiano sviluppato una stenosi significativa.10 settimane dopo l'intervento di stenosi atriale sinistra i ratti del gruppo LAS mostrano ingrossamento atriale sinistro, congestione polmonare, sovraccarico di pressione ventricolare destra e aumento del flusso venoso polmonare rispetto ai ratti del gruppo finto operato. Inoltre c'è un aumento significativo della pressione sistolica ventricolare destra nel gruppo della stenosi atriale sinistra rispetto al gruppo gestito fittiziamente. Tuttavia, la pressione sistolica ventricolare sinistra rimane la stessa in entrambi i gruppi.L'esame istologico della sezione trasversale lunga macchiata di Van Gieson elastico mostra un aumento della malattia media venosa polmonare e polmonare. Una maggiore dimensione venosa polmonare del gruppo stenosi atriale sinistra rispetto al gruppo finto operato era un muscolo più liscio che agisce nella colorazione mostra un aumento del numero di cellule muscolari lisce nell'arteria polmonare e nella vena polmonare del gruppo stenosi atriale sinistra rispetto al gruppo di controllo. Spero ti sia piaciuto guardare questo video.Sebbene l'intervento chirurgico sia relativamente semplice, prestare attenzione quando si applica la sutura al ventricolo sinistro per evitare di colpire le principali arterie coronarie. Quando si solleva il cuore tirare la sutura verso la testa del topo in modo che l'atrio sinistro la sua struttura di corsa possa essere chiaramente visualizzato. Applicando la clip all'atrio sinistro, la tenuta della clip dovrebbe essere sufficiente a causare una significativa stenosi atriale sinistra, ma non troppo stretta per indurre edema polmonare acuto e insufficienza cardiaca destra.Grazie per aver guardato questo video. E buona fortuna per il tuo esperimento.

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Questo protocollo descrive una procedura chirurgica per creare un modello per l'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) indotta dal flusso nei ratti e le procedure per analizzare i principali endpoint emodinamici e istologici in questo modello.

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