Applicazione della tecnologia microfluidica Biochip per rilevare siero allergene-specifiche dell'immunoglobulina E (sIgE)

Il sistema tecnologico microfluidico biochip è una sezione a base di cartucce microfluidiche che utilizza il principio di chemiluminescenza per l'assage dello specif siero IGE. Rispetto ad altri metodi di rilevamento, i sistemi bioIC hanno il vantaggio di essere a basso costo e richiedere meno siero per rilevare l'IGE sierico. Le implicazioni di questa tecnica sono tendenzialmente alla diagnosi di malattie allergiche come rinite e asma perché molti di questi pazienti sono sensibilizzati a comuni allergeni rilevabili.

Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulle malattie allergiche respiratorie, può anche essere applicato ad altre situazioni, come cibo e allergie cutanee. Poiché questa tecnica è più facile da usare e ha un metodo abbassato per la formazione degli operatori, le persone nuove al sistema possono imparare a usarla rapidamente. La dimostrazione vivida di questo problema è fondamentale in quanto determina se il test ha esito positivo e richiede un'abile operazione manuale.

Per testare campioni di siero per gli anticorpi dell'immunoglobulina E siebro per interi allergeni, selezionare casualmente tre campioni con almeno 900 microlitri di siero e prelevare il chip dal kit e numerarlo. Quindi, accendere il computer e l'alimentazione dell'analizzatore. Avviare il programma LAB IT nel computer.

Se viene visualizzata la finestra di avviso cornice scura, fare clic su OK per eseguire un test di perdita, quindi fare clic sul logo centrale per accedere all'interfaccia operativa. Controllare la temperatura di reazione e il dispositivo accoppiato alla carica o la temperatura ccd, la temperatura di reazione dovrebbe salire a 37 più o meno un grado celsius in circa dieci minuti e la temperatura ccd dovrebbe scendere a meno 15 più o meno un grado celsius. Quando la temperatura ccd è scesa a meno 15 più o meno un grado celsius, confermare che non ci sono altri elementi rimasti all'interno dello strumento e chiudere la porta.

Quindi fare clic su strumenti, test di sistema, test delle perdite. Al termine del test, verrà visualizzata la finestra del report. Successivamente, caricare 620 microlitri di tampone di lavaggio, 120 microlitri di tampone di blocco, 60 microlitri di coniugati A e B, 60 microlitri di substrati A e B e 100 microlitri di ciascun campione di siero nei serbatoi di reagente corrispondenti sulla cartuccia microfluidico.

Dopo aver fatto clic sull'ID cartuccia, utilizzare lo scanner di codici a barre per scansionare il numero di serie della cartuccia e immettere l'ID campione.Quindi posizionare la cartuccia nell'analizzatore, chiudere la porta e fare clic sull'analizzatore ed eseguire per avviare l'analisi. Al termine dell'analisi, esportare i risultati in un programma software statistico appropriato e rimuovere la cartuccia dall'analizzatore. Pulire leggermente il ferro da riscaldamento interno e l'elettromagnete dell'analizzatore con il 75% di alcol e chiudere la finestra LAB IT.

La finestra di monitoraggio della temperatura apparirà e si chiuderà automaticamente quando il CCD si riscalda fino alla modalità di protezione di cinque gradi celsius, a quel punto è sicuro spegnere l'analizzatore e il computer. Il sistema microfluidico produce risultati ripetibili, come dimostrato da questi dati per dander gatto, dander per cani e scarafaggi dopo nove cicli di test. Come osservato, tutti i dati rientrano nell'intervallo di due deviazioni standard, che è coerente con il massimo errore clinico consentito.

Come previsto dai tassi di positività per gli allergeni, tutti i risultati della valutazione per gli allergeni inalanti sono superiori agli allergeni alimentari. Poiché l'area sotto i valori della curva dimostra un intervallo da 0,613 a 0,984 e l'area sotto i valori della curva per i tre allergeni inalatori è maggiore di 0,950, si può concludere che il secondo sistema ha un'elevata precisione con riferimento al primo sistema. L'analisi di coerenza per i due sistemi rivela che i valori kappa per i tre inalatori sono tutti superiori ai valori kappa per gli allergeni alimentari che in generale scendeno al di sotto di 0,4.

In questi grafici a dispersione costruiti con il sistema due risultati lungo l'asse x e il sistema uno risultati lungo l'asse y, si può osservare la distribuzione dell'immunoglobulina siere E risultati dai due sistemi per sei diversi allergeni. Prima di iniziare il rilevamento, controllare sempre la reazione e le temperature CCD in quanto sono collegate all'accuratezza del test. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altri metodi come la diagnosi risolta dai componenti per rispondere a domande aggiuntive sulla standardizzazione incrociata degli allergeni e sulla co-sensibilizzazione.

La tecnologia dei chip microfluidici è stata applicata con successo nel campo della diagnosi allergica per affrontare problemi come il siero inadeguato e l'elevato costo medico Poiché lavorando con il siero umano, i sintomi possono determinare pericolosi. Durante l'esecuzione di questa procedura devono sempre essere prese l'attrezzatura di protezione individuale appropriata e altre precauzioni.