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DOI: 10.3791/59593-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a method for detecting mitochondrial reactive oxygen species (ROS) in murine hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) and leukemia cells. The focus is on understanding ROS's role in cellular function and survival, particularly in the context of acute myeloid leukemia (AML).
Descriviamo un metodo per l'utilizzo di citometria a flusso multiparametrico per rilevare le specie di ossigeno reattivo mitocondriale (ROS) in cellule staminali e progenitrici (HSPC) e cellule leucemiche da un modello murino di leucemia mieloide acuta (AML) MLL-AF9.
Le specie reattive dell'ossigeno o ROS, sono specie di ossigeno altamente reattive prodotte dalle cellule e influenzano il loro comportamento. Sebbene l'eccesso di ROS possa anche causare un diffuso caos cellulare e, nei casi più gravi, la morte cellulare. Pertanto, il mantenimento dell'omeostasi del ROS è di fondamentale importanza per la funzione cellulare e la sopravvivenza.
Il protocollo qui presentato, si concentra sulla misurazione di un tipo specifico di ROS, che è generato dai mitocondri, principalmente come prodotto metabolico nelle popolazioni di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche vive, normali o sane, nonché nelle cellule leucemie del modello di topo del cancro del sangue, leucemia mieloide acuta o AML. Questo protocollo può anche essere utilizzato per valutare come la manipolazione genetica, come la delezione genica o la sovraespressione, abbia un impatto sul ROS mitocondriale in diverse popolazioni ematopoietiche sane e maligne. E di conseguenza, potenzialmente fornire informazioni perspicaci sullo stato redux e possibilmente sul metabolismo delle cellule.
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