Development of Targeting Induced Local Lesions IN Genomes (TILLING) Populations in Small Grain Crops by Ethyl Methanesulfonate Mutagenesis

Lovepreet Singh; Adam Schoen; Alexander Mahlandt; Bhavit Chhabra; James Steadham; Vijay Tiwari; Nidhi Rawat

doi:10.3791/59743

Sviluppo di popolazioni indotte di lesioni locali indotte dal targeting NEI genomi (TILLING) in c...

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Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Development of Targeting Induced Local Lesions IN Genomes (TILLING) Populations in Small Grain Crops by Ethyl Methanesulfonate Mutagenesis

Sviluppo di popolazioni indotte di lesioni locali indotte dal targeting NEI genomi (TILLING) in colture di grano piccolo mediante mutagenesi metannata etilareale

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08:36 min

July 16, 2019

DOI: 10.3791/59743-v

Lovepreet Singh¹, Adam Schoen¹, Alexander Mahlandt¹, Bhavit Chhabra¹, James Steadham¹, Vijay Tiwari¹, Nidhi Rawat¹

¹Department of Plant Science and Landscape Architecture,University of Maryland, College Park

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Descritto è un protocollo per lo sviluppo di una popolazione di lesioni locali indotte di targeting IN genomi (TILLING) in piccole colture di grano con l'uso di metanosofato etilico (EMS) come mutageno. È inoltre previsto un protocollo per il rilevamento delle mutazioni utilizzando il saggio Cel-1.

Questo protocollo descrive in dettaglio lo sviluppo di robuste popolazioni TILLING ad alta frequenza di mutazione da parte della mutagenesi EMS nelle piccole colture di cereali. Le popolazioni TILLING possono essere utilizzate per la genomica funzionale, così come per la scoperta avanzata di geni genetici spaziali in piccole colture di cereali. Le popolazioni TILLING sviluppate utilizzando questa tecnica hanno alte frequenze di mutazione, e questo protocollo può essere applicato a qualsiasi genotipo.

Il rilevamento delle mutazioni basato sul test Cel-1 può essere condotto utilizzando apparecchiature di laboratorio di base. Il passo più importante è determinare la concentrazione ottimale dello SME. Pertanto, una curva di dosaggio dello SME dovrebbe essere fatta specificamente per la singola popolazione.

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