Implementazione di precisione dei test di dose minima di erithema (MED) per valutare la variazione individuale nella risposta infiammatoria umana

Il test minimo della dose di eritema, o test MED, è una tecnica con una lunga storia in contesti dermatologici e clinici di fototerapia. Ed è usato principalmente per determinare la minima quantità di radiazioni necessarie per produrre eritema, o arrossamento visibile sulla superficie della pelle. In questo particolare studio, quello che abbiamo fatto è sviluppare diverse nuove tecniche e procedure che consentono di adattare i test MED per uno scopo leggermente diverso, che è quello di quantificare con precisione la variazione nell'attivazione infiammatoria umana.

Il principale vantaggio del dosing e della misurazione di precisione nei test MED riguarda la riproducibilità dei risultati, che apre quindi nuove possibilità per esaminare sistematicamente altri fattori che potrebbero essere correlati all'infiammazione. A dimostrare la procedura saranno due dottorandi del mio laboratorio, Holly Sullivan-Toole e Corinne Carlton. Inizia scortando il partecipante nella sala prove.

Spiegare la procedura di test MED al partecipante e confermare la comprensione. Posizionare il polsino uno sull'avambraccio non dominante. Rimuovere solo il supporto protettivo in carta cerata dalle parti laterali, non centrali, del polsino.

Dopo aver posizionato il polsino uno nel sito di esposizione previsto, posizionare i punti di riferimento utilizzando un marcatore permanente per assicurarsi che il polsino due sia situato esattamente nella stessa posizione. Quindi, contrassegnare la pelle in quattro punti al di fuori delle pieghe di ciascuno dei lembi laterali di uno dei polsini, in alto a destra, in alto a sinistra, in basso a destra e in basso a sinistra. Assicurarsi che i segni siano abbastanza scuri da durare 24 ore, quindi possono essere utilizzati per posizionare il polsino tre esattamente nella stessa posizione all'appuntamento di follow-up.

Quindi, utilizzare uno spettrofotometro calibrato per registrare le letture in ciascuna delle sei aperture aperte in sequenza. Assicurarsi che lo spettrofotometro sia posizionato al centro delle aperture del polsino, evitando per quanto possibile talpe, cicatrici o altre imperfezioni. Infine, registrare in modo permanente tutti i valori SCI.

Per garantire letture coerenti con lo stesso punto di calibrazione, mantenere lo spettrofotometro in posizione on per tutta la durata della procedura MED e non spegnersi fino al completamento delle letture post-esposizione. Dopo aver rimosso il polsino uno, posizionare il polsino due nella stessa posizione utilizzando i punti di riferimento disegnati sulla pelle per il polsino uno. Indossa le attrezzature di sicurezza necessarie, tra cui occhiali, maniche e guanti a prova di UV, e assicurati che il partecipante faccia lo stesso.

Prima di attivare la lampada, disporre il braccio del partecipante in modo che i raggi UV della lampada siano perpendicolari all'angolo del polsino due sul braccio del partecipante. Attivare brevemente la lampada per regolare la distanza dal polsino due fino a quando il sensore del radiometro non legge 270 microwatt per centimetro al quadrato. Quindi, posizionare il sensore del radiometro rivolto verso la lampada UV, parallela alla superficie della pelle e il più vicino possibile alla posizione del polsino due.

Quindi, rimuovere il primo rivestimento dell'apertura prima di attivare la sorgente UV. Rimuovere ogni finestra nella patch di test della dose in base al programma visualizzato qui, che illustra programmi di dosaggio separati a seconda del tipo di pelle Fitzpatrick del partecipante. Attivare la sorgente UV e il cronometro contemporaneamente e rimuovere ogni rivestimento di apertura sul polsino due secondo il corretto programma di dosaggio, che si basa su Fitzpatrick Skin Type.

Quindi, spegnere la lampada al momento preciso specificato dal programma di dosaggio. Non disattivare il cronometro, poiché una serie aggiuntiva di letture dello spettrofotometro deve essere raccolta esattamente sette minuti dopo la disattivazione della lampada, come descritto di seguito. Infine, dopo esattamente sette minuti dalla disattivazione della lampada, registrare le letture finali dello spettrofotometro da ogni apertura in cuff two.

Inizia calibrando lo spettrofotometro in preparazione all'appuntamento di follow-up, 24 ore dopo. Preparare il polsino tre rimuovendo tutti i rivestimenti dell'apertura e lasciando il supporto in carta di cera bianca sulla parte centrale del cerotto. Quando si posiziona il polsino tre sul braccio del partecipante, rimuovere il supporto in carta cerata bianca dai due lembi laterali del cerotto.

Usa i punti di riferimento sull'avambraccio del partecipante per posizionare il polsino tre nella stessa posizione delle due patch precedenti. Infine, fai una lettura in ciascuna delle sei aperture aperte in sequenza. Questi risultati mostrano una risposta accurata della pelle ai test MED.

Ecco i dati completi per un singolo soggetto rappresentativo, suddivisi per periodo di valutazione. Pre-esposizione, sette minuti dopo l'esposizione e follow-up di 24 ore. Ogni apertura, da due a sei, riceve il 25% in più di energia rispetto a quella precedente.

Inoltre, vengono mostrati tutti i 72 soggetti, indicando la variazione che è probabile che si incontri, tra diversi FTS. Forse gli aspetti più importanti dei test MED di precisione riguardano l'aderenza al corretto programma di dosaggio per il tipo di pelle Fitzpatrick identificato e anche mantenere costantemente la giusta distanza tra la superficie della pelle e la fonte di luce UV. Parte della nostra motivazione nello sviluppo di queste tecniche è quella di facilitare la ricerca futura esaminando come le risposte infiammatorie potrebbero relazionarsi con un numero qualsiasi di variabili potenzialmente interessanti, come fattori psicologici, farmacologici o legati alla salute.