Name: Valutazione emodinamica invasiva per il sistema ventricolare destro e lipertensione arteriosa polmonare indotta dallipossia nei topi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Impara la valutazione emodinamica invasiva del ventricolo destro e dell'arteria polmonare nei topi mediante chirurgia toracica aperta. Questo metodo permette misurazioni simultanee per modelli di ipertensione arteriosa polmonare.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Questa ricerca è sostenuta dal Postgraduate Education and Teaching Reform Project del Peking Union Medical College (10023-2016-002-03), dal Fuwai Hospital Youth Fund (2018-F09) e dal Director Fund of Beijing Key Laboratory of Pre-Clinical Research and Valutazione dei materiali impiantati cardiovascolari (2018-PT2-

Il protocollo sugli animali è stato rivisto e approvato dall'Institutional Animal Care and Use Committee presso il Fuwai Hospital, Chinese Academy of Medical Science, Peking Union Medical College (NO.0000287). Gli animali sperimentali sono stati alloggiati e nutriti secondo le linee guida del benessere degli animali in Cina.
NOTA: i topi C57BL di età di otto-12 settimane erano alloggiati in un ambiente con un ciclo di luce scuro/12 h da 12 h. I topi PAH sono stati alloggiati per 4 settimane sotto una concentrazione di ossigeno del 10%, mantenuti da una camera ipossia controllata dall'ossigeno per indurre ipertensione polmonare, e topi di controllo sono stati alloggiati nell'aria ambiente (21% di ossigeno) in condizioni identiche. Le misurazioni RVP e PAP sono state eseguite alla fine delle 4 settimane di sfida di ipossia.
1. Preparazione preoperatoria
<ol><li>Immergere il catetere del trasduttore di pressione (dimensioni: 1 Fr) in 0,9% salina a temperatura ambiente per almeno 30 min prima dell'esperimento emodinamico.</li>
	<li>Filtrare la soluzione 2,2,2-Tribromoethanolo con filtro 0,22 m e conservarlo in frigorifero a 4 gradi.</li>
	<li>Preparare strumenti di chirurgia pulita e forniture come guanti per la chirurgia.</li>
	<li>Preparare 10 mL di 1,0% soluzione enzimatica digestiva per la pulizia del catetere.</li>
	<li>Collegare il catetere del trasduttore di pressione a un sistema di volume di pressione.</li>
	<li>Calibrare il trasduttore di pressione prima di ottenere misurazioni della pressione per ogni topo.<ol>
<li>Ruotare la manopola di calibrazione su 0 mmHg e 25 mmHg per inviare un segnale di pressione di verifica al software di acquisizione dati e configurare l'impostazione di calibrazione nel software.</li>
		<li>Ruotare la manopola su Trasduttore e regolare la manopola Saldo su linea di base a zero.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Impostare uno stereoscopio standard e una tabella chirurgica di piccoli animali controllata a temperatura per il mantenimento della temperatura corporea durante l'intervento chirurgico.</li>
	<li>Impostare un sistema di illuminazione della luce per la microchirurgia per fornire abbastanza luce sull'area chirurgica.</li>
</ol>2. Chirurgia open-chest e misurazione emodinamica
<ol><li>Anestesia topi con 250 mg/kg di 2,2,2 Tribromoetanolo tramite iniezione intraperitoneale (i.p.). Se necessario, ripetere dosi supplementari a 1/3 a 1/2 della dose originale durante la procedura.</li>
	<li>Rimuovere la pelliccia del torace e del collo con un rasoio e una lozione per la rimozione dei peli (Figura 1A, 2A).</li>
	<li>Fissare ogni topo in posizione supina su una tavola chirurgica animale piccolo controllato a temperatura per aiutare a mantenere la temperatura corporea (37 gradi centigradi) durante l'intervento chirurgico.</li>
	<li>Pulire il sito chirurgico con il 70% di etano.</li>
	<li>Una volta che l'anestesia è in vigore, confermare un'adeguata induzione dell'anestesia utilizzando un pizzico di dita dei dei idi.</li>
	<li>Fare un'incisione mediana sulla pelle del collo (Figura 1A).</li>
	<li>Dissezionare il muscolo scheletrico utilizzando pinze curve ed esporre la trachea (Figura 1B, 1C).</li>
	<li>Eseguire l'intubazione attraverso la bocca utilizzando un catetere di guaina per via endovenosa modificato da 22 G. Verificare che il tubo è nella trachea utilizzando pinze (Figura 1D).</li>
	<li>Collegare il tubo a un piccolo ventilatore animale. Calcolare e impostare la frequenza respiratoria e il volume delle maree in base al peso corporeo in base al manuale dell'utente del ventilatore10. Ad esempio, impostare la frequenza respiratoria su 133/min e il volume delle maree su 180 per un topo da 30 g in base al calcolo descritto.</li>
	<li>Fissare il tubo per la ventilazione con nastro adesivo.</li>
	<li>Confermare un'adeguata induzione dell'anestesia utilizzando un pizzico di dita dei dei idi.</li>
	<li>Fare un'incisione mediana sulla pelle del torace e sezionare attentamente i muscoli del torace con uno strumento di cauteria (Figura 2B, 2C).</li>
	<li>Tagliare lo sterno utilizzando le forbici al centro ed esporre la cavità toracica (Figura 2D).</li>
	<li>Prevenire qualsiasi sanguinamento utilizzando lo strumento cautery durante la procedura di chirurgia toracica aperta.</li>
	<li>Esporre il ventricolo destro con i retrattili (Figura 2E).</li>
	<li>Inserire il catetere del trasduttore a pressione imbevuto di saline attraverso un piccolo tunnel creato con un ago da 25 G nel ventricolo destro per misurare RVP (Figura 2F e Figura 3A, 3C).</li>
	<li>Tenere il cavo del catetere e attraversare la valvola polmonare in modo coassiale con l'arteria polmonare. Osservare la forma d'onda di pressione e ottenere un segnale PAP stabile (Figura 3B, 3D).</li>
	<li>Registrare i dati emodinamici utilizzando il sistema di acquisizione dei dati e il software.</li>
	<li>Dopo le misurazioni finali, l'eutanasia i topi umanamente attraverso l'iniezione i.p. di una dose in eccesso di 2,2,2-Tribromoethanol soluzione.</li>
	<li>Rimuovere con attenzione il catetere dal sistema cardiaco destro e metterlo in una siringa da 1 mL contenente 1% soluzione enzimatica digestiva.</li>
	<li>Utilizzare acqua distillata per lavare continuamente il catetere e conservarlo nella scatola originale.</li>
</ol>3. Analisi dei dati per l'emodinamica
NOTA: i dati emodinamici sono stati registrati e analizzati utilizzando il software di analisi11 (Tabella dei materiali).
<ol><li>Per ogni mouse, selezionare almeno 10 cicli di heartbeat continui e stabili senza rumore per ottenere i dati medi dei dati RVP o PAP per ogni parametro.</li>
	<li>Utilizzare il test tdi Student per confrontare i normali gruppi di controllo dell'aria e ipossia. NOTA: p < 0,05 è stato considerato statisticamente significativo. I dati sono presentati come la media : SD.</li>
</ol>

<ol><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+therapeutic+interventions+for+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).</li>
<li>Chatterjee, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Swan-Ganz+catheters%3A+past%2C+present%2C+and+future%3A+a+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint.</a> Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHAMPION+trial+rationale+and+design%3A+the+long-term+safety+and+clinical+efficacy+of+a+wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system.</a> Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).</li>
<li>Abraham, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+haemodynamic+monitoring+in+chronic+heart+failure%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+guides+management+to+reduce+decompensation+in+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction.</a> Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).</li>
<li>Shatat, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Kruppel-like+Factor+4+modulates+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).</li>
<li>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000">https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000</a> (2019).</li>
<li>Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+right+ventricular+function+in+the+normal+and+hypertensive+mouse+hearts+using+admittance-derived+pressure-volume+loops%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).</li>
<li>Skuli, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+deletion+of+hypoxia-inducible+factor-2alpha+%28HIF-2alpha%29+alters+vascular+function+and+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis.</a> Blood. 114 (2), 469-477 (2009).</li>
<li>Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.">http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.</a> (2019).</li>
<li>LabChart. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE">https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE</a> (2019).</li>
<li>Marius, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Chen, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+systolic+pressure+measurements+in+combination+with+harvest+of+lung+and+immune+tissue+samples+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (71), 50023(2013).</li>
<li>Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+characterization+of+rodent+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), 53335(2016).</li>
<li>Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+attenuates+hypoxia-induced+pulmonary+arterial+hypertension+via+bone+morphogenetic+protein+and+transforming+growth+factor-%CE%B2+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2019).</li>
<li>Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBueno-Beti%2C+C+%22Experimental+Models+of+Cardiovascular+Diseases.+Methods+in+Molecular+Biology.+vol+1816%22">Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816</a>. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

L'intubazione tracheale è il primo passo importante per interventi chirurgici a torso aperto. Il metodo classico di intubazione tracheale per piccoli animali, come ratti o topi, prevede di fare un'incisione a forma di T sulla trachea e di inserire direttamente tubi tracheali di tipo Y nella trachea. In pratica, troviamo che questo metodo non è facile durante il funzionamento. Il tubo tracheale di tipo Y è troppo grande per i piccoli animali e forma un angolo con la trachea. Così, è difficile fissare il tubo in atto. Inol...

L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è un disturbo cardiopolmonare cronico e grave con elevazione della pressione dell'arteria polmonare (PAP) e pressione ventricolare destra (RVP) causata dalla proliferazione cellulare e dalla fibrosi di piccole arterie polmonari 1. Cateteri dell'arteria polmonare, chiamati anche cateteri Swan-Ganz2, sono comunemente utilizzati nel monitoraggio clinico di RVP e PAP. Inoltre, un sistema di monitoraggio PAP wireless è stato utilizzato clinicamente3,4,5. Per imitare la malattia per lo studio nei topi, viene utilizzato un ambiente ipossico per simulare le manifestazioni cliniche umane della PAH6. Nella valutazione del PAP negli animali, gli animali di grandi dimensioni sono relativamente facili da monitorare attraverso cateteri dell'arteria polmonare utilizzando la stessa tecnica dei soggetti umani, ma piccoli animali come ratti e topi sono difficili da valutare a causa delle loro piccole dimensioni corporee. La misurazione emodinamica del sistema ventricolare destro nei topi è possibile con una dimensione ultrapiccola 1 Catetere Fr7. Un metodo per misurare RVP e PAP nei topi è stato riportato nella letteratura8,9, ma la metodologia manca di una descrizione dettagliata. RVP e PAP sono più difficili da misurare rispetto alla pressione ventricolare sinistra a causa delle differenze anatomiche tra il sistema cardiaco sinistro e destro.
Per ottenere entrambi i parametri PAP e RVP nello stesso mouse, descriviamo un approccio basato su chirurgia a torace aperto per le misurazioni emodinamiche del cuore destro, la sua convalida con topi sani e PAH, e come evitare di generare dati artificiali durante il complicato open-chest chirurgia. Anche se questa tecnica è meglio eseguita da un chirurgo ben addestrato, ha il vantaggio di essere in grado di valutare PAP e RVP nello stesso mouse.

<table><tbody><tr><td>2,2,2-tribromoetanolo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402-5G</td><td>per anestesia</td></tr><tr><td>Regolatore di temperatura per animali</td><td>Physitemp Instruments, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Per il controllo della temperatura</td></tr><tr><td>Pinze di dissezione</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>11274-20</td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Sistema di cauterizzazione Gemini</td><td></td><td>GEM 5917</td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Catetere endovenoso (22G)</td><td>BD angiocath</td><td>381123</td><td>Per intubazione</td></tr><tr><td>LabChart 7.3</td><td>ADInstruments</td><td></td><td>Per l'analisi dei dati</td></tr><tr><td>Sistema di illuminazione della luce</td><td>Olympus</td><td></td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Catetere Mikro-Tip</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>SPR-1000</td><td>Per la misurazione della pressione</td></tr><tr><td>Sistemi di pressione-volume Millar Millar</td><td>Instruments, Houston, TX</td><td>MVPS-300</td><td>Per la misurazione della pressione</td></tr><tr><td>Controller O2 e camera per ipossia</td><td>Biospherix</td><td>ProOx 110</td><td>Per l'ipossia cronica</td></tr><tr><td>Sistema di acquisizione dati PowerLab</td><td>Strumenti avanzati</td><td>PowerLab 16/30</td><td>Per la registrazione dei dati</td></tr><tr><td>Forbici</td><td>Strumenti di scienza fine, Inc.</td><td>14084-08</td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Ventilatore per piccoli animali</td><td>Apparecchio Harvard</td><td>Mini-Vent 845</td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Stereomicroscopio</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Nastro chirurgico</td><td>3M</td><td></td><td>Per chirurgia</td></tr><tr><td>Terg-a-zyme enzima</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287-1EA</td><td>Per la pulizia del catetere</td></tr></tbody></table>

valutazione emodinamica invasiva per il sistema ventricolare destro e l'ipertensione arteriosa polmonare indotta dall'ipossia nei topi

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è un disturbo cardiopolmonare cronico e grave. I topi sono un modello animale popolare utilizzato per imitare questa malattia. Tuttavia, la valutazione della pressione ventricolare destra (RVP) e della pressione dell'arteria polmonare (PAP) rimane tecnicamente impegnativa nei topi. RVP e PAP sono più difficili da misurare rispetto alla pressione ventricolare sinistra a causa delle differenze anatomiche tra il sistema del cuore sinistro e quello destro. In questo articolo, descriviamo un metodo stabile di misurazione emodinamica del cuore destro e la sua convalida utilizzando topi sani e PAH. Questo metodo si basa sulla chirurgia toracica aperta e supporto di ventilazione meccanica. È una procedura complicata rispetto alle procedure del torace chiuso. Mentre un chirurgo ben addestrato è richiesto per questo intervento chirurgico, il vantaggio di questa procedura è che può generare entrambi i parametri RVP e PAP allo stesso tempo, quindi è una procedura preferibile per la valutazione dei modelli Di PAH.

Il catetere del trasduttore di pressione è stato inserito nel ventricolo destro (Figura 3A) attraverso un tunnel espanso da un ago da 25 G ed è stata ottenuta una tipica forma d'onda RVP (Figura 3C). Il catetere è stato continuamente regolato e lentamente avanzato e mantenuto nello stesso asse dell'arteria polmonare mentre passa attraverso la valvola polmonare (Figura 3B). Quando il...

Qui, presentiamo un protocollo per eseguire una valutazione emodinamica invasiva del ventricolo destro e dell'arteria polmonare nei topi utilizzando un approccio chirurgico a torace aperto.

Valutazione emodinamica invasiva per il sistema ventricolare destro e l'ipertensione arteriosa polmonare indotta dall'ipossia nei topi

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Questo protocollo è una valutazione emodinamica basata su chirurgia toracica aperta ed è utile per la giusta valutazione della pressione dell'arteria ventricolare e polmonare in piccoli animali come i topi. Il vantaggio di questa procedura è che può generare sia parametri VP che PAP allo stesso tempo. Pertanto è preferibile per le valutazioni dei modelli di IAP.Inizia impostando l'attrezzatura per l'intervento chirurgico. Immergere il catetere del trasduttore di pressione nello 0,9% di soluzione salina a temperatura ambiente per almeno 30 minuti prima dell'esperimento emodinamico. Quindi, collegare il catetere a un sistema di volume di pressione.Calibrare il trasduttore di pressione ruotando la manopola di calibrazione a zero e 25 millimetri di mercurio per inviare un segnale di pressione di verifica al software di acquisizione dati, quindi configurare l'impostazione di calibrazione. Ruotare la manopola per trasduttore e regolare la valvola di bilanciamento su zero linea di base. Impostare un microscopio stereo standard, un tavolino chirurgico per animali di piccole dimensioni a temperatura controllata e un sistema di illuminazione leggera per la microchirurgia.Una volta che il mouse è correttamente anestetizzato, rimuovere la pelliccia del petto e del collo usando un rasoio e una lozione per la depilazione. Fissare il mouse in posizione supina sul tavolo chirurgico a temperatura controllata. Dopo aver fatto in modo che l'anestesia sia in vigore, fare un'incisione della linea mediana sulla pelle del collo.Sezionare il muscolo scheletrico usando forcep curve ed esporre la trachea. Eseguire l'intubazione attraverso la bocca con un catetere di sheath per via endovenosa calibro 22, confermando che il tubo è nella trachea con forcette. Collegare il tubo a un piccolo ventilatore per animali e fissarlo per la ventilazione utilizzando il nastro adesivo.Quindi, fare un'incisione della linea mediana sulla pelle del torace e sezionare attentamente il muscolo toracico usando uno strumento cautery. Tagliare lo sterno usando le forbici attraverso il centro ed esporre la cavità toracica. Assicurarsi di evitare qualsiasi sanguinamento utilizzando lo strumento cautery.Esporre il ventricolo destro con retrattori, quindi inserire il catetere trasduttore di pressione imbevuto salino attraverso un piccolo tunnel creato con un ago calibro 25 nel ventricolo destro per misurare la pressione ventricolare destra, o RVP. Tenere il cavo del catetere e attraversare la valvola polmonare in modo coassiale con l'arteria polmonare. Osservare la forma d'onda di pressione e ottenere una pressione dell'arteria polmonare stabile o un segnale PAP.Successivamente, registrare i dati emodinamici utilizzando il software di acquisizione dati. Rimuovere con cura il catetere dal sistema cardiaco destro e posizionarlo in una siringa millilitro contenente l'1% di soluzione enzimatica digestiva. Questo protocollo è stato utilizzato con successo per ottenere forme d'onda RVP e PAP nei topi inserendo un catetere trasduttore di pressione nel ventricolo destro e nell'arteria polmonare.Al fine di evitare la generazione di dati artificiali, i segmenti con rumore sono stati esclusi dall'analisi dei dati e sono state apportate correzioni se il livello zero del catetere era andato alla deriva. RVP e PAP sono stati misurati in topi con ipossia cronica indotta e i risultati sono stati confrontati con quelli ottenuti da un gruppo di controllo. Pap sistolico, PAP diastolico, PAP medio e pressione sistolica ventricolare destra sono stati tutti significativamente aumentati nel gruppo dell'ipossia cronica.La cosa più importante da ricordare è inserire attentamente il catetere trasduttore di pressione nel ventricolo destro, assicurandosi di evitare danni al catetere e confermare che la forma d'onda RVP liscia appare sullo schermo.

invasive-hemodynamic-assessment-for-right-ventricular-system-hypoxia

Research

Ricerca

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Un protocollo specifico e rapido per indagare contemporaneamente la funzione del cuore destro, infiammazione polmonare, e la risposta immunitaria viene descritto come strumento di apprendimento. Video e dati descrivono fisiologia e tecniche di microdissezione organizzata in un approccio di squadra che è adattabile per essere utilizzato per piccole e grandi dimensioni studi.

Ventricolo destro di pressione sistolica Misure in combinazione con raccolta di campioni di tessuto polmonare e immunitaria nei topi

Questo articolo fornisce un protocollo per la valutazione ecocardiografica delle dimensioni del ventricolo destro e l'ipertensione polmonare nei topi. Le applicazioni includono la determinazione del fenotipo e la valutazione seriale transgenici e modelli murini tossina-indotta di cardiomiopatia e la malattia vascolare polmonare.

La valutazione ecocardiografica del cuore destro in topi

Ventricolo destro (RV) La disfunzione è fondamentale per la patogenesi della malattia cardiovascolare, ma le metodologie non sono disponibili per la sua valutazione. I recenti progressi nella ecografica forniscono un'opzione non invadente e preciso per lo studio RV longitudinale. Qui, abbiamo dettaglio un metodo step-by-step ecocardiografico utilizzando un modello murino di sovraccarico di pressione RV.

Valutazione del ventricolo destro Struttura e funzione in modello murino di polmonare Arteria Costrizione da ecocardiografia transtoracica

L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è una malattia delle arteriole polmonari che porta alla loro obliterazione e allo sviluppo di insufficienza ventricolare destra. I modelli di roditori di PAH sono fondamentali per comprendere la fisiopatologia della PAH. Qui dimostriamo la caratterizzazione emodinamica, con cateterismo cardiaco destro ed ecocardiografia, nel topo e nel ratto.

Emodinamica Caratterizzazione di roditori modelli di ipertensione arteriosa polmonare

Vi presentiamo un protocollo di creazione di giusta disfunzione ventricolare in un modello di maiale inducendo ARDS. Dimostriamo che il monitoraggio invasivo della gittata cardiaca ventricolare tramite flusso sonde intorno l'aorta e l'arteria polmonare, nonché misurazioni della pressione arteriosa nell'aorta e arteria polmonare destra e sinistra.

Monitoraggio emodinamico invasivo dell'emodinamica dell'arteria aortica e polmonare in un modello animale grande di ARDS

Questo protocollo descrive l'induzione dell'ipertensione polmonare (PH) nei topi in base all'esposizione all'ipossia e all'iniezione di un antagonista del recettore VEGF. Gli animali sviluppano PH e ipertensione ventricolare destra (RV) 3 settimane dopo l'avvio del protocollo. Viene presentata anche la caratterizzazione funzionale e morfometrica del modello.

Induzione e caratterizzazione dell'ipertensione polmonare nei topi utilizzando il modello Ipossia/SU5416

Qui, forniamo un approccio utile per studiare il meccanismo del fallimento ventricolare destro. Un approccio più conveniente ed efficiente alla costrizione dell'arteria polmonare viene stabilito utilizzando strumenti chirurgici realizzati internamente. Inoltre, vengono forniti metodi per valutare la qualità di questo approccio mediante ecocardiografia e cateterizzazione.

Induzione del fallimento ventricolare destro da parte della costrizione dell'arteria polmonare e valutazione della funzione ventricolare destra nei topi

Il presente protocollo descrive la caratterizzazione ecocardiografica della morfologia e della funzione ventricolare destra in un modello di ratto di ipertensione arteriosa polmonare.

Valutazione ecocardiografica completa della funzione del ventricolo destro in un modello di ratto di ipertensione arteriosa polmonare

Questo protocollo fornisce una procedura passo-passo per l'esecuzione della somministrazione di dosi multiple in bolo endovenoso e il monitoraggio emodinamico invasivo nei topi. I ricercatori possono utilizzare questo protocollo per il futuro screening dei composti terapeutici per l'ipertensione arteriosa polmonare.

Dosaggio multiplo in bolo endovenoso e valutazione emodinamica invasiva in un modello murino di ipertensione arteriosa polmonare indotta da ipossia

La presentazione di metodi dettagliati per la valutazione della funzione del ventricolo destro migliorerà la qualità e l'affidabilità della ricerca sull'ipertensione polmonare, offrendo un solido quadro per studi futuri e migliorando la riproducibilità tra diversi laboratori.

Valutazione della funzione ventricolare destra in modelli sperimentali di ipertensione arteriosa polmonare

Impara la valutazione emodinamica invasiva del ventricolo destro e dell'arteria polmonare nei topi mediante chirurgia toracica aperta. Questo metodo permette misurazioni simultanee per modelli di ipertensione arteriosa polmonare.

Valutazione emodinamica invasiva per il sistema ventricolare destro e lipertensione arteriosa polmonare indotta dallipossia nei topi (Video) | JoVE Journal

Valutazione emodinamica invasiva per il sistema ventricolare destro e l'ipertensione arteriosa polmonare indotta dall'ipossia nei topi

Esplora altri video