Name: 18 mi lato Etichettatura F dei radiotracciati funzionalizzata con un accettatore di fluoruro di silicio (SiFA) per la tomografia a emissione di positroni (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-01-11T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 57 s
Description: Impara a marcare ligandi con fluorine-18 usando accettori di fluoruro di silicio (SiFA) per la tomografia a emissione di positroni. Questo metodo semplificato riduce i precursori e le condizioni reattive per la produzione di radiotraccianti PET.

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Gli autori non hanno riconoscimenti.

AVVISO: Bisogna tenere a mente che 18F è un isotopo radioattivo, e quindi è necessario eseguire tutte le procedure alla base di un'adeguata schermatura. La schermatura del piombo è appropriata per questo tipo di radiazioni. Assicurarsi di indossare badge di rilevamento delle radiazioni per tutta la durata di questa procedura. Inoltre, smaltire immediatamente i guanti prima di toccare qualsiasi cosa dopo la sintesi, in quanto possono essere contaminati da attività radioattiva. Utilizzare monitor a piedi a mano e contatori Pancake Geiger per verificare la contaminazione di maniche, mani e piedi.
1. Essiccazione azeotropica di 18F-anion
NOTA: Figura 2A Mostra un grafico del flusso di lavoro di questa procedura, che richiede 10 min.
<ol><li>Precondizionare una cartuccia di cambio anion (QMA) diammoniaca quaternaria (QMA) passando per 0,5 M K2CO3 (10 mL) attraverso la cartuccia, seguita da acqua deionizzata (10 mL).</li>
	<li>Passare una soluzione acquosa di [18F]F-/[18O]H2O (100-500 MBq) attraverso la cartuccia QMA precondizionata in retromarcia, utilizzando un adattatore da maschio a maschio. Eliminare il [18O]H2O. NOTA: questi passaggi possono essere eseguiti utilizzando un modulo di sintesi automatico o utilizzando schermatura aggiuntiva sulla siringa.</li>
	<li>Elutare le prime quattro gocce degli anioni fissi [18F]fluoroi dalla cartuccia QMA in una soluzione preparata di [2.2.2]cryptand (Table of Materials) (10 mg), 0.2 M 2 4CO3 (50 L, 10 zmol) e acetonitrile (1 mL) in una v-vial densa mente- NOTA: Solo le prime quattro gocce vengono utilizzate come la maggior parte del radioattivo [18F]fluoruro è eluito fuori il QMA in queste gocce. Questo riduce la quantità di base portata avanti nella soluzione di magazzino[18F]fluoruro, che è necessaria per evitare la degradazione della moiety SiFA.</li>
	<li>Sigillare la fiala e posizionarla in un bagno di olio minerale di 90 gradi posizionato su una piastra calda. Inserire un ago di sfiato e un ago collegato a un flusso di gas argon nel setto del tappo della fiala. Attendere 5 min per far evaporare i solventi sotto il flusso dolce di argon. Rimuovere eventuali tracce rimanenti di acqua aggiungendo 1 mL di acetonitrile per facilitare la co-evaporazione azeotropica. Ripetere questo passaggio 2x per garantire la secchezza.</li>
	<li>Una volta rimosso visibilmente il solvente, fermare il flusso di argon e rimuovere le siringhe dal tappo della fiala e rimuovere la fiala dal bagno d'olio.</li>
	<li>Risospendere il fluoruro essiccato [18F]nel solvente di reazione di scelta. NOTA: In questo caso, acetonitrile (1 mL) viene aggiunto per creare una soluzione di stock altamente reattiva [18F-]F- (100-500 MBq). Questa soluzione può ora essere utilizzata per l'etichettatura.</li>
</ol>2. Etichettatura SiFA-ligando in un unico passaggio
NOTA: Figura 2B mostra un grafico del flusso di lavoro di questa procedura, che richiede 15 min.
<ol><li>Precondizionare una cartuccia C-18 (Tabella dei materiali) risciacquandola con etanolo (10 mL) e acqua distillata (10 mL).</li>
	<li>Aggiungete la soluzione di stock [18F-]fluoruro a una fiala di reazione contenente un precursore con etichetta SiFA (100 nmol, 20-100 nmol). Lasciare che la reazione di etichettatura proceda per 5 min a temperatura ambiente senza agitare la soluzione. NOTA: L'intera soluzione di stock può essere aggiunta o un, a seconda di quanta attività si desidera per la reazione.</li>
	<li>Prelevare la miscela di reazione in una siringa da 20 mL contenente tampone di fosfato da 0,1 M (9 mL) e passare la soluzione attraverso la cartuccia C-18 precondizionata per intrappolare il tracciante etichettato.</li>
	<li>Lavare la cartuccia con acqua distillata (5 mL), quindi eluire il tracciante intrappolato dalla cartuccia C-18 con etanolo (300 - L) e diluire con cuscinetto fosfato sterile per l'iniezione (3 mL).</li>
	<li>Passare il purificato [18F]SiFA-tracer attraverso un filtro sterile. NOTA: Per ottenere un PET chiaro immaginate per l'imaging di piccoli animali, la dose di circa il paziente diviso deve essere compresa tra 5-8 MBq. Per uso umano, la dose di paziente partizionato dovrebbe essere compresa tra 200,300 MBq.</li>
	<li>Iniettare una piccola aliquota (4 MBq) del purificato [18F]SiFA-tracer su un sistema HPLC dotato di una colonna C-18 in fase invertita per confermare che la purezza radiochimica è superiore al 95%.</li>
</ol>

<ol><li>Wahl, R. L., Buchanan, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWahl%2C+RL+%22Principles+and+practice+of+positron+emission+tomography%22">Principles and practice of positron emission tomography</a>. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. (2002).</li>
<li>Wängler, C., Schirrmacher, R., Bartenstein, P., Wängler, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Click-chemistry+reactions+in+radiopharmaceutical+chemistry%3A+Fast+%26+easy+introduction+of+radiolabels+into+biomolecules+for+in+vivo+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Medical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Click-chemistry reactions in radiopharmaceutical chemistry: Fast & easy introduction of radiolabels into biomolecules for in vivo imaging.</a> Current Medical Chemistry. 17, 1092-1116 (2010).</li>
<li>Schirrmacher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((18F-labeling+of+peptides+by+means+of+an+organosilicon-based+fluoride+acceptor%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">18F-labeling of peptides by means of an organosilicon-based fluoride acceptor.</a> Angewandte Chemie International Edition. 45, 6047-6050 (2006).</li>
<li>Kostikov, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxalic+acid+supported+Si-18F-radiofluorination%3A+One-step+radiosynthesis+of+N-succinimidyl+3-%28di-tert-butyl%5B18F%5Dfluorosilyl%29benzoate+%28%5B18F%5DSiFB%29+for+protein+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Oxalic acid supported Si-18F-radiofluorination: One-step radiosynthesis of N-succinimidyl 3-(di-tert-butyl[18F]fluorosilyl)benzoate ([18F]SiFB) for protein labeling.</a> Bioconjugate Chemistry. 23 (1), 106-114 (2012).</li>
<li>Cacace, F., Speranza, M., Wolf, A. P., Macgregor, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleophilic+aromatic+substitution%3B+kinetics+of+fluorine-18+substitution+reactions+in+polyfluorobenzenes.+Isotopic+exchange+between+18F-+and+polyfluorobenzenes+in+dimethylsulfoxide.+A+kinetic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fluorine+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Nucleophilic aromatic substitution; kinetics of fluorine-18 substitution reactions in polyfluorobenzenes. Isotopic exchange between 18F- and polyfluorobenzenes in dimethylsulfoxide. A kinetic study.</a> Journal of Fluorine Chemistry. 21, 145-158 (1982).</li>
<li>Schirrmacher, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+p-%28di-tert-butyl%5B18F%5Dfluorosilyl%29benzaldehyde+%28%5B18F%5DSiFA-A%29+with+high+specific+activity+by+isotopic+exchange%3A+A+convenient+labeling+synthon+for+the+18F-labeling+of+N-amino-oxy+derivatized+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Synthesis of p-(di-tert-butyl[18F]fluorosilyl)benzaldehyde ([18F]SiFA-A) with high specific activity by isotopic exchange: A convenient labeling synthon for the 18F-labeling of N-amino-oxy derivatized peptides.</a> Bioconjugate Chemistry. 18, 2085-2089 (2007).</li>
<li>Kostikov, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-%284-%28di-tert-butyl%5B18F%5Dfluorosilyl%29benzyl%29-2-hydroxy-N%2CN-dimethylethylammonium+bromide+%28%5B18F%5DSiFAN%2BBr-%29%3A+A+novel+lead+compound+for+the+development+of+hydrophilic+SiFA-based+prosthetic+groups+for+18F-labeling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fluorine+Chemistry%22%5BJournal%5D)">N-(4-(di-tert-butyl[18F]fluorosilyl)benzyl)-2-hydroxy-N,N-dimethylethylammonium bromide ([18F]SiFAN+Br-): A novel lead compound for the development of hydrophilic SiFA-based prosthetic groups for 18F-labeling.</a> Journal of Fluorine Chemistry. 132, 27-34 (2011).</li>
<li>Wängler, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kit-like+18F-labeling+of+proteins%3A+Synthesis+of+4-%28di-tert-butyl%5B18F%5Dfluorosilyl%29benzenethiol+%28Si%5B18F%5DFA-SH%29+labeled+rat+serum+albumin+for+blood+pool+imaging+with+PET%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Kit-like 18F-labeling of proteins: Synthesis of 4-(di-tert-butyl[18F]fluorosilyl)benzenethiol (Si[18F]FA-SH) labeled rat serum albumin for blood pool imaging with PET.</a> Bioconjugate Chemistry. 20, 317-321 (2009).</li>
<li>Iovkova, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((para-Functionalized+aryl-di-tert-butylfluorosilanes+as+potential+labeling+synthons+for+18F+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry%22%5BJournal%5D)">para-Functionalized aryl-di-tert-butylfluorosilanes as potential labeling synthons for 18F radiopharmaceuticals.</a> Chemistry. 15, 2140-2147 (2009).</li>
<li>Wängler, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-step+18F-labeling+of+carbohydrate-conjugated+octreotate-derivatives+containing+a+silicon-fluoride-acceptor+%28SiFA%29%3A+In+vitro+and+in+vivo+evaluation+as+tumor+imaging+agents+for+positron+emission+tomography+%28PET%29%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">One-step 18F-labeling of carbohydrate-conjugated octreotate-derivatives containing a silicon-fluoride-acceptor (SiFA): In vitro and in vivo evaluation as tumor imaging agents for positron emission tomography (PET).</a> Bioconjugate Chemistry. 21, 2289-2296 (2010).</li>
<li>Ilhan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First-in-human+18F-SiFAlin-TATE+PET%2FCT+for+NET+imaging+and+theranostics%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">First-in-human 18F-SiFAlin-TATE PET/CT for NET imaging and theranostics.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 46, 2400-2401 (2019).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

La chimica dell'etichettatura SiFA rappresenta uno dei primi 18metodi di etichettatura F che impiegano una reazione di scambio isotopico straordinariamente efficiente che può essere eseguita a temperatura ambiente. Una tipica reazione radiochimica si basa sulla formazione di un legame carbonio-fluoro attraverso la reazione del[18F]fluoruro con una funzionalità fluoruro-reattiva attraverso un percorso di eliminazione o sostituzione. Queste condizioni di reazione sono spesso dure, eseguite a pH estrem...

Fluoro-18 (109 minuti di emivita, 97% di emissione di positroni) è tra i più importanti radionuclidi per la tomografia a emissione di positroni (PET), un metodo di imaging non invasivo che visualizza e quantifica la bio-distribuzione dei traccianti radioetichettati per varie malattie1. Peptidi e proteine sono particolarmente difficili da etichettare con [18F]fluoruro perché richiedono blocchi costitutivi formati da sintesi a più fasi2. Per ridurre la complessità di 18F-radiolabeling, l'accettatore di fluoruro di silicio (SiFA) è stato recentemente introdotto come strumenti affidabili3. Il gruppo SiFA è costituito da un atomo di silicio centrale collegato a due gruppi di butile terziari, una moiety fenili derivata e un atomo fluoro non radioattivo. I gruppi terziari di butile conferiscono stabilità idrolitica al legame siliconico-fluoruro, che è una caratteristica fondamentale per le applicazioni in vivo di SiFA coniugati come agenti di imaging.
Quando sono attaccati a una piccola molecola o biomolecola, i blocchi costitutivi SiFA legano gli anioni radioattivi [18F]fluoruro scambiando fluoro-19 per fluoro-18 a concentrazioni di nanomolare senza formare quantità significative di prodotti laterali radioattivi4. Inoltre, un'elevata resa radiochimica si ottiene rapidamente etichettando la moiety SiFA in solventi aprotici dividuci a basse temperature. Questo è in netto contrasto con le reazioni di scambio isotopico classiche, che producono radiotracciatori di bassa attività specifica5. In questi casi, grandi quantità di precursori (nella gamma di milligrammi) devono essere utilizzati per ottenere una ragionevole incorporazione di [18F]fluoruro. Le reazioni di scambio isotopico con SiFA sono molto più efficienti, come confermato da studi cinetici e calcoli della teoria funzionale della densità6,7. I SiFA etichettati sono facilmente purificati dall'estrazione in fase solida, poiché sia i composti SiFA etichettati che quelli non etichettati sono chimicamente identici. Questo differisce dai tradizionali traccianti radioetichettati, dove la molecola precursore e il prodotto etichettato sono due specie chimiche diverse e devono essere separati dopo la radioetichettatura da cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC). Utilizzando blocchi costitutivi SiFA, piccole molecole, proteine e peptidi possono essere etichettati con successo con [18F]fluoruro da protocolli di etichettatura in una e due fasi privi di complicate procedure di purificazione (Figura 1),4,8,9. Inoltre, alcuni composti etichettati siFA sono affidabili agenti di imaging in vivo per il flusso sanguigno e tumori10. La semplicità della chimica SiFA consente anche ai ricercatori non addestrati di utilizzare [18F]fluoruro per la sintesi e lo sviluppo del radiotracciante.

<table><tbody><tr><td>[18F]F-/H2[18O]O(</td><td>Ciclotrone prodotto)</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>[2.2.2]Cryptand</td><td>Aldrich</td><td>291110</td><td>Kryptofix 2.2.2</td></tr><tr><td>Acetonitrile anidro</td><td>Aldrich</td><td></td> <td>271004-Acqua</td></tr> <tr><td>deionizzata</td><td>Baxter</td><td>JF7623-Etanolo</td><td></td></tr><tr><td>, alcoli</td><td></td><td></td> commerciali anidri-carbonato <td></td></tr> di <tr><td>potassio</td><td>Aldrich</td> <td>209619-QMA</td><td></td></tr> <tr><td>cartuccia</td><td>Waters</td><td>186004540</td><td>QMA SepPak Light (46 mg) cartuccia</td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>C-18 cartuccia</td><td>Waters</td><td>WAT023501</td><td>C-18 SepPak Light cartuccia</td></tr><tr><td>C18 colonna</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4041-N0</td><td>HPLC Luna C18 250 x 10 mm, 5 &; micro; m</td></tr><tr><td>HPLC</td><td>Agilent</td> <td>Technologies-Scanner</td> <td>micro-PET serie 1200</td></tr><tr><td></td><td>Siemens-micro-PET</td><td></td> <td>R4</td></tr><tr><td>Scanner Radio-TLC Lettore di piastre</td><td></td> Raytest-Radio-TLC <td></td><td>Mini Gita</td></tr><tr><td>Filtro sterile 0,22&micro; m</td><td>Millipore</td><td>SLGP033RS</td><td>-</td></tr></tbody></table>

18 mi lato etichettatura f dei radiotracciati funzionalizzata con un accettatore di fluoruro di silicio (sifa) per la tomografia a emissione di positroni

18F-Labeling of Radiotracers Functionalized with a Silicon Fluoride Acceptor (SiFA) for Positron Emission Tomography

Il motivo strutturale para-sostituito di-tert-butylfluorolbenzene noto come l'accettatore di silicio-fluoruro (SiFA) è un tag utile nel toolkit del radiochimico per incorporare il fluoruro radioattivo [18F]fluoruro nei traccianti per l'uso nella tomografia a emissione di positroni. Rispetto alle tradizionali strategie di radioetichettatura, lo scambio isotopico di fluoro-19 da SiFA con [18F]fluoruro viene effettuato a temperatura ambiente e richiede partecipanti alla reazione minima. La formazione di sottoprodotti è quindi trascurabile e la purificazione è notevolmente semplificata. Tuttavia, mentre la molecola precursore utilizzata per l'etichettatura e il prodotto radioetichettato finale sono isotopicamente discreti, sono chimicamente identici e sono quindi inseparabili durante le procedure di purificazione. Il tag SiFA è anche suscettibile alla degradazione nelle condizioni di base derivanti dalla lavorazione e dall'essiccazione di [18F]fluoruro. Il "metodo a 4 gocce", in cui solo le prime 4 gocce di eluito [18F]fluoruro vengono utilizzate dall'estrazione in fase solida, riduce la quantità di base nella reazione, facilita una minore quantità molare di precursore e riduce le degradazioni.

Lo scambio isotopico SiFA semplicistico può raggiungere un elevato grado di incorporazione radiochimica di [18F]fluoruro (60-90%) con una quantità minima di complessità sintetica (Figura 1). La maggior parte delle molecole può essere radioetichettata con [18F]fluoruro in un unico passaggio senza coinvolgere HPLC per la purificazione (Figura 2). Radio-HPLC può essere utilizzato per scopi di controllo di qualità, in cui il picco di assorbimen...

La sintesi di fluoro-18 (18F) etichettato radiofarmaceutico per la tomografia a emissione di positroni richiede in genere mesi di esperienza. Quando incorporato in un radiotracciatore, il motivo SiFA (Silicon-fluorride acceptor) consente un semplice protocollo di etichettatura Fdi 18 che è indipendente da attrezzature costose e formazione preparatoria, riducendo la quantità precursore necessaria e utilizzando condizioni di reazione più lievi.

18 mi lato Etichettatura F dei radiotracciati funzionalizzata con un accettatore di fluoruro di silicio (SiFA) per la tomografia a emissione di positroni

The para-substituted di-tert-butylfluorosilylbenzene structural motif known as the silicon-fluoride acceptor (SiFA) is a useful tag in the ...

L'obiettivo generale della seguente procedura è dimostrare l'etichettatura di un ligando con il fluoro-fluoro-18 del radionuclide, o F-18, utilizzando composti accettori di fluoruro di silicio, di seguito denominati SiFA. L'etichettatura di un ligando con F-18 e l'iniezione nel corpo consente l'imaging di numerose malattie con tomografia ad emissione di positroni, o PET. Il fluoro-18 è tra i radionuclidi più importanti per l'imaging PET.Ha un'emidità di 109 minuti e il 97% del suo decadimento è per emissione di positroni, rendendolo quasi perfetto per l'imaging PET. Peptidi e proteine sono particolarmente difficili da etichettare con F-18 perché richiedono elementi costitutivi formati dalla sintesi in più gradi. In caso contrario, le macromolecole costituiranno un'ampia percentuale di traccianti PET disponibili.Per ridurre la complessità della radioetichettatura F-18, gli accettori di fluoruro di silicio sono stati introdotti come strumento affidabile. Il gruppo di SiFA è costituito da un atomo di silicio centrale collegato a due gruppi butili terziari, una moietà fenile derivatizzata e un atomo di fluoro. I due gruppi butili terziari conferiscono stabilità idrolitica al legame del fluoruro di silicio, che è una caratteristica critica per le applicazioni in vivo dei coniugati SiFA come agenti di imaging.La moiety fenile agisce come un legame tra il radionuclide e la molecola biologicamente attiva, rappresentata come R in questo diagramma. Se attaccati a una biomolecola, gli elementi costitutivi del SiFA scambiano facilmente il fluoro-19 con fluoro-18 radioattivo a causa della bassa energia di attivazione della reazione di scambio isotopico. Il precursore dell'etichettatura e il composto etichettato F-18 sono chimicamente identici, il che rende la purificazione relativamente semplice.La tecnica di etichettatura di scambio isotopico non canonica utilizzata con SiFA è anche alla pari per facilitare l'etichettatura con altre nuove tecniche di etichettatura come lo scambio isotopico trifluoroborato e la chelazione del fluoruro di alluminio. Bisogna tenere presente che l'F-18 è un isotopo radioattivo. Pertanto, è necessario eseguire tutte le procedure dietro un'adeguata schermatura.La schermatura del piombo è appropriata per questo tipo di radiazioni. Assicurati di indossare badge di rilevamento delle radiazioni per tutta la durata di questa procedura. Inoltre, smaltire immediatamente i guanti prima di toccare qualsiasi cosa dopo la sintesi in quanto possono essere contaminati da radioattività.Utilizza monitor mani / piedi e contatori Geiger pancake per verificare la contaminazione di maniche, mani e piedi. Un numero significativo di piccole molecole organiche è stato etichettato con fluoro-18. Tuttavia, la chimica organica interventiva richiede tipicamente dure condizioni di reazione per incorporare l'F-18 in queste molecole.Queste condizioni sono solitamente incompatibili con funzionalità chimiche sensibili e macromolecole delicate come proteine e peptidi. Pertanto, nuovi metodi di etichettatura di queste molecole sono molto ricercati. Il vantaggio principale della tecnica SiFA è che consente di completare una procedura complicata entro uno o due passaggi con una purificazione minima in modo che i radio-farmaceutici F-18 possano essere preparati con meno formazione ed esperienza.Le implicazioni di questa tecnica si estendono ai gruppi di ricerca interessati alle applicazioni in vivo delle biomolecole sperimentali. La metodologia di etichettatura SiFA utilizza il fluoruro F-18, che viene prodotto regolarmente negli impianti di ciclotrone attraverso il bombardamento protonico dell'acqua O-18. Per la maggior parte delle reazioni F-18, il fluoruro F-18 deve prima essere separato dall'acqua ciclotrone per preparare una soluzione di stock organico anidro di anioni F-18 altamente nucleofili per la reazione.Ciò si ottiene comunemente attraverso l'intrappolamento del fluoruro F-18 su una cartuccia di scambio di anione, eluendo il fluoruro con una base e criptato sciolto in acetonitrile e asciugando azeotropicamente la soluzione risultante prima di ri-sospensione nel solvente a reazione secca di scelta. Inizia precondizionando una cartuccia di scambio QMA con 5 carbonato di potassio molare seguito da acqua deionizzata. Quindi, passare una soluzione acquosa di fluoruro F-18 attraverso la cartuccia QMA precondizione al contrario utilizzando un adattatore maschio-maschio come mostrato.Se si devono gestire grandi quantità di radioattività, questi passaggi possono essere eseguiti utilizzando un modulo di sintesi automatizzato o utilizzando una schermatura aggiuntiva sulla siringa. Scartare l'acqua oxygen-18. Elute le prime quattro gocce degli anioni fissi F-18 dalla cartuccia QMA con una soluzione preparata di kryptofix, carbonato di potassio e acetonitrile in un flaconcino a V dalle pareti spesse e sigillare il flaconcino.Posizionare il flaconcino in un bagno d'olio riscaldato a 90 gradi. Solo le prime quattro gocce sono usate poiché la maggior parte del fluoruro radioattivo viene eluitta dal QMA con queste gocce. Ciò riduce la quantità di base portata avanti nella nostra soluzione stock F-18, necessaria per evitare la degradazione della moiety SiFA.Inserire un ago di sfiato e un ago collegati a un flusso di gas argon, quindi attendere cinque minuti per evaporare i solventi. Per rimuovere le tracce di acqua, aggiungere acetonitrile per facilitare l'evaporazione azeotropica. Completare questo passaggio due volte per garantire la secchezza.Dopo aver rimosso gli aghi di argon e sfiato, sospendere di nuovo il residuo di fluoruro secco nel solvente di scelta, in questo caso acetonitrile, per creare una soluzione stock di F-18 altamente reattivo. Questa soluzione può ora essere utilizzata per l'etichettatura. Precondizione una cartuccia leggera C18 risciacquarla con etanolo e con acqua distillata.Aggiungere la soluzione stock di fluoruro F-18 a una fiala di reazione contenente un precursore etichettato SiFA. L'intera soluzione stock può essere aggiunta o un'aliquota, a seconda della quantità di attività desiderata per la reazione. Lasciare procedere la reazione per cinque minuti a temperatura ambiente senza mescolare.Far cadere la miscela di reazione in una siringa contenente 1 tampone di fosfato molare. Passare la soluzione attraverso la cartuccia C18 precondizione per intrappolare il tracciante etichettato. Quindi lavare la cartuccia con acqua distillata, quindi elutare il tracciante con etanolo.Diluire con tampone di fosfato sterile per iniezione. Passare il tracciante etichettato F-18 purificato risultante attraverso un filtro sterile. Per ottenere un'immagine PET chiara per l'imaging di piccoli animali, la dose del paziente diviso dovrebbe essere compresa tra cinque e otto megabecquerel.Per uso umano, la dose del paziente diviso deve essere compresa tra 200 e 300 megabecquerel. Raccogliere e iniettare una piccola aliquota del tracciante etichettato F-18 in un sistema HPLC dotato di una colonna C18 in fase invertita per confermare che la purezza radiochimica è maggiore del 95%Il tracciante SiFA etichettato F-18 può essere iniettato in un soggetto animale o umano e i dati dinamici raccolti da uno scanner PET possono essere ricostruiti per creare una serie di serie temporali di immagini PET tridimensionali. In un esempio, questo tracciante di piccole molecole con tag SiFA sviluppato per l'imaging del cancro alla prostata è stato utilizzato con successo per visualizzare i tumori impiantati nei topi per studi preclinici.Il tag SiFA ha anche dimostrato di essere adatto per la radioetichettatura, il cancro che prende di mira peptidi come tirosina-3-ottreotato o TATE. Il tracciante F-18 etichettato SiFAlin-TATE mostrato qui è stato utilizzato per visualizzare i tumori neuroendocrini nei pazienti oncologici. La chimica dell'etichettatura SiFA insieme a trifluoroborati e chelati al fluoruro di alluminio rappresenta uno dei primi metodi di etichettatura F-18 che impiega una reazione di scambio isotopica straordinariamente efficiente a temperatura ambiente o inferiore.Il metodo può essere completato in soli 30 minuti, il che, rispetto alle procedure di radioetichettatura convenzionali, riduce al minimo il consumo chimico e l'esposizione radioattiva.

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Di micro-onde one-pot di Sintesi N-Succinimidile-4-[ 18 F] fluorobenzoate ([ 18 F] SFB)

Grazie alla sua emivita radioattiva di più giorni e alle favorevoli proprietà di decadimento, il radiometallo emettitore dipositroni 89 Zr è estremamente adatto per l'uso in radiofarmaci basati su anticorpi per l'imaging PET. In questo protocollo, verranno descritte la bioconiugazione, la radiosintesi e l'applicazione preclinica di 89anticorpi marcati con Zr.

Il bioconjugation e radiosintesi di<sup&gt; 89</sup&gt; Anticorpi Zr-DFO-etichettati

Abbiamo dimostrato la sintesi radiochimica semiautomatica di procedure [ 18 F] 3F4AP e di controllo della qualità.

Sintesi radiochimica automatizzata di [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: un nuovo tracciante PET per le malattie Demyelinating di imaging

Descriviamo un protocollo per il rilevamento di preclinici in vivo della metastasi del cancro. Si basa su un reporter del radionuclide-fluorescenza combinando lo symporter dello ioduro di sodio, rilevato da non-invasiva [18F] tetrafluoroborate-PET e una proteina fluorescente per semplificata ex vivo conferma. Il metodo è applicabile per preclinici in vivo delle cellule di rilevamento di là di biologia del tumore.

Del radionuclide-fluorescenza Reporter Gene Imaging per monitorare la progressione del tumore nei modelli del roditore del tumore

Positrone-emissione di positroni (PET) imaging siti coinvolti in studi di ricerca clinica precoce più bisogno di capacità di produzione del radiotraccitore robusto e versatile. Utilizzando il radiotraccitore [18F] clofarabina come esempio, illustriamo come automatizzare la sintesi di un radiotraccitore utilizzando un radiosynthesizer flessibile, lettore di cassette e convalidare la sintesi per uso clinico.

Automazione di un positrone-emissione di positroni (PET) radiotraccitore sintesi protocollo per la produzione di clinica

[18F]-tomografia computata di tomografia a emissione di positroni del fluorodeoxyglucose (FDG) è utile per studiare il metabolismo del glucosio legato alla funzione del cervello. Qui, presentiamo un protocollo per un tracciante FDG [18F] set-up e valutazione semiquantitativa dell'analisi dell'area di interesse per aree cerebrali mirata associata con le manifestazioni cliniche in pazienti con la ferita di cervello traumatica severa.

Valutazione semi-quantitativa utilizzando [18F] FDG Tracer in pazienti con trauma cranico severo

Riportiamo un'efficiente tecnica di radioetichettatura del carbonio-11 per produrre traccianti clinicamente rilevanti per la tomografia a emissione di Positron (PET) utilizzando cartucce di estrazione in fase solida. 11 Del sistema di L'agente c-metilante viene passato attraverso una cartuccia precaricata con precursore e l'eluizione successiva con etanolo acquoso fornisce traccianti PET chimicamente e radiochimicamente puri in alti rese radiochimiche.

Fase solida 11C-Metilazione, purificazione e formulazione per la produzione di traccianti PET

Qui, descriviamo la radiosintesi di 1-(2-[18F]Fluoroetil)-L-triptofano, un agente di imaging tomografico ad emissione di positroni per studiare il metabolismo del triptofano, utilizzando una strategia one-pot, in due fasi in un sistema di sintesi radiochimica con buone rese radiochimiche, alto eccesso enantiomerico e alta affidabilità.

Radiosintesi di 1-(2-[18F]Fluoroetil)-L-triptofano utilizzando un protocollo One-pot, Two-step

Questo lavoro descrive la produzione automatizzata di fino a 1,7 GBq di [68Ga]Ga-FAPI-46 sul sintetizzatore iPHASE MultiSyn per l'imaging PET della proteina di attivazione dei fibroblasti.

Una radiosintesi automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 per uso clinico di routine

Questo articolo descrive la radiosintesi, la formulazione, il controllo di qualità di una nuova sonda radiomarcata (ad esempio, 68nanocorpi marcati con GA NM-02) e il suo utilizzo per l'imaging PET/CT di piccoli animali in un modello di xenotrapianto.

Radiosintesi, controllo di qualità e tomografia a emissione di positroni per piccoli animali di 68nanomolecole marcate con GA

Questa ricerca descrive il processo automatizzato per la produzione di [68Ga]Ga-3BP-3940 con il sintetizzatore GAIA V2, per l'imaging PET della proteina di attivazione dei fibroblasti. Vengono inoltre presentati i risultati dei test di controllo qualità eseguiti su tre lotti di prova.

Preparazione automatizzata di [68Ga]Ga-3BP-3940 su un modulo di sintesi per l'imaging PET del microambiente tumorale

Impara a marcare ligandi con fluorine-18 usando accettori di fluoruro di silicio (SiFA) per la tomografia a emissione di positroni. Questo metodo semplificato riduce i precursori e le condizioni reattive per la produzione di radiotraccianti PET.

18 mi lato Etichettatura F dei radiotracciati funzionalizzata con un accettatore di fluoruro di silicio (SiFA) per la tomografia a emissione di positroni (Video) | JoVE Journal

¹⁸ mi lato Etichettatura F dei radiotracciati funzionalizzata con un accettatore di fluoruro di silicio (SiFA) per la tomografia a emissione di positroni

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