Name: Ricostruzione del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore di topo addominale (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: Impara una nuova tecnica chirurgica per il trapianto cardiaco addominale eterotopico nel topo. Questo metodo ricostruisce il circuito sanguigno con anastomosi dell'aorta e della vena cava inferiore toracica, migliorando lo studio delle risposte alloimmunitarie.

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Ringraziamo la Dott.ssa Yun Xu per il suo aiuto come doppiatore, la Dott.ssa jianhua Peng per il suo aiuto nell'editing video e la dott.ssa Annika Kuckhahn per i suoi commenti e il suo supporto. Questo lavoro è stato sostenuto in parte dalla Fondazione tedesca per la ricerca (DFG) per promuovere collaborazioni internazionali (da HO2581/4-1 ad AH) e dalla National Science Foundation of China (NSFC; #81760291 to FJ).

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti seguendo gli orientamenti della direttiva 2010/63/UE del Parlamento europeo sulla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici (comitato Etico approvato, #G1071/09).
NOTA: La preparazione preliminare, l'anestesia, la cura post-operatoria e il lavoro di monitoraggio sono gli stessi eseguiti nei metodichirurgici tradizionali 1,2,4. I topi BALB/c sono stati donatori di cuore e C57BL/6J come riceventi di trapianti. I topi avevano un'età compresa tra 8 e 12 settimane, pesavano ~ 30 g al trapianto e erano alloggiati in condizioni standard.
1. Fasi preparatorie
<ol><li>Per l'anestesia, dare ai topi isoflurane inalatore (2%) fino ad addormentarsi, seguiti da iniezioni intraperitoneali di chetamina (100 mg/kg) + xiazina (10 mg/kg) + acepromazina (2 mg/kg). Per l'analgesia postoperatoria, applicare Metamizol (200 mg/kg) p.o. e Carprofen (5 mg/kg) s.c.. NOTA: L'applicazione di antibiotici è stata asteneta di proposito in quanto queste sostanze possono influenzare le risposte immunologiche.</li>
	<li>Per la chirurgia, utilizzare una serie di strumenti microscopici tra cui una micro-forbice, micro-pinze, un portaaghi e micro morsetti emostatici. È necessaria anche una penna elettrochirurgica. Eseguire suture utilizzando tipi di nylon 7/0er, 10/0er e 4/0er.</li>
	<li>Posizionare il mouse in una scatola per l'inalazione di isoflurane (2%) per 40-60 secondi. Determinare la profondità dell'anestesia stringendo la zampa con una pinzetta. Se c'è una completa mancanza di risposta per questo stimolo, vai al passo successivo.</li>
	<li>Una volta che il mouse si è addormentato, pesare il mouse.</li>
	<li>Applicare un'iniezione intraperitoneale di chetamina (100 mg/kg) + xiazina (10 mg/kg) + acepromazina (2 mg/kg) al topo anestetizzato.</li>
	<li>Ritagliare la pelliccia addominale e posizionare il mouse sul tavolo dell'operazione. Eseguire la disinfezione utilizzando lo ioduro di povidone per 3 volte, quindi drappeggiare correttamente il mouse usando un asciugamano chirurgico fenestrato.</li>
</ol>2. Procedura operativa del donatore
<ol><li>Usa le forbici per tagliare la pelle dal collo all'addome inferiore e stacca l'intero strato della pelle alla linea mediana di entrambe le ascella.</li>
	<li>Utilizzare le forbici per tagliare i muscoli della parete addominale e spostare delicatamente i visceri a sinistra (dal punto di vista dell'operatore). Avvolgere i visceri con una garza soluzione salina imbibed per esporre in sicurezza la vena cava inferiore.</li>
	<li>Utilizzare una siringa da 1 ml per iniettare lentamente 0,4 ml della soluzione di eparina (contiene 500 U di eparina) nella vena cava inferiore e attendere 1 minuto prima di estrarre l'ago.</li>
	<li>Estrarre l'ago e utilizzare una micro-forbice per tagliare sia la vena cava inferiore che l'aorta addominale per accelerare la dissanguamento.</li>
	<li>Usa le forbici per aprire la cavità toracica eseguendo un taglio a forma di U; esporre completamente il cuore, i polmoni e tutti i vasi sanguigni toracico.<ol>
<li>Esporre l'aorta toracica, tagliare 1/2 del lume, quindi tagliare la vena polmonare per facilitare l'irrigazione e il drenaggio.</li>
		<li>Inserire un tubo di irrigazione nell'apertura dell'aorta toracica, iniettare almeno 2 ml di 4 °C di soluzione cardioplegia istidina-triptofano-chetoglutarato freddo(soluzione Custodiolo HTK) 9 fino a quando il deflusso della vena polmonare è completamente chiaro e il cuore smette completamente di battere.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Estrarre il tubo di irrigazione e staccare lo sterno.</li>
	<li>Utilizzare micro forbici per rimuovere il timo e per rimuovere leggermente il grasso intorno all'arco aortico.</li>
	<li>Utilizzare forcep dritte e curve per esporre e ligarare il tronco dell'arteria pulmonalis (sul lato destro dell'arco aortico) con una sutura 10/0.</li>
	<li>Utilizzare micro forcep per separare il grasso e il tessuto connettivo attaccati all'IIVC, esporre e legare la vena cava superiore (sul lato sinistro dell'arco aortico) con una sutura 7/0 e utilizzare micro forbici per tagliarla dietro la legatura.</li>
	<li>Fai una sutura 7/0 intorno alla base del cuore sotto l'arco aortico, l'IIVC ed entrambi i padiglioni auricolari. Quindi ligare i rami dell'arteria polmonare e i vasi polmonari venosi.</li>
	<li>Utilizzare micro forbici per trasliare l'arco aortico il più distale possibile, i vasi polmonari sotto la legatura e l'IIVC vicino al diaframma. Togli il cuore dal petto.</li>
	<li>Mettere il cuore del donatore espiantato in soluzione cardioplegia HTK fredda a 4 °C e conservare temporaneamente.</li>
</ol>3. Procedura operativa del destinatario
NOTA: I passaggi iniziali dell'operazione sono simili a quelli precedentemente mostrati per il topo donatore, tra cui anestesia e disinfezione.
<ol><li>Eseguire il taglio della pelle addominale in modo trasversale, coprire gli organi addominali con una garza bagnata usando una soluzione salina.</li>
	<li>Utilizzare micro forcep per esporre la vena cava inferiore e l'aorta addominale e liberarli dal tessuto adiposo circostante.</li>
	<li>Utilizzare micro forcep per ligare o elettrocauterizzare i vasi laterali di diramazione (laterali o sotto la vena/aorta) sotto i vasi renali.</li>
	<li>Utilizzare pinze applicatori a clip per posizionare due micro morsetti emostatici nella parte addominale della vena/aorta provenienti da destra lasciando più di 1 cm di distanza sia per l'aorta che per la vena per garantire spazio alla costruzione dell'anastomosi tra di loro.</li>
	<li>Utilizzare micro forbici per fare un'incisione nell'aorta un po 'più vicino al morsetto inferiore rispetto al morsetto superiore. In alternativa, utilizzare un ago da 30 G per fare un piccolo foro e aprirlo con micro forbici.</li>
	<li>Posizionare il mouse ricevente in modo che l'aorta sia rivolta verso l'operatore con la vena cava sull'altro lato. Quindi posizionare il cuore nella cavità addominale e coprirlo con un piccolo cuscinetto di garza bagnato.</li>
	<li>Utilizzare una sutura 10/0 per adattare e cucire l'aorta donatrice all'aorta ricevente iniziando caudally, fare un nodo e procedere con una sutura di corsa verso la parte superiore dell'incisione (circa 4-5 punti). Successivamente, capovolgere il cuore verso destra (dal punto di vista del soggetto), coprirlo di nuovo e continuare la sutura sul lato sinistro fino a raggiungere l'estremità caudale e annodarla.</li>
	<li>Utilizzare un tubo di irrigazione per iniettare almeno 0,5 ml di soluzione cardioplegia HTK 4 °C per sciacquare l'IIVC del donatore.</li>
	<li>Utilizzare micro-forbici per tagliare un foro rotondo sulla vena cava inferiore addominale del ricevente, che dovrebbe avere le stesse dimensioni del lume IIVC donatori. L'incisione deve essere posizionata sopra l'apertura anastomotica aortica. Rendere l'incisione vena più grande dell'incisione aortica.</li>
	<li>Utilizzare una sutura 10/0 per cucire l'IIVC donatore alla vena cava ricevente a partire dal caudally. Legare un nodo ed eseguire una sutura di corsa fino a raggiungere la parte superiore dell'incisione. Utilizzare cinque punti e continuare la sutura a sinistra. Infine, legare un nodo nell'angolo della coda e stringere con cura (fare attenzione a non tirare troppo stretto).</li>
	<li>Posizionare le piccole parti della spugna emostatica intorno alla vena e agli anastomosi aortiche.</li>
	<li>Utilizzare pinze applicatori a clip per rimuovere prima i morsetti microemostatici inferiori e poi superiori e sciacquare la cavità addominale con cloruro di sodio temperato allo 0,9% a 38,0 °C.</li>
	<li>Utilizzare micro forcep per togliere la spugna emostatica.</li>
	<li>Osservare il battito cardiaco del cuore trapiantato.</li>
	<li>Usa le flessioni per rimettere l'intestino nella cavità addominale e nelle suture a due strati (muscoli addominali seguiti dalla pelle) per chiudere la ferita addominale con una sutura 4/0.</li>
	<li>Mettere i topi in una camera di lavoro per il controllo dell'ossigeno e della temperatura (ad esempio, INVIVO2-400) per fornire un ambiente caldo e ricco di ossigeno per il recupero dei topi trapiantati, attendere che i topi si sveglino.</li>
	<li>Per l'analgesia postoperatoria, sommiture direttamente metamizolo 200 mg/kg per os dopo l'operazione. Quattro e 16 ore dopo l'operazione dare metamizolo 200 mg/kg per os+ Carprofen (5 mg/kg) s.c. Nell'ulteriore follow-up, dare Carprofen (5 mg/kg) s.c ai topi trapiantati ogni 24 ore per tre giorni consecutivi dopo l'operazione.</li>
</ol>

<ol><li>Corry, R., Winn, H., Russell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
<li>Habertheuer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+tissue-specific+exosome+profiling+enables+noninvasive+monitoring+of+acute+rejection+in+mouse+allogeneic+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Donor tissue-specific exosome profiling enables noninvasive monitoring of acute rejection in mouse allogeneic heart transplantation.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (6), 2479-2489 (2018).</li>
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<li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+for+blood+circuit+reconstruction+in+mouse+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model.</a> Microsurgery. 26, 594-598 (2006).</li>
<li>Alamran, F. G., Shahkolahi, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Total+arterial+anastomosis+heterotopic+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model.</a> Transplantation Proceedings. 45, 625-629 (2013).</li>
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<li>Westhofen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heterotopic+heart+transplantation+in+mice+as+a+small+animal+model+to+study+mechanical+unloading+-+Establishment+of+the+procedure%2C+perioperative+management+and+postoperative+scoring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The heterotopic heart transplantation in mice as a small animal model to study mechanical unloading - Establishment of the procedure, perioperative management and postoperative scoring.</a> PLoS One. 14 (4), 0214513(2019).</li>
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<li>Türk, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+chronic+graft+injury+with+a+new+HTK-based+preservation+solution+in+a+murine+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cryobiology%22%5BJournal%5D)">Reduction of chronic graft injury with a new HTK-based preservation solution in a murine heart transplantation model.</a> Cryobiology. 64 (3), 273-278 (2012).</li>
</ol>

La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi è molto impegnativa e questo implica una restrizione all'uso diffuso di questo modello.
Uno degli svantaggi della tecnica convenzionale è la lunghezza limite dell'arteria polmonare del donatore (PA). Di solito è di circa 2 mm di lunghezza, mentre la lunghezza dell'IIVC del cuore donatore utilizzato nel nostro modello è generalmente di circa 1 cm(Figura 2). Ciò significa che nel modello mo...

La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi rappresenta un modello standard per la ricerca nell'immunologia deitrapianti 1,2,3. Tuttavia, è molto difficile da eseguire e ciò implica una restrizione all'uso diffuso di questo modello4,5.
Nel trapianto tradizionale di cuore di topo (THTx), l'aorta donatrice e l'aorta addominale ricevente vengono anastomosi mentre l'arteria polmonare è anastomosa alla vena cava inferiorericevente 6,7,8.
In questa tecnica modificata di trapianto di cuore di topo, l'aorta donatrice viene anastomosa all'aorta addominale ricevente e il donatore IIVC viene anastomoso alla vena cava inferiore ricevente(3,4,6) ( Figura2 e Figura 3).

<table><tbody><tr><td>30G-aghi</td><td>Braun</td><td>456300</td><td></td></tr><tr><td>acepromazina</td><td>CP Pharma</td><td>Tranquisol P</td><td></td></tr><tr><td>BALB/c AnNCrl topi</td><td>Charles River. Germania</td><td>nessun numero</td><td></td></tr><tr><td>di catalogo Bepanthen unguento per gli occhi</td><td>Haus-Apotheke</td><td>PZN 01578675</td><td></td></tr><tr><td>Bonn Micro Forceps</td><td>FST</td><td>11083-07</td><td></td></tr><tr><td>Scatola per dispositivo di isolamento e alimentazione di ossigeno</td><td>RUSKINN</td><td>INVIV</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J&nbsp; topi</td><td>Charles River. Germania</td><td>nessun numero</td><td></td>di catalogo</tr><tr><td>Carprofen</td><td>Zoetis</td><td>Rimadyl 50 mg/ml</td><td></td></tr><tr><td>CATHETER-FEP 26G</td><td>TERUMO</td><td>Surflo-W</td><td></td></tr><tr><td>Clip Applicator Pinza Stile</td><td>FST</td><td>18057-14</td><td></td></tr><tr><td>Pinza curva</td><td>WPI</td><td>14114-G</td><td></td></tr><tr><td>custodiol/HTK</td><td>Dr. Franz K&ouml; hler Chemie</td><td>nessun numero</td><td></td>di catalogo</tr><tr><td>Cutasept disinfezione della pelle</td><td>VWR</td><td>BODL980365</td><td></td></tr><tr><td>penna elettrochirurgica</td><td>Bovie</td><td>CHANGE-A-TIP</td><td></td></tr><tr><td>garze, tamponi di cotone</td><td>Lohmann-Rauscher</td><td>13353</td><td></td></tr><tr><td>Tappetino riscaldante</td><td>THERMO MAT PRO 30W</td><td>HTP-30</td><td></td></tr><tr><td>Spugna emostatica</td><td>CuraSpon</td><td>J1276A</td><td></td></tr><tr><td>soluzione di eparina</td><td>Haus-Apotheke</td><td>PZN 03029820</td><td></td></tr><tr><td>Ghiacciaia</td><td>PETZ</td><td>No Numero di catalogo disponibile</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo per anestesia per inalazione</td><td>GROPPLER</td><td>BKGM 0616</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo di isolamento e alimentazione di ossigeno</td><td>RUSKINN</td><td>INVIV</td><td></td></tr><tr><td>isoflurane</td><td>CP Pharma</td><td>Isofluran CP 1 ml/ml</td><td></td></tr><tr><td>di ketamina</td><td>Zoetis</td><td>no catalog number</td><td></td></tr><tr><td>metamizole</td><td>WDT</td><td>no catalog numer</td><td></td></tr> Micro <tr><td>scissors</td><td>FST</td><td>15000-00,15000-10</td><td></td></tr><tr><td>Micro Serrefine ( Clamp ) Angolato / 16 mm</td><td>FST</td><td>18055-06</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio</td><td>Leica</td><td>LEICAMZ6</td><td></td></tr><tr><td>Lampada per microscopio</td><td>SCHOTT</td><td>KL2500LED</td><td></td></tr><tr><td>soluzione salina soluzione (NaCl 0,9%)</td><td>Haus-Apotheke</td><td>PZN 06178437</td><td></td></tr><tr><td>Forbici</td><td>Peha Instruments</td><td>991083/4</td><td></td></tr><tr><td>piccola capsula di Petri</td><td>Sarstedt</td><td>833900</td><td></td></tr><tr><td>Pinza dritta</td><td>WPI</td><td>14113-G</td><td></td></tr><tr><td>nastro chirurgico</td><td>BSN</td><td>4120</td><td></td></tr><tr><td>Pinza per sutura - 10 cm</td><td>FST</td><td>18025-10</td><td></td></tr><tr><td>Suture(10-0)</td><td>Medtronic</td><td>N2540</td><td></td></tr><tr><td>Suture(4-0)</td><td>ETHILON</td><td>V4940H</td><td></td></tr><tr><td>Suture(7-0)</td><td>ETHILON</td><td>1647H</td><td></td></tr><tr><td>Siringa (0,3 mL)</td><td>BD</td><td>324826</td><td></td></tr><tr><td>Siringa (1 mL)</td><td>BD</td><td>320801</td><td></td></tr><tr><td>xilazina</td><td>Bayer</td><td>Rompun</td><td></td></tr></tbody></table>

ricostruzione del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore di topo addominale

Blood Circuit Reconstruction in an Abdominal Mouse Heart Transplantation Model

La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi è un modello standard per la ricerca nell'immunologia dei trapianti. Qui viene presentata la tecnica stabilita per una ricostruzione modificata del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore addominale eterotopico. Questo metodo utilizza la vena cava inferiore intratoracica (IIVC) invece dell'arteria polmonare del cuore donatore per l'anastomosi alla vena cava inferiore del ricevente. Sta facilitando e migliorando i tassi di successo per il trapianto di cuore addominale nei topi.

Qui viene presentata una tecnica modificata di trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi che è stata precedentemente sviluppata nel nostro laboratorio e si è dimostrata utile negli ultimi 16 anni. In precedenza, è stato riferito che in generale 40 casi di vena cava a vena cava (gruppo V-V) rispetto a 40 casi della tradizionale arteria polmonare alla procedura di anastomosi vena cava (gruppo P-V)4 (Tabella 1) l'anastomosi del vaso ha preso 20,8±1,3 min nel gruppo V-V, che ...

Viene dimostrata una nuova tecnica per la ricostruzione del circuito sanguigno in un modello eterotopico di trapianto di cuore di topo addominale.

Ricostruzione del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore di topo addominale

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the ...

Il trapianto di cuore nel topo è un modello prezioso per studiare la risposta alloimmune Qui, introduciamo una nuova tecnica chirurgica di trapianto di cuore addominale eterotopico nel topo. Nel trapianto tradizionale di cuore di topo l'aorta donatrice e l'aorta addominale ricevente sono anastomosi. L'arteria polmonare è anastomosa alla vena cava inferiore ricevente.In questo nuovo trapianto di cuore di topo. L'aorta donatrice è anastomosa all'aorta addominale ricevente e la vena cava inferiore intratoracica donatrice è anastomosa alla vena cava inferiore ricevente. Ora iniziamo la dimostrazione sperimentale.Dopo aver messo il mouse in scatola per l'inalazione di isoflurane e l'anestesia, pesare il mouse. Secondo il peso del topo, per dare iniezione intraperitoneale di chetamina xiazina acepromacina per anestetizzare il topo. Fissare e disinfettare il mouse sul tavolo di funzionamento quando l'anestesia ha avuto effetto.Tagliare la pelle dal collo all'addome inferiore. Tagliare i muscoli della parete addominale e rimuovere delicatamente i visceri a sinistra. Quindi, esponi la vena cava inferiore.Iniettare lentamente 0,4 millilitri della soluzione di eparina nella vena cava inferiore e attendere un minuto prima di estrarre l'ago. Estrarre l'ago e tagliare sia la vena cava inferiore che l'aorta addominale con forbici per accelerare la dissanguamento. Aprire la cavità toracica eseguendo un taglio a forma di U.Esporre completamente il cuore, i polmoni e tutti i vasi sanguigni toracica. Esporre l'aorta toracica. Taglia metà del lume.Inserire il tubo di irrigazione nell'apertura dell'aorta toracica. Tagliare la vena polmonare per facilitare l'irrigazione e il drenaggio. Iniettare almeno due millimetri di soluzione HTK di quattro gradi.Il cuore smette completamente di battere fino a quando il deflusso della vena polmonare è completamente chiaro. Estrarre il tubo di irrigazione e staccare lo sterno. Rimuovere il timo.Spogliare leggermente il grasso intorno all'arco aortico. Esporre e ligarare il tronco di arteria pulmonalis con una sutura 10 zero. Separare il fatto e il tessuto connettivo attaccato alla vena cava inferiore intratoracica Esporre e legare la vena cava superiore con sette sutura zero e tagliarla dietro la legatura.Fai una sutura a sette zero intorno alla base del cuore sotto l'arco aortico. Vena cava inferiore e entrambi i padiglioni auricolari, quindi ligate i rami dell'arteria polmonare e i vasi polmonari venosi. Trasmetti l'arco aortico il più distale possibile, ma assicurati di avere un lume chiaro senza le aperture dei rami laterali.I vasi polmonari sotto la legatura e la vena cava inferiore intratoracica vicino al diaframma. Ora, togli il cuore dal petto. Posizionare il cuore del donatore esimpiantato in una soluzione HDK fredda a 4 gradi e conservare temporaneamente.Assicurati di non prolungare un tempo di ischemia fredda più di 60 minuti. Ora, iniziamo a dimostrare l'operazione del recettore. I passaggi iniziali dell'operazione sono simili a quelli precedentemente mostrati per il topo donatore, tra cui anestesia e sterilizzazione.Pelle addominale tagliata in modo trasversale. Dopo la dissezione intestinale, coprire gli organi addominali con una garza bagnata usando una soluzione salina. Esporre la vena cava inferiore e l'aorta addominale e liberarle dal tessuto adiposo circostante.Se necessario, ligate o elettrocauterizzare i vasi laterali sotto i vasi renali. Inserire le prime forcep micro emostatiche da destra nella parte superiore del cervello e aorta sotto i vasi renali. Inserire le seconde forcep micro emostatiche da destra nella parte inferiore del cervello e dell'aorta.Ci sono più di un centimetro sia per l'aorta che per lo spazio venale per l'anastomosi tra due forcep emostatiche. Fare un'incisione nell'aorta, un po 'più vicino al morsetto inferiore rispetto al morsetto superiore. Inoltre, puoi usare un ago 30G per fare un piccolo foro e aprirlo con micro forbici.Posizionare il cuore nella cavità addominale. L'aorta in vista e la vena cava dall'altra parte e coprirla con un piccolo cuscinetto di garza bagnato. Adattare e cucire l'aorta donatrice all'aorta ricevente, iniziando caudally.Fai un nodo e procedi con una sutura da corsa fino alla cima di questa incisione, da quattro a cinque punti. Successivamente, capovolgere il cuore verso destra, coprirlo di nuovo e continuare la sutura sul lato sinistro fino a raggiungere l'estremità caudale e annodarla. Utilizzare micro forbici per tagliare un foro rotondo sulla vena cava inferiore addominale del ricevente, che dovrebbe avere le stesse dimensioni della vena cava lumen inferiore intratoracica del donatore.L'incisione deve essere posizionata cranica all'anastomosi aortica pianificata. Rendere l'incisione vena più grande dell'incisione aortica. Sciacquare la vena cava inferiore intratoracica del donatore.Cucire la vena cava inferiore intratoracica donatrice alla vena cava ricevente iniziando caudally. Legare un nodo ed eseguire una sutura di corsa fino a raggiungere la parte superiore dell'incisione. Utilizzare cinque punti e continuare la sutura a sinistra.Infine, legare un nodo in un angolo di coda e stringere con cura. Fare attenzione a non tirare troppo stretto. Posare piccole parti della spugna emostatica intorno alla vena e anastomosi aortica.Rimuovere prima i morsetti micro emostatici inferiori e poi superiori e sciacquare la cavità addominale con cloruro di sodio caldo allo 0,9%. Porta via la spugna emostatica. Osservare il battito cardiaco del cuore trapiantato.Se tutto è corretto, il cuore inizierà a contrarsi di nuovo. Rimettere l'intestino nella cavità addominale e chiuderlo con quattro suture zero. Fornire un ambiente caldo e ricco di ossigeno per il recupero dei topi trapiantati.Nel nostro precedente lavoro di ricerca, abbiamo riferito di un confronto tra complessivamente 40 casi di vena cava e vena cava contro i 40 casi della tradizionale arteria polmonare alla procedura di anastomosi vena cava. Il tempo di funzionamento per l'anastomosi della nave in un gruppo vena cava-vena cava è stato significativamente più breve rispetto all'arteria polmonare convenzionale al gruppo vena cava. La tecnica chirurgica del trapianto di cuore addominale eterotopico nei topi rappresenta un modello standard per la ricerca nell'immunologia dei trapianti.Questa nuova tecnica per la ricostruzione del circuito sanguigno qui presentata sta facilitando il trapianto di cuore addominale nei topi. E questo è chiamato concomitante con ridotta ischemia calda e tempo di ribeating del cuore innestato, migliorando così il tasso di successo di questo modello.

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Il modello di topo eterotopica trapianto di cuore è stato provato da molti ricercatori ad essere un metodo importante per lo studio dei meccanismi di rifiuto e di risposta immunitaria. Tuttavia, i metodi impiegati sono ancora difficili. Modificando le tecniche standard che abbiamo avuto successo con più di 1000 trapianti.

Il trapianto cardiaco eterotopico nel Mice

Il modello murino di trapianto di cuore cervicale è adatto per immunologica nonché studi danno da ischemia riperfusione. Abbiamo modificato la procedura utilizzando una tecnica bracciale non sutura ed eseguito più di 1.000 trapianti di successo con questo approccio.  Qui, forniamo ulteriori dettagli di questa tecnica per integrare il video.

Murino cervicale Cuore trapianto Modello utilizzando una tecnica Cuff Modificato

È stata dimostrata una tecnica per la procedura microchirurgica per il trapianto eterotopico di cuori nei topi, compresi i metodi semplificati per il prelievo del donatore e l'anastomosi del vaso ricevente.

Un metodo modificato per eterotopica mouse Cuore Trapianto

Il manoscritto descrive i passaggi necessari per eseguire il trapianto di cuore eterotopico nel topo.

Murini eterotopica cuore Tecnica Trapianto

La tecnica della cuffia accorcia e facilita il modello di trapianto eterotopico di cuore cervicale nei topi, evitando anastomosi di sutura tecnicamente impegnative di piccoli vasi. I dettagli tecnici mostrati in questo video paper dovrebbero consentire ai ricercatori di stabilire questo modello nei loro laboratori.

Eterotopico cervicale trapianto cardiaco nei topi

Per studiare l'allotrapianto combinato di organi solidi e composito vascolarizzato, descriviamo un nuovo modello eterotopico di trapianto di parete toracica, timo e cuore nei topi utilizzando una tecnica di cuffia cervicale senza sutura.

A Novel microchirurgica modello per eterotopica, in blocco parete toracica, Timo, e trapianto cardiaco nei topi

Nel presente protocollo, un modello di trapianto di cuore di topo viene utilizzato per studiare il meccanismo di rigetto dell'allotrapianto cardiaco. In questo modello di trapianto di cuore eterotopico, l'efficienza operativa è migliorata e la sopravvivenza degli innesti cardiaci è assicurata da un'anastomosi cervicale end-to-end dell'impianto cardiaco utilizzando una tecnica di bracciale modificata.

Una tecnica di bracciale modificata per il modello di trapianto di cuore eterotopico cervicale del topo

I modelli di trapianto cardiaco murino rappresentano preziosi strumenti di ricerca per lo studio dell'immunologia dei trapianti. Il presente protocollo descrive il trapianto cardiaco cervicale eterotopico di topo che prevede il posizionamento di polsini sull'arteria carotide comune del ricevente e sul tronco dell'arteria polmonare del donatore per consentire il flusso sanguigno laminare.

Trapianto cardiaco cervicale eterotopico di topo utilizzando bracciali vascolari

Questo protocollo presenta una tecnica semplificata di anastomosi per suture end-to-side per il trapianto di cuore cervicale murino, fornendo un modello robusto e riproducibile per lo studio dell'immunologia dei trapianti.

Trapianto cardiaco eterotopico cervicale usando la tecnica dell'anastomosi end-to-side per studiare l'immunologia del trapianto

Vi presentiamo uno facile da stabilire revisione della classica due-bracciale tecnica di trapianto di fegato nel ratto.

Trapianto di fegato in ratti

Impara una nuova tecnica chirurgica per il trapianto cardiaco addominale eterotopico nel topo. Questo metodo ricostruisce il circuito sanguigno con anastomosi dell'aorta e della vena cava inferiore toracica, migliorando lo studio delle risposte alloimmunitarie.

Ricostruzione del circuito sanguigno in un modello di trapianto di cuore di topo addominale

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