Valutazione di un analizzatore di test point-of-care per la misurazione dei leucociti del sangue periferico
March 22nd, 2022
Un protocollo per misurare i leucociti del sangue periferico utilizzando un analizzatore di leucociti basato su scheda POCT è presentato qui. Gli stessi campioni di sangue sono stati testati da due analizzatori ematologici automatizzati per valutare la coerenza e l'accuratezza dei risultati. I risultati hanno mostrato che l'analizzatore valutato aveva una buona correlazione con il sistema di riferimento.
Una descrizione dettagliata del funzionamento standardizzato dell'analizzatore nel protocollo può aiutare una persona che non ha mai utilizzato l'analizzatore a completare gli esperimenti per lo più importanti, accurati e con risultati affidabili. L'utilizzo della tecnologia innovativa di Jove presenta vantaggi come la disponibilità di un kit di rilevamento per una sola persona, l'assenza di rifiuti liquidi, la velocità, la manutenzione ordinaria e il funzionamento intuitivo. Si dovrebbe prima comprendere il principio di rilevamento dell'analizzatore e quindi avere familiarità con diversi passaggi critici nel protocollo come la raccolta del sangue, il sollevamento dei reagenti e così via.
Per iniziare, avviare l'analizzatore spegnendo o accendendo l'interruttore sul retro dell'analizzatore e assicurarsi che la spia luminosa dell'analizzatore sia accesa. Inserisci nome utente e password nella finestra di dialogo di accesso e fai clic su login. Il sistema deve eseguire il controllo automatico e avviare automaticamente l'inizializzazione e visualizzare la pagina di analisi del campione.
Iniziare la preparazione del test facendo clic sul campione successivo, quindi inserire correttamente il sesso, il nome e altre informazioni cliniche e selezionare il gruppo di riferimento appropriato. Successivamente, fai clic su OK per salvare le informazioni. Strappare il film sottile del modulo di rilevamento delle cellule del sangue, premere il pulsante di uscita del magazzino di ingresso e posizionare correttamente il modulo di rilevamento delle cellule del sangue nel magazzino macchine, con il suo orifizio rivolto verso l'esterno.
Forare il film del soffitto del reagente emolitico con la punta di una pipetta quantitativa. Per la raccolta capillare del sangue, disinfettare l'anulare sinistro una volta con un batuffolo di cotone imbevuto di alcol in un modo. Dopo che l'alcol si asciuga naturalmente, usa una lancetta di sangue per perforare la pelle dell'anulare sinistro.
Spremere delicatamente la prima goccia di sangue e pulirla con un batuffolo di cotone. Spremere abbastanza sangue per formare una goccia d'acqua completa e raccogliere cinque microlitri del campione di sangue utilizzando il tubo capillare all'interno della pipetta quantitativa. Per la miscelazione del reagente, inserire la pipetta quantitativa nel reagente emolitico e premerla strettamente per rilasciare il campione di sangue dal tubo capillare.
Mescolare il sangue nel tubo capillare e nel reagente emolitico capovolgendolo da 15 a 20 volte a velocità costante fino a quando non rimane sangue rosso nel tubo capillare. Avviare l'analisi del campione aprendo il coperchio e spremendo la soluzione nel modulo di rilevamento delle cellule del sangue. Quindi, premere il pulsante di uscita dal magazzino di entrata.
Dopo che il modulo di rilevamento delle cellule del sangue entra nel magazzino, premere il pulsante di conteggio. Nell'interfaccia dell'analizzatore fare clic due volte sul pulsante OK per confermare che il modulo di rilevamento delle cellule del sangue è stato rimosso. Nell'interfaccia dell'analizzatore fare clic sul pulsante di stampa per stampare i risultati del test.
Per disattivare l'analizzatore, fare clic sul pulsante di spegnimento nell'interfaccia dell'analizzatore e selezionare Sì nella finestra di dialogo visualizzata sull'interfaccia. Verificare che il sistema inizi a eseguire la sequenza di arresto. Impostare l'interruttore off o in sul retro del mainframe su off dopo il completamento della sequenza di arresto.
La figura mostra il grafico a dispersione e l'analisi di correlazione Spearman dei sistemi valutati e di riferimento. La conta dei globuli bianchi e il numero di granulociti mostrano la correlazione più forte. Considerando che, il numero di linfociti mostra la correlazione più debole tra i sistemi valutati e di riferimento.
È stato ottenuto un grafico Bland-Altman per visualizzare l'analisi di coerenza. I risultati dei globuli bianchi rilevati dal sistema valutato concordano con il sistema di riferimento. I valori medi delle differenze negli indici leucocitari sono superiori a zero, indicando che i risultati dei test del sistema valutato sono leggermente superiori a quelli del sistema di riferimento.
Durante l'esperimento dovremmo fare del nostro meglio per assicurarci che il mandato di sangue che abbiamo raccolto sia esattamente di 5 microlitri e che il lato in camera sia completamente disciolto dal reagente emolitico.
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Panoramica
Questo articolo presenta un protocollo per misurare i leucociti del sangue periferico utilizzando un analizzatore di leucociti basato su una carta POCT. L'accuratezza e la coerenza di questo analizzatore sono state valutate rispetto a due analizzatori di ematologia automatizzati.
Componenti chiave dello studio
Area della scienza
- Ematologia
- Diagnostica clinica
- Test point-of-care
Contesto
- L'analisi dei leucociti è cruciale per la diagnosi di varie condizioni mediche.
- Gli analizzatori automatizzati forniscono risultati rapidi e accurati.
- I dispositivi POCT migliorano l'accessibilità e la comodità dei test.
- Comprendere il funzionamento di questi dispositivi è essenziale per ottenere risultati affidabili.
Obiettivo dello studio
- Valutare le prestazioni di un nuovo analizzatore di leucociti.
- Confrontare i risultati con analizzatori di ematologia automatizzati consolidati.
- Fornire un protocollo dettagliato per l'uso efficace dell'analizzatore.
Metodi utilizzati
- Funzionamento standardizzato dell'analizzatore di leucociti.
- Raccolta e preparazione del campione di sangue.
- Test dei campioni sia sul nuovo analizzatore che sugli analizzatori di riferimento.
- Analisi statistica per valutare la correlazione e l'accuratezza.
Principali risultati
- Il nuovo analizzatore ha dimostrato una buona correlazione con i sistemi di riferimento.
- I risultati sono stati coerenti tra diversi metodi di test.
- L'efficienza operativa è stata evidenziata come un vantaggio chiave.
- Le caratteristiche user-friendly hanno facilitato la facilità d'uso.
Conclusioni
- L'analizzatore di leucociti POCT è uno strumento affidabile per l'analisi del sangue.
- Offre significativi vantaggi in termini di velocità e facilità d'uso.
- Si raccomanda ulteriore validazione in ambienti clinici.
Domande frequenti
Executive Industry Relevance
Point-of-care leukocyte analyzers address critical gaps in primary healthcare diagnostics by providing rapid, accurate white blood cell differentiation without requiring centralized laboratory infrastructure. This capability supports early infection triage and antimicrobial stewardship in resource-limited settings, directly impacting preclinical biomarker validation workflows where correlative hematological changes inform disease model relevance. The demonstrated correlation with reference hematology analyzers establishes predictive confidence for translational applications in inflammatory disease models.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of leukocyte-mediated inflammatory pathways in disease models through quantifiable neutrophil, lymphocyte, and intermediate cell population shifts.
- Operational Value: Provides reproducible hematological readouts for target validation studies where immune cell infiltration serves as a pharmacodynamic biomarker.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Generates standardized leukocyte differential data essential for assay readiness screening of immunomodulatory compounds in whole blood systems.
- Operational Value: Eliminates liquid waste and complex sample preparation, enabling high-throughput screening compatibility with minimal technical expertise.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Supports disease-relevant system validation by correlating peripheral leukocyte dynamics with tissue-specific inflammatory endpoints in preclinical models.
- Operational Value: Facilitates longitudinal monitoring in preclinical studies through minimal blood volume requirements (5 µL capillary sampling) and rapid result generation.
Pipeline & Workflow Integration
The analyzer functions as a discovery-to-preclinical continuity tool, positioning leukocyte profiling between early target hypothesis testing and lead optimization phases where immune modulation represents a key mechanism of action.
- Discovery Biology: Supports mechanistic de-risking by quantifying immune cell responses to pathway modulators, reducing false positives in target validation cascades.
- Screening: Delivers quantitative, correlated leukocyte outputs (WBC, granulocytes, lymphocytes) that enable compound effect comparison across treatment groups.
- Analytics: Provides Spearman correlation-validated measurements (rs = 0.972 for WBC/granulocytes, rs = 0.851 for lymphocytes) ensuring reliable inter-system comparability for data-driven decision making.
- Translational Research: Connects discovery-phase leukocyte profiling to preclinical continuity through Bland-Altman-confirmed consistency with reference hematology systems.
- Enterprise Reuse: Represents a deployable capability across multiple therapeutic areas requiring immune monitoring, reducing redundant validation efforts.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Predictive confidence in leukocyte-mediated mechanism of action, reduction of mechanistic ambiguity in immunomodulator screening.
- Operational Value: Standardization through maintenance-free operation, reproducibility via 95% limits of agreement, and scalability through single-person detection kits.
- Strategic Value: Better go/no-go decisions in immunomodulator programs, capital efficiency by avoiding core lab dependencies, and reduced late-stage biological risk through early immune profiling.
- Portfolio Impact: Risk-adjusted prioritization of compounds based on leukocyte response profiles, enabling advancement decisions grounded in translatable hematological biomarkers.
Implementation Considerations
- Requires basic hematology knowledge for accurate interpretation of leukocyte differentials (neutrophils, lymphocytes, intermediate cells).
- Needs capillary blood collection training and quantitative pipette proficiency for precise 5 µL sample volume.
- Demands cross-team standardization of reference group selection (age/gender-adjusted norms) for consistent longitudinal tracking.
- Requires adaptation validation when extending beyond human whole blood to preclinical model systems (e.g., murine, non-human primate).
- Practical limitation: Lower lymphocyte correlation (rs = 0.851) necessitates orthogonal validation for lymphocytic-focused immunotherapies.
