Name: Trapianto di pelle murina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-01-16T10:34:00.000+00:00
Duration: 6 min 42 s
Description: Impara il trapianto di pelle murina tra ceppi BALB/c e C57BL/6 per studiare le risposte immunitarie allogeniche. Questo metodo standard valuta strategie di induzione della tolleranza nei trapianti.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIH Immunologia formazione di Grant T32 AI 60573 (KRG) e NIH concedere GM 41514 (MDC)

Prima dell&#39;inizio della sperimentazione: <ul><li> Ottenere l&#39;approvazione IACUC </li><li> Sterilizzare strumenti chirurgici e Q-tips </li></ul> I. Harvest tessuto del donatore <ol><li> Euthanize topo donatore (in conformità con SOP dell&#39;istituzione) </li><li> Capelli bagnati dalla base dell&#39;orecchio con l&#39;alcol </li><li> Harvest pelle donatore tagliando orecchio alla base </li><li> Tessuto posto in lamiera su ghiaccio </li><li> Orecchio Spalato: i lati pizzico ventrale e dorsale del tessuto alla base di orecchio con denti di topo forcipe; delicatamente separare tessuti; tessuto galleggiante dorsale, superficie interna verso il basso, in PBS su ghiaccio; scartare collagene lembo ventrale </li></ol> II. Preparare destinatari per trapianti <ol><li> Anestetizzare il mouse utilizzando la procedura approvata </li><li> Somministrare analgesici per il post-operatorio del dolore (cioè 0,05-0,1 mg / g ip Bupernex) </li><li> Del mouse posto in posizione laterale </li><li> Eseguire pizzico dito per assicurare animale è sufficientemente sedato </li><li> Capelli bagnati con l&#39;alcol e la barba torace </li><li> Pulire zona pulita con tampone imbevuto di alcool </li></ol> III. Trapianto di pelle <ol><li> Fare ~ 1 incisione cm: pelle tenda con denti di topo pinze e tagliare ~ 0,25-0,5 cm sotto forcipe </li><li> Togliere la pelle del donatore da PBS, posto in cima a letto innesto (con superficie interna della pelle dell&#39;orecchio di fronte letto innesto), e rimuovere l&#39;eccesso con PBS sterile Q-tip </li><li> Rifilare con cura il via l&#39;eccesso di pelle del donatore così che il trapianto è nettamente in letto innesto (assicurandosi che i bordi del trapianto non siano piegati sotto e che non sbornia innesto sulla pelle del tronco destinatario) </li><li> Destinatario avvolgere in bendaggio sterile (con la non-adesivo segmento garza posta sopra l&#39;innesto di pelle) </li><li> Assicurarsi che bendaggio non troppo stretto (valutare la respirazione animale) e che le armi sono liberamente mobili </li><li> Bendaggio sicuro con un unico 2-0 di sutura di seta </li><li> Luogo animale in gabbia pulita (sotto la lampada di riscaldamento fino a animale ha sufficientemente recuperato da anestesia) </li><li> Monitor destinatario 1-2/day per i segni di disagio e, se necessario somministrare analgesici per alleviare il dolore </li></ol> IV. Bendaggio di rimozione (6-7 giorni dopo il trapianto) <ol><li> Anestetizzare il mouse utilizzando la procedura approvata </li><li> Tagliare e rimuovere sutura di seta </li><li> Utilizzando le forbici senza punta, con attenzione tagliare bendaggio (facendo attenzione a non disturbare innesto) e rimuovere delicatamente </li><li> Ritorna mouse per gabbia pulita </li><li> Controllare innesto ~ 8 ore dopo la rimozione del bendaggio per i segni di formazione di croste o di contrazione. Se presente, innesto potrebbe non essere riuscito a vascolarizzano e dovrebbe essere considerato un guasto tecnico. </li><li> Monitorare giorno per segni di rifiuto (di solito definito come necrosi ~ 80% del tessuto del donatore) </li><li> Trapianti di pelle allogenico di solito rifiutano tra D8-12 post-op </li></ol> Suggerimenti utili V. <ol><li> La raccolta dei tessuti del donatore vicino alla base dell&#39;orecchio saranno: 1) massimizzare la dimensione dell&#39;innesto, e 2) forniscono una sporgenza irregolare ventrale che faciliterà la suddivisione </li><li> Usare sempre una nuova lama di rasoio per radersi destinatario </li><li> Se analgesico deve essere dato ip, somministrare prima del trapianto procedura per ridurre al minimo la gestione post-op (ridurre al minimo la possibilità di interrompere il trapianto) </li><li> Se possibile, rimuovere i guanti prima di applicare la benda. Guanti tendono ad attaccare la benda e complicare l&#39;applicazione </li><li> Esecuzione di una sutura singola, alla fine bendaggio minimizzare prematura rimozione </li><li> Avvolgere bendaggio stretto quanto consentito e valutare la respirazione Prima di immettere sutura. Se la fasciatura è troppo stretta, animale smettere di respirare. Se la fasciatura è troppo lenta, animale rimuoverlo. </li></ol>

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

Come dimostrato in questo video-articolo, il modello di trapianto di pelle è un metodo rapido e semplice per monitorare le risposte delle cellule T allogeniche. Trapianto allogenico pelle ha una vasta gamma di applicazioni ed è stato utilizzato per il test di efficienza di una varietà di agenti immunosoppressivi e protocolli di induzione della tolleranza, come pure per studiare gli effetti biologici dei vari anticorpi di blocco.

<table><tbody><tr><td>Pinzette da microdissezione (curve)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4142</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette a denti di ratto (1x2 denti, dritte)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11053-10</td><td>n=2</td></tr><tr><td>Forbici da strabismo (punta smussata)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14074-11</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette da iridectomia (curve)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>Forbici a molla (angolate)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15006-09</td><td></td></tr><tr><td>Portaaculeo micro Halsey</td><td>Fine Science Tools</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>Piastre da 10 cm</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Cellgro</td><td>21-040-CV</td><td></td></tr><tr><td>Bupernex (cloridrato di buprenorfina)</td><td>Reckitt Benckiser</td><td>517201</td><td></td></tr><tr><td>Siringhe per insulina (29 Ga)</td><td>Monoject</td><td>8881 600145</td><td></td></tr><tr><td>Q-tips</td><td>Solon Manufacturing Company</td><td>362</td><td></td></tr><tr><td>Lame da rasoio a bordo singolo (#9)</td><td>Smith &amp;amp; Nephew Inc.</td><td>67-0238</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgica in seta (2-0; PS-2)</td><td>Ethicon Inc.</td><td>583H</td><td></td></tr></tbody></table>

trapianto di pelle murina

Murine Skin Transplantation

Come uno dei modelli più rigorosi e meno tecnicamente impegnativo, il trapianto di pelle è un metodo standard per le risposte T test della cellula ospite per diversi antigeni MHC-donatore. Lo scopo di questo video-articolo è di fornire allo spettatore con uno step-by-step dimostrazione visiva del trapianto di cute utilizzando il modello murino. Il protocollo è suddiviso in 5 componenti principali: 1) donatore pelle raccolta; 2) la preparazione del destinatario per il trapianto; 3) trapianto di pelle, 4) la rimozione bendaggio e il rigetto del trapianto di monitoraggio; 5) utili suggerimenti. Una volta esperti, la stessa procedura dovrebbe prendere &lt;10 minuti per eseguire.

Trapianto allogenico pelle è un modello standard per le risposte T test della cellula ospite per diversi antigeni MHC-donatore. Questo video-articolo fornisce un tutorial visivo di ogni passo coinvolti in esecuzione di un trapianto di BALB/c--&gt; C57BL / 6 della pelle.

Trapianto di pelle murina

In quanto uno dei modelli più rigorosi e meno impegnativi dal punto di vista tecnico, il trapianto di pelle è un metodo standard per saggiate le risposte delle cellule T dell'ospite a...

Benvenuti nel laboratorio del Dottor Michael Kalen. Sono Kim Gard. Oggi dimostreremo un modello di trapianto cutaneo che utilizza la combinazione di ceppi allogenici BC e black six, uno dei modelli più rigorosi e meno complessi tecnicamente per lo studio del rigetto del trapianto di tessuto.Il trapianto di pelle è una tecnica standard utilizzata per saggiare le risposte allogeniche ed è comunemente impiegata per valutare l'efficacia di diverse strategie di induzione della tolleranza. Cominciamo dunque. Questa procedura inizia con il prelievo della pelle dal nostro mouse donatore BAB.Prima eutanasia il donatore in conformità con la procedura operativa standard del comitato per il benessere degli animali (Iacuc). Ora inumidisca i peli alla base con alcol, prelevi la pelle rimuovendo l'orecchio il più vicino possibile alla base e lo collochi sul ghiaccio. Successivamente, divida ogni disco auricolare scartando la lamina ventrale collagena e lasci galleggiare il tessuto sul ghiaccio.Ora la pelle del donatore è pronta per il trapianto. La procedura di trapianto inizia anestetizzando l'animale ricevente mediante procedure approvate. Una volta che il ricevente è sufficientemente anestetiz

Research

Ricerca

JoVE Journal

Biology

Biologia

In questo rapporto, descriviamo tridimensionale pelle ricostruire modello che imita la pelle umana in architettura e composizione. Fisiologia melanociti, la progressione del melanoma e il destino delle cellule staminali cutanee sono state studiate utilizzando il modello di ricostruire la pelle. Il modello è anche utile come strumento di pre-clinici per la valutazione dei farmaci.

Tridimensionale pelle umana Ricostruire Modello: uno strumento per studiare la pelle normale e progressione Melanoma

Tessuto-specifica analisi di un modello di rigenerazione del follicolo usando lentivirus mediare guadagno o perdita di funzione.

Rapida analisi genetica di epitelio-mesenchimale segnalazione durante la rigenerazione dei capelli

Questo video mostra un metodo per innestare pelle umana su un topo immunodeficiente con una risposta neutrofila soppressa. Il metodo prevede l'applicazione di pelle umana a spessore diviso sul letto di innesto del topo, sigillandolo e coprendolo per il recupero. Alla fine, la pelle umana aderisce alla pelle del topo, stabilendo la vascolarizzazione e la circolazione, con conseguente xenotrapianto cutaneo di successo.

Una tecnica per l'innesto di pelle umana in un modello murino

Neisseria meningitidis è un agente patogeno specifico umano che infetta i vasi sanguigni. In questo protocollo microvasi umani vengono introdotti in un topo da innesto di pelle umana su topi immunocompromessi. I batteri aderiscono ampiamente ai vasi umani, con conseguente danno vascolare e lo sviluppo del rash purpurica tipicamente osservato in casi umani.

Umanizzato mouse modello per studiare le infezioni batteriche Targeting il microcircolo

Il trapianto di pelle di coda è un potente modello per studiare il rigetto dipendente dalle cellule T e l'induzione della tolleranza durante le risposte immunitarie allogeniche nei topi. I vantaggi di questo protocollo sono la chirurgia invasiva minore e la facilità di monitoraggio senza la necessità di sacrificare il topo ricevente.

Il trapianto di coda della pelle per studiare allogenico di cellule T CD4 risposte in topi

Questo nuovo modello per il trapianto degli arti posteriori ortotopico nel topo, applicando una tecnica bracciale non sutura per anastomosi super-microvascolare, fornisce un potente strumento per la ricerca in vivo meccanicistica immunologica relative al allotrapianto composito vascolarizzato (VCA).

Ortotopico degli arti posteriori del trapianto di mouse

Murino di trapianto a tutto spessore della pelle è un modello consolidato per studiare il rifiuto in un ambiente alloimmune. Qui, mettiamo a disposizione un tutorial di ogni passo coinvolti in esecuzione di un BALB / c -&gt; C57BL / 6 a tutto spessore trapianto di pelle.

Murine tutto spessore trapianto della pelle

Vi proponiamo un protocollo che Mostra come differenziare i cheratinociti derivati da cellule staminali pluripotenti indotte e fibroblasti e generare un organoid pelle 3D, utilizzando questi cheratinociti e fibroblasti. Questo protocollo contiene un ulteriore passaggio di generazione di un modello di topi umanizzati. La tecnica presentata qui miglioreranno ricerca dermatologica.

Generazione di pelle 3D Organoid dal cordone emoderivati indotta da cellule staminali pluripotenti indotte

Lo scopo di questo studio era quello di sviluppare un modello murino di guarigione delle ferite da ustione. Un'ustione termica è stata indotta sulla pelle dorsale dei topi utilizzando un modello di ottone preriscaldato. Il tessuto bruciato è stato disretto e sovrapposto con un innesto cutaneo raccolto dalla coda di un topo donatore geneticamente simile.

Un modello Murine di una ferita da ustione ricostruita con un innesto di pelle allogenica

Il presente protocollo descrive come innestare la pelle umana su topi del recettore della catena gamma (NSG) diabetici non obesi (NOD)-scid. Una descrizione dettagliata della preparazione della pelle umana per il trapianto, la preparazione di topi per il trapianto, il trapianto di pelle umana a spessore diviso e la procedura di recupero post-trapianto sono inclusi nella relazione.

Modello cutaneo di xenotrapianto per manipolare le risposte immunitarie umane in vivo

Presentiamo un modello murino riproducibile di allotrapianto composito vascolarizzato eterotopo da arto posteriore a collo. Questo protocollo supermicrochirurgico, che prevede anastomosi vasali da 0,3-0,5 mm, integra la guida del filamento di nylon e la cuffia venosa. Fornisce una piattaforma affidabile per studi traslazionali su tolleranza, lesioni ischemiche-reperfusione e meccanismi immunologici nell'allotrapiante composito vascolarizato.

Trapianto eterotopico da arto posteriore a collo nel topo: un modello supermicrochirurgico di allotrapianto composito vascolarizzato

Impara il trapianto di pelle murina tra ceppi BALB/c e C57BL/6 per studiare le risposte immunitarie allogeniche. Questo metodo standard valuta strategie di induzione della tolleranza nei trapianti.

Trapianto di pelle murina

Esplora altri video