Generazione e caratterizzazione dell'infarto miocardico ventricolare destro indotto dalla legatura permanente dell'arteria coronaria destra nei topi

Il ventricolo destro è più resistente all'ischemia rispetto a quello sinistro. Abbiamo introdotto una tecnica per generare un modello di infezione ventricolare destra, che può chiarire il meccanismo fisiopatologico durante lo sviluppo di un infarto ventricolare destro. Abbiamo individuato l'arteria coronaria destra attraverso il costo vascolare e definito l'area di legatura che è fondamentale per generare con successo un modello di infarto ventricolare destro del topo.

A dimostrare la procedura sarà Linhai Ruo, un poster doctor del mio laboratorio. Posizionare il mouse supino su un pad e garantire la profondità dell'anestesia dall'assenza di una risposta di astinenza da punta. Fissare i suoi incisivi con una sutura e immobilizzare gli arti con nastro adesivo.

Rimuovere i peli dal collo allo xifoide con una crema depilatoria. Estrarre leggermente la lingua con una pinzetta, sollevare la mandibola con un depressore della lingua per esporre la glottide. Ed eseguire l'intubazione intra tracheale inserendo una cannula di calibro 22 nella glottide.

Collegare correttamente gli elettrodi per elettrocardiografia agli arti del topo e registrare l'ECG. Per aprire il torace, fare un'incisione lunga un centimetro nella pelle, parallela alla terza costola destra con forbici oftalmiche. Determinare nuovamente il terzo spazio intercostale e garantire uno spazio adeguato in base all'angolo dello sterno.

Separare e tagliare i muscoli pettorali maggiori e pettorali minori con forbici e micro pinze sopra il terzo spazio intercostale. Successivamente, separare senza mezzi termini il muscolo intercostale con una pinza del gomito per esporre il campo chirurgico, quindi incidere il pericardio. Sollevare l'atrio destro con cotone sterile e legare l'arteria coronaria destra con un 8-0 sterile filo di nylon, con un intervallo di legatura da tre a cinque millimetri.

Dopo aver legato l'arteria coronaria destra, notare il monitoraggio ECG piombo 3, che mostra l'elevazione del segmento ST. Rimuovere il cotone e suturare i muscoli e la pelle con un filo di nylon sterile 5-0. Quindi posizionare il mouse sulla piastra riscaldante per favorire il recupero.

Posizionare il mouse in posizione supina su una piattaforma ad ultrasuoni per la fissazione degli animali e il funzionamento ad ultrasuoni. Fissare i suoi artigli all'elettrodo per ottenere una registrazione ECG, attraverso un sistema collegato alla macchina ad ultrasuoni. Rimuovere i capelli dal petto del topo con una crema depilatoria e applicare il gel ad ultrasuoni sulla pelle del torace.

Impostare la piattaforma in posizione orizzontale. Orientare il trasduttore parallelamente alla gamba sinistra e ottenere l'immagine dell'asse lungo ventricolare sinistro. Ruotare la sonda di 90 gradi in senso orario per ottenere la vista di accesso breve del ventricolo sinistro.

Premere il pulsante cine store per salvare le immagini. Inclina la parte superiore sinistra della piattaforma nel punto più basso. Spostarsi verso il basso verticalmente del trasduttore, mantenendo la sua posizione sopra l'addome superiore e sotto il diaframma del mouse in modalità B.

Regola leggermente la posizione della piattaforma ruotando gli assi X e Y fino a quando sullo schermo non vengono visualizzati il ventricolo destro, l'atrio destro, l'atrio sinistro e il ventricolo sinistro. E salva l'immagine premendo il cine store o il pulsante frame. Premere M-Mode.

Dopo che appare la linea di indicatori a due X, individuare la linea dell'indicatore in corrispondenza dell'orifizio della valvola tricuspide, per ottenere il movimento del piano annuale tricuspide. Premere di nuovo M-Mode. Premere il pulsante cine store o frame store per salvare dati e immagini.

Inclina il lato sinistro della piattaforma nel punto più basso. Posizionare la sonda con un angolo di 30 gradi rispetto all'asse orizzontale lungo la linea ascellare anteriore destra. Ruotare gli assi X e Y della piattaforma per visualizzare il ventricolo destro.

Premere il pulsante M-Mode e individuare la linea dell'indicatore nel punto iperecoico del setto, per ottenere l'immagine M-Mode dell'interfaccia del ventricolo destro. Premere nuovamente il pulsante M-Mode. Premere il pulsante cine store per salvare l'immagine.

Eseguire l'intubazione tracheale e impostare il parametro del ventilatore animale. Fai un'incisione bilaterale di un centimetro sulla pelle sopra il processo xifoide e trasetti il diaframma e la costola con forbici oftalmiche per esporre il cuore. Forare la parete libera ventricolare destra con un ago calibro 32.

Rimuovere l'ago e premere la ferita con il cotone per sanguinare. Inserire la punta del catetere nel ventricolo destro attraverso il sito di puntura e spingere il catetere in avanti, lentamente. Regolare la posizione della punta per ottenere una tipica forma d'onda di pressione RV, mostrata su un monitor e un sistema di registrazione.

Dopo 10 minuti di stabilizzazione, registrare i dati della pressione arteriosa sistolica RV, RV e pressione diastolica e RV massima pressione ventricolare destra aumentando la velocità decrescente. Fare clic sul pulsante di selezione per selezionare i cicli cardiaci per il calcolo. E quindi fare clic sul pulsante analizzato per calcolare i valori medi dei cicli selezionati.

Posizionare l'animale supino sul pad e intubare per la ventilazione artificiale. Aprire il torace con le forbici chirurgiche ed esporre il cuore. Fai una tacca di tre millimetri con forbici oftalmiche sugli atri giusti e perfondi il cuore con 5 ml di soluzione salina normale attraverso l'apice cardiaco con un iniettore.

Blocca il sangue dall'aorta con un morsetto aortico. E perfondere 0,1 ml di 1 mg / mL di nitroglicerina, attraverso l'apice cardiaco con un iniettore per dilatare l'arteria coronaria. Perfondere il cuore con un reagente da 1 ml attraverso l'apice cardiaco e attendere due o tre ore.

Erodere il cuore con idrossido di sodio al 50% per due o tre giorni. E rimuovere il tessuto muscolare o il tessuto connettivo risciacquando con soluzione salina normale. Dopo la legatura RCA, l'elevazione del segmento ST è stata osservata nel piombo 3 dell'ECG.

La colorazione cloridistica 2, 3, 5-trifeniltetrazolio ha mostrato che l'area dell'infarto rappresenta il 45% della parete libera da camper, 24 ore dopo l'intervento. L'ecocardiografia ha mostrato che la dimensione interna del RV alla fine della diastole, aumentava nella RV1. Ed è stato più di due volte nel gruppo Sham.

L'accorciamento della frazione RV, la frazione di eiezione RV e l'escursione sistolica del piano anulare tricuspide erano significativamente più piccoli nel RVI. Il rapporto tra area RV per LV è aumentato di circa il 50% La misurazione emodinamica RV ha mostrato che nel gruppo RVI, la pressione arteriosa sistolica ventricolare destra, il tasso di aumento massimo e minimo della pressione RV, la contrattilità RV, erano significativamente più piccoli. La pressione ventricolare e diastolica destra e la costante di tempo esponenziale dell'indice di rilassamento RV erano considerevolmente più significative di quelle del gruppo Sham.

Un aneurisma RV era visibile nell'area infartuata. Il rapporto peso cardiaco/peso corporeo e il rapporto peso cuore/lunghezza tibia nel gruppo RVI erano leggermente più grandi. La colorazione di Masson ha indicato una fibrosi significativa nella parete libera da camper.

E raramente, la fibrosi si è verificata nel setto del gruppo RVI. Al contrario, alcuni cardiomiociti sopravvissuti erano nell'area dell'infarto. È fondamentale esporre l'area di legatura e afferrare la profondità dell'ago inserito e la portata per aumentare il successo e i tassi di sopravvivenza.