Name: Somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici derivati dallintestino in topi che si muovono liberamente (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-02T14:15:00.000+00:00
Duration: 7 min 49 s
Description: Scopri la somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici intestinali in topi liberi. Questo metodo validato permette di studiare l'asse intestino-cervello e le sue implicazioni comportamentali.

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Riconosciamo il personale del Laboratory Animal Center della National Cheng Kung University (NCKU) per la cura degli animali. Questo lavoro è stato sostenuto dalla borsa di studio del Prof. Kun-Yen Huang Education Fund della CHENG-HSING Medical Foundation a C.-W.L.; i fondi del Ministero della Scienza e della Tecnologia (MOST) di Taiwan: (Ricerca universitaria MOST 109-2813-C-006-095-B) a T.-H.Y.; (MOST 107-2320-B-006-072-MY3; 109-2314-B-006-046; 110-2314-B-006-114; 110-2320-B-006-018-MY3) a W.-L.W.; e l'Higher Education Sprout Project, Ministero della Pubblica Istruzione alla sede dell'avanzamento universitario presso NCKU a W.-L.W.

Gli autori non hanno conflitti di interesse relativi a questo lavoro.

I metaboliti derivati dall'intestino sono stati associati a malattie mediate dal cervello senza un meccanismo molto preciso, in parte a causa dei loro molteplici siti di legame nel corpo 6,12,24. Rapporti precedenti hanno indicato che gli SCFA potrebbero servire come ligandi per i recettori accoppiati alle proteine G, regolatori epigenetici e fonti per la produzione di energia in più siti nel corpo 6...

Il tratto gastrointestinale umano ospita diversi microrganismi che colpiscono l'ospite 1,2,3. Questi batteri intestinali possono secernere metaboliti derivati dall'intestino durante il loro utilizzo di componenti dietetici consumati dall'ospite 4,5. È interessante notare che i metaboliti intestinali non metabolizzati nella periferia possono essere trasportati ad altri organi attraverso la circolazione6. Da notare, questi metaboliti secreti possono servire come mediatori per l'asse intestino-cervello, definito come la comunicazione bidirezionale tra il sistema nervoso centrale e l'intestino7. Studi precedenti hanno dimostrato che i metaboliti derivati dall'intestino possono modulare il comportamento complesso e le emozioni negli animali 8,9,10,11.
Gli acidi grassi a catena corta (SCFA) sono i principali metaboliti prodotti dal microbiota intestinale durante la fermentazione della fibra alimentare e dei carboidrati indigeribili6. Acetato, propionato e butirrato sono gli SCFA più abbondanti nell'intestino12. Gli SCFA servono come fonte di energia per le cellule del tratto gastrointestinale. Gli SCFA non metabolizzati nell'intestino possono essere trasportati al cervello attraverso la vena porta, modulando così il cervello e il comportamento 6,12. Studi precedenti hanno suggerito che gli SCFA potrebbero svolgere un ruolo critico nei disturbi neuropsichiatrici 6,12. Ad esempio, l'iniezione intraperitoneale di butirrato nei topi BTBR T + Itpr3tf / J (BTBR), un modello animale di disturbo dello spettro autistico (ASD), ha salvato i loro deficit sociali13. I ratti trattati con antibiotici che ricevevano microbiota da soggetti depressivi hanno mostrato un aumento dei comportamenti ansiosi e degli SCFA fecali14. Clinicamente, sono state osservate alterazioni dei livelli di SCFA fecale nelle persone con ASD rispetto ai controlli tipicamente in via di sviluppo15,16. Le persone con depressione hanno livelli di SCFA fecali più bassi rispetto ai soggetti sani17,18. Questi studi hanno suggerito che gli SCFA possono alterare il comportamento negli animali e negli esseri umani attraverso vari percorsi.
I metaboliti microbici esercitano diversi effetti su più siti nel corpo, influenzando la fisiologia e i comportamenti dell'ospite 4,19, tra cui il tratto gastrointestinale, il nervo vago e il nervo simpatico. È difficile individuare il ruolo preciso dei metaboliti derivati dall'intestino nel cervello quando si somministrano i metaboliti per vie periferiche. Questo articolo presenta un protocollo basato su video per studiare gli effetti dei metaboliti derivati dall'intestino nel cervello di un topo che si muove liberamente (Figura 1). Abbiamo dimostrato che gli SCFA potrebbero essere somministrati acutamente attraverso la cannula guida durante i test comportamentali. Il tipo, il volume e la velocità di infusione dei metaboliti possono essere modificati a seconda dello scopo. Il sito di incannulizzazione può essere regolato per esplorare l'impatto dei metaboliti intestinali in una specifica regione del cervello. Miriamo a fornire agli scienziati un metodo per esplorare il potenziale impatto dei metaboliti microbici derivati dall'intestino sul cervello e sul comportamento.

<table><tbody><tr><td>Materiale</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Advil Liqui-Gels Ibuprofene solubilizzato A2:D41</td><td>Pfizer</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 asino anti-coniglio</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A-21206</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fluorescent Gold (coniglio policlonale)</td><td>Millipore</td><td>AB153-I</td><td></td></tr><tr><td>Filtro sottovuoto per bottiglie, 500 mL, 0,22 &mu; m, PES, nido sterile</td><td></td><td>121921LA01</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C1016</td><td>ACSF: 0,14 g/L</td></tr><tr><td>di scrub alla clorexidina 2%</td><td>Phoenix</td><td>NDC 57319-611-09</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di clorexidina</td><td>Phoenix</td><td>NDC 57319-599-09</td><td></td></tr><tr><td>Manichino commerciale</td><td>RWD Life Science</td><td>62004</td><td>Single_OD 0,20 mm/ M3,5/G = 0,5 mm</td></tr><tr><td>Cannul guida commerciale</td><td>RWD Life Science</td><td>62104</td><td>Single_OD 0,41 mm-27G/ M3,5/C = 2,5 mm&nbsp;</td></tr><tr><td>Iniettore commerciale</td><td>RWD Life Science</td><td>62204</td><td>Single_OD 0,21 mm-33G/ Si accoppia con M3,5/C = 3,5 mm/G = 0,5 mm</td></tr><tr><td>D-(+)-Glucosio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8270</td><td>ACSF: 0,61 g/L</td></tr><tr><td>Acrilico dentale</td><td>HYGENIC</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Viti di fissaggio</td><td>RWD Life Science</td><td>62521</td><td></td></tr><tr><td>Mezzo di montaggio Fluoroshield con DAPI</td><td>Abcam</td><td>AB104139</td><td></td></tr><tr><td>Siero di cavallo</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>16050130</td><td></td></tr><tr><td>Siringhe da insulina</td><td>BBraun</td><td>XG-LBB-9151133S-1BX</td><td>1 mL</td></tr><tr><td>di isoflurano&nbsp;</td><td>Panion & BF biotech</td><td>DG-4900-250D</td><td></td></tr><tr><td>KCl&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3911</td><td>ACSF: 0,19 g/L</td></tr> di <tr><td>ketoprofene</td><td>Swiss Pharmaceutical</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Lidocaina&nbsp;</td><td>AstraZeneca</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Basso punto di fusione agarosio</td><td>Invitrogen</td><td>16520</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M8266</td><td>ACSF: 0,19 g/L</td></tr><tr><td>Vetrini coprimicroscopio</td><td>MARIENFELD</td><td>101242</td><td></td></tr><tr><td>Vetrini per microscopio</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4951PLUS-001E</td><td></td></tr><tr><td>Olio minerale leggero, bianco NF</td><td>Macron Fine Chemicals</td><td>MA-6358-04</td><td></td></tr><tr><td>NaCl&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td>ACSF: 7,46 g/L</td></tr><tr><td>NaH2PO4&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8282</td><td>ACSF: 0,18 g/L</td></tr><tr><td>NaHCO3&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S5761</td><td>ACSF: 1,76 g/L</td></tr><tr><td>di adesivo n-butil cianoacrilato (colla adesiva tissutale)</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td>3M Vetbond</td></tr><tr><td>Neural tracer&nbsp;</td><td>Santa Cruz</td><td>SC-358883</td><td>FluoroGold</td></tr><tr><td>Paraformaldeide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148</td><td></td></tr><tr><td>Tubo in polietilene</td><td>RWD Life Science</td><td>62329</td><td>OD 1.50, ID 0.50 mm e OD 1.09, ID 0.38 mm</td></tr><tr><td>Puralube Vet (occhio) Unguento</td><td>Dechra&nbsp;</td><td></td><td></td>12920060</tr><tr><td>Acetato di sodio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2889</td><td>SCFA: 13,5 mM</td></tr><tr><td>di azoturo di sodio&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2002</td><td></td></tr><tr><td>Butirrato di sodio&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B5887</td><td>SCFA: 8 mM</td></tr><tr><td>di propionato di sodio&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1880</td><td>SCFA: 5,18 mM</td></tr><tr><td>Cannula guida in acciaio inossidabile</td><td>Chun Ta impresa CO., LTD.</td><td>n/a</td><td>OD 0,63 mm; Fornitore locale</td></tr><tr><td>Iniettore in acciaio inossidabile</td><td>Chun Ta impresa in acciaio inossidabile CO., LTD.</td><td>n/a</td><td>OD 0,3 mm; il manichino è ricavato dall'iniettore; fornitore locale</td></tr><tr><td>Supercolla</td><td>Krazy Glue</td><td>KG94548R</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Merck</td><td>1.08603.1000</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Supporto per cannula</td><td>RWD Life Science</td><td>B485-68217</td><td></td></tr><tr><td>Telecamera da soffitto</td><td>FOSCAM</td><td>R2</td><td></td></tr><tr><td>Strumenti stereotassici digitali</td><td>Stoelting</td><td>51730D</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio da dissezione</td><td>INNOVIEW</td><td>SEM-HT/TW</td><td></td></tr><tr><td>Sterilizzatore di perline di vetro</td><td>RWD Life Science</td><td>RS1501</td><td></td></tr><tr><td>Pad riscaldante</td><td>Stoelting</td><td>53800M</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio Leica&nbsp;</td><td>Leica</td><td>DM2500</td><td></td></tr><tr><td>Pinza per microdissezione</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5136</td><td>seghettata, curva leggera; Extra delicato; Larghezza della punta di 0,5 mm; Lunghezza 4"</td></tr><tr><td>Forbici per microdissezione</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5918</td> Controller per microiniezione <td>affilato angolato da 4,5"</td></tr><tr><td></td><td>World Precision Instruments (WPI)</td><td>MICRO2T</td><td>Controller SMARTouch</td></tr><tr><td>Pompa a siringa per microiniezione</td><td>World Precision Instruments (WPI)</td><td>UMP3T-1</td><td>UltraMicroPump3&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Siringa da microlitri</td><td>Hamilton</td><td>80014</td><td>10 &micro; L</td></tr><tr><td>Fibra ottica Luce fredda con doppia fibra Step</td><td></td><td>LGY-150</td><td>Fornitore locale</td></tr><tr><td>Tagliabordi per animali domestici</td><td>WAHL</td><td>09962-2018</td><td></td></tr><tr><td>Vaporizzatore per isoflurano</td><td>Step</td><td>AS-01</td><td>Fornitore locale</td></tr><tr><td>Vibratome</td><td>Leica</td><td>VT1000S</td><td></td></tr><tr><td>Software</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Video sul comportamento animale software di tracciamento</td><td>Noldus</td><td>EthoVision</td><td>Versione: 15.0.1416</td></tr><tr><td>Leica Application Suite X software</td><td>Leica</td><td>LASX</td><td>Versione: 3.7.2.22383</td></tr></tbody></table>

somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici derivati dall'intestino in topi che si muovono liberamente

Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice

L'impatto del microbiota intestinale e dei suoi metaboliti sulla fisiologia e sul comportamento dell'ospite è stato ampiamente studiato in questo decennio. Numerosi studi hanno rivelato che i metaboliti derivati dal microbiota intestinale modulano le funzioni fisiologiche mediate dal cervello attraverso intricati percorsi intestino-cervello nell'ospite. Gli acidi grassi a catena corta (SCFA) sono i principali metaboliti derivati dai batteri prodotti durante la fermentazione delle fibre alimentari dal microbioma intestinale. Gli SCFA secreti dall'intestino possono agire in più siti nella periferia, influenzando le risposte immunitarie, endocrine e neurali a causa della vasta distribuzione dei recettori SCFA. Pertanto, è difficile differenziare gli effetti centrali e periferici degli SCFA attraverso la somministrazione orale e intraperitoneale di SCFA. Questo articolo presenta un metodo basato su video per interrogare il ruolo funzionale degli SCFA nel cervello tramite una cannula guida in topi che si muovono liberamente. La quantità e il tipo di SCFA nel cervello possono essere regolati controllando il volume e la velocità di infusione. Questo metodo può fornire agli scienziati un modo per apprezzare il ruolo dei metaboliti derivati dall'intestino nel cervello.

Il topo è stato infuso con SCFA 1 settimana dopo il recupero dall'impianto della cannula guida per valutare l'attività locomotoria in una nuova gabbia. Il topo è stato posto in una nuova gabbia e infuso con 2.100 nL di SCFA o ACSF nei primi 5 minuti (velocità di consegna di 7 nL / s) nel cervello attraverso la cannula guida commerciale impiantata nel ventricolo laterale del cervello. L'attività locomotoria in una nuova gabbia è stata registrata per altri 30 minuti dopo l'infusione. Nessuna differenza è stata osservata ne...

I metaboliti microbici derivati dall'intestino hanno effetti sfaccettati che portano a comportamenti complessi negli animali. Miriamo a fornire un metodo passo-passo per delineare gli effetti dei metaboliti microbici derivati dall'intestino nel cervello attraverso la somministrazione intracerebroventricolare tramite una cannula guida.

Somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici derivati dall'intestino in topi che si muovono liberamente

The impact of gut microbiota and their metabolites on host physiology and behavior has been extensively investigated in this decade. Numerous studies have ...

I metaboliti rilasciati dal microbiota intestinale producono effetti complessi sull'ospite. Questo protocollo presenta un metodo per interrogare il ruolo dei metaboliti intestinali nel cervello e nel comportamento del topo. Questa tecnica fornisce un metodo preciso, meticoloso e convalidato per fornire metaboliti intestinali in un cervello in topi che si muovono liberamente.Forniamo una metodologia completa e fisiologica migliore per la comprensione della ricerca sull'asse del cervello intestinale. Posizionare il mouse sul telaio stereotassico e fissare gli incisivi del mouse sulla barra incisiva nel supporto dell'incisivo stereotassico. Coprire il naso con la maschera del cono del naso.Quindi valutare la nocicezione del topo attraverso il riflesso del pizzico superiore e garantire una frequenza respiratoria costante prima di incidere il sito chirurgico. Una volta che la pelliccia tagliata sulla testa viene rimossa dal nastro adesivo, iniettare per via sottocutanea il ketoprofene analgesico per alleviare il dolore e applicare un unguento per gli occhi. Quindi, fissare la testa inserendo la barra auricolare appuntita nel condotto uditivo.Stringere il morsetto del naso sul supporto dell'incisivo e premere delicatamente la testa per assicurarsi che la testa sia fissa. Utilizzare 3 scrub alternati di tampone alla clorexidina per disinfettare il cuoio capelluto. Ora, usa bisturi dissezionante per fare un'incisione di meno di un centimetro nel cuoio capelluto in modo posteriore anteriore.Dopo aver aperto l'incisione, pulire il cranio con un batuffolo di cotone tenuto da una pinza micro dissecante. Sulla base delle coordinate stereotassiche, identificare ed etichettare la posizione del ventricolo laterale destro come descritto nel manoscritto. Quindi, praticare un foro attraverso il cranio nel sito etichettato usando un trapano stereotassico, e più tardi, praticare da due a quattro fori nel cranio.Pulire il cranio con un batuffolo di cotone alla lidocaina e montare da 2 a 4 viti in acciaio inossidabile sui fori. Posizionare la cannula guida commerciale sul supporto della cannula stereotassica e disinfettare con lo sterilizzatore a velocità di vetro a 150 gradi Celsius. Quindi, spostare il supporto della cannula stereotassica sul foro praticato per il ventricolo laterale e inserire lentamente la cannula di guida commerciale nel foro fino a raggiungere la profondità desiderata.Ora applicare 10 microlitri di adesivo n-butile cianoacrilato per fissare la cannula guida commerciale nel foro praticato e attendere 3 o 4 minuti. Rilasciare delicatamente la cannula guida commerciale dal supporto della cannula stereotassica e applicare l'acrilico dentale sul cuoio capelluto inciso per fissare la cannula guida commerciale e attendere almeno 5 minuti. Impiantare il manichino commerciale nella cannula della guida commerciale.Quindi, posizionare il mouse in una nuova gabbia con una piastra riscaldante sotto per il recupero dall'anestesia e osservare continuamente fino a quando il topo non si risveglia completamente. Montare la siringa da microlitri, contenente 10 microlitri di acqua distillata, sulla pompa di microiniezione. Utilizzando una siringa da insulina, riempire il tubo di polietilene con acqua distillata e collegare la siringa da microlitro al tubo di polietilene sospeso.Accendere il controller di microiniezione e premere display tutti i canali per accedere alla schermata di comando. Quindi, premere configurazione e impostare l'obiettivo del volume su 9.800 nanolitri con velocità di consegna di 100 nanolitri al secondo. Quindi premere la direzione per passare alla modalità di infusione e premere Run per infondere 9.800 nanolitri di acqua distillata dal tubo di polietilene collegato alla siringa da microlitro.Ora, posizionare l'iniettore in una fiala contenente l'olio minerale, premere la configurazione e impostare l'obiettivo di volume su 3.000 nanolitri con velocità di erogazione a 100 nanolitri al secondo. Per prelevare 3.000 nanolitri di olio minerale, premere la direzione per passare alla modalità di prelievo e quindi premere Esegui. Smontare il tubo di polietilene dall'ago della siringa da microlitri.Per sputare 3.000 nanolitri di acqua distillata dall'ago della siringa da microlitri, premere la direzione per passare alla modalità di infusione e premere run. Quindi inserire nuovamente la siringa da microlitro nel tubo di polietilene. Inserire l'iniettore in un flaconcino contenente SCFA.Premere la configurazione e impostare l'obiettivo del volume su 9.500 nanolitri con velocità di consegna a 100 nanolitri al secondo. Prelevare 9.500 nanolitri di SCFA premendo la direzione per passare alla modalità di prelievo e premere Esegui. Etichettare la fase SCFA dell'olio per verificare se gli SCFA sono stati infusi correttamente.Premere la configurazione e impostare l'obiettivo di volume desiderato con velocità di consegna a 7 nanolitri al secondo. Premere la direzione per passare alla modalità di infusione. Premere per infondere la siringa da microlitro in avanti fino a quando il liquido esce all'estremità anteriore dell'iniettore commerciale prima di inserire l'iniettore nella cannula per l'iniezione di SCFA.Dopo aver anestetizzato il mouse, inserire l'iniettore commerciale nella cannula della guida commerciale. Una volta che il topo è guarito dall'anestesia, mettilo in una nuova gabbia e lascialo esplorare per 35 minuti liberamente. Infondere SCFA utilizzando una velocità di consegna di 7 nanolitri al secondo per un volume target di 2.100 nanolitri nei primi 5 minuti.Quindi premere la direzione per la modalità di infusione e premere Esegui. Dopo i test comportamentali, rimuovere l'iniettore commerciale dalla cannula della guida commerciale. Infondere 2.100 nanolitri del tracciante neutro con la velocità di erogazione di 7 nanolitri al secondo per verificare il sito di infusione.Visualizzare il segnale fluorescente nel sito di infusione utilizzando un microscopio a fluorescenza. Entrambi i topi infusi con ACSF e SCFA hanno viaggiato in una nuova gabbia per un totale di 35 minuti. Non è stata osservata alcuna differenza nell'attività locomotoria nella nuova gabbia tra infusione di SCFA e ACSF.Il colorante fluorescente è stato rilevato nel ventricolo laterale e nelle regioni circostanti del cervello del topo quando è stato infuso con una cannula guida commerciale. Allo stesso modo, l'infusione attraverso la cannula di guida in acciaio inossidabile porta alla rilevazione di segnali nel ventricolo laterale e nelle regioni circostanti del cervello del topo. La combinazione di questa procedura con tecnologie neurali basate su circuiti consentirà agli scienziati di ottenere informazioni sul controllo del cervello basato sul circuito e sul comportamento fornito dai metaboliti intestinali.Questa tecnica apre la strada ai ricercatori per esplorare il ruolo del microbiota e dei metaboliti nell'intricato asse cerebrale intestinale.

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Questo articolo viene illustrato due metodi molto diversi di iniezione: 1) nel cervello (intracerebroventricolare) e 2) sistemica (endovenosa) per introdurre gli agenti terapeutici nel sistema nervoso centrale di topi neonati.

Consegna di agenti terapeutici attraverso intracerebroventricolare (ICV) e per via endovenosa (ev) nei topi

Questo video dimostra il processo di iniezione intracerebroventricolare per studiare la distribuzione del citomegalovirus murino (MCMV) nel cervello del topo neonatale. L'MCMV, progettato per esprimere una proteina fluorescente verde potenziata (EGFP) per la visibilità, viene iniettato nel ventricolo laterale del cervello di un cucciolo di topo. Il virus iniettato circola attraverso il liquido cerebrospinale, infettando le cellule della regione periventricolare, compresa la zona marginale, il...

Un'iniezione intracerebroventricolare per analizzare la distribuzione del citomegalovirus murino nel cervello di un topo neonatale

Fonte: Liou, C. et al. Somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici di origine intestinale in topi che si muovono liberamente. J. Vis. Exp. (2022).Questo video mostra l'iniezione intracranica di acidi grassi a catena corta (SCFA) in un topo che si muove liberamente per studiarne gli effetti sul comportamento mediato dal cervello. Una cannula iniettiva viene inserita in una cannula guida impiantata nel cervello del topo. Dopo il recupero, il topo si acclimata in una nuova...

Iniezione intracranica di metaboliti microbici derivati dall'intestino in un modello murino

Un modello murino di ricostruzione base cranica endoscopica umana sviluppato che crea un'interfaccia semipermeabile tra il cervello e il naso utilizzando innesti mucose nasali. Questo metodo permette ai ricercatori di studiare consegna al sistema nervoso centrale di alto peso molecolare terapeutica che altrimenti esclusi dalla barriera emato-encefalica, se somministrati per via sistemica.

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L'obiettivo qui è quello di delineare un protocollo per studiare i meccanismi della disbiosi nelle malattie cardiovascolari. Questo documento discute come raccogliere e trapiantare asetticamente campioni fecali murini, isolare l'intestino e utilizzare il metodo "Swiss-roll", seguito da tecniche di immunocolorazione per interrogare i cambiamenti nel tratto gastrointestinale.

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La comunicazione intestino-cervello, facilitata dal nervo vago, è fondamentale per la comunicazione tra il sistema endocrino gastrointestinale e il cervello. Tuttavia, non è ancora chiaro se l'iniezione intragastrica di glucosio possa modificare l'attività corticale. Qui, offriamo un protocollo completo per osservare i cambiamenti nell'attività corticale dopo l'iniezione di glucosio nel duodeno.

Analisi in tempo reale della comunicazione neurale intestino-cervello: dinamica del calcio a livello di corteccia in risposta alla stimolazione intestinale del glucosio

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Questo articolo descrive: (1) somministrazione orale tramite gavage di molecole di prova ai topi neonatali già a partire dal DOL 6; e (2) valutazione ex vivo della funzione della barriera epiteliale del colon nelle biopsie dai cuccioli DOL 10 allo svezzamento (DOL 20) valutando la permeabilità paracellulare e transcellulare con camere di Ussing.

Gavage orale nei cuccioli neonatali di topo e valutazione funzionale dell'integrità della barriera intestinale utilizzando camere di uso

Scopri la somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici intestinali in topi liberi. Questo metodo validato permette di studiare l'asse intestino-cervello e le sue implicazioni comportamentali.

Somministrazione intracerebroventricolare di metaboliti microbici derivati dall'intestino in topi che si muovono liberamente

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