Isolamento di epatociti rigeneranti dopo epatectomia parziale nei topi

L'obiettivo generale di questo protocollo è quello di presentare un metodo ottimizzato per l'isolamento degli epatociti nei topi dopo epatectomia parziale senza la necessità di centrifugazione a gradiente di densità. Di solito vediamo una grande percentuale di epatociti carichi di lipidi durante la rigenerazione precoce. Quegli epatociti steatosici di solito persi con la centrifugazione del gradiente di densità a causa della bassa densità vengono mantenuti con questo protocollo.

Per preparare l'apparecchiatura di perfusione, collegare una cannula IUI calibro 26 all'estremità di uscita del tubo utilizzando un connettore Luer lock. Quindi lavare il tubo e inserire l'estremità di ingresso del tubo nel tubo tampone di perfusione preriscaldato nel bagno d'acqua. Innescalo con tampone di perfusione caldo a una velocità della pompa di tre millilitri al minuto.