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DOI: 10.3791/64534-v
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Il presente protocollo descrive la creazione di un sistema di organoidi del colon murino per studiare l'attività e il funzionamento delle cellule staminali del colon in un modello knockout di claudina-7.
Questo protocollo fornisce un metodo per studiare la funzione delle cellule staminali del colon in un ambiente manipolabile con costi inferiori nel tempo rispetto ai modelli animali. La coltura organoide consente lo studio della funzione delle cellule staminali in un ambiente immuno-libero. Ciò consente di individuare gli effetti di una causa specifica, come il knockout di claudina-7.
Comprendere i meccanismi della funzione delle cellule staminali può far luce su nuovi bersagli terapeutici per malattie debilitanti come la malattia infiammatoria intestinale e il cancro del colon-retto. Per iniziare l'isolamento delle cripte del colon dal topo eutanasiato, fai un'incisione di circa due pollici lungo la linea mediana del topo. Quindi, fissare indietro la pelle per esporre l'addome.
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