Generazione e manipolazione di organoidi intestinali di ratto

In questo studio abbiamo stabilito un modello di organoide intestinale di ratto che è robusto nella coltura cellulare a lungo termine. Dimostriamo anche le prime manipolazioni genetiche di successo utilizzando sia l'infezione lentivirale che la trasfezione transitoria. Questo modello è uno strumento eccellente per manipolare la biologia intestinale nel ratto, dove gli strumenti genetici disponibili in vivo sono limitati.

Gli organoidi intestinali di ratto sono stati precedentemente difficili da coltivare a lungo termine. Generando un modello di organoide di ratto robusto e geneticamente manipolabile, stiamo fornendo ai ricercatori ulteriore flessibilità e scelta per selezionare un modello di organoide più adatto alle loro particolari circostanze. Gli organoidi intestinali di topo sono utilizzati per studiare il comportamento, il destino e la fisiologia delle cellule staminali, ma possono essere un modello non ottimale.

Poiché ci sono differenze fondamentali tra la biologia del topo e quella umana. D'altra parte, gli organoidi intestinali umani possono essere difficili da ottenere e hanno requisiti di coltura cellulare complessi. Il modello di organoide di ratto che descriviamo qui mantiene una rilevanza fisiologica chiave per la biologia umana, pur essendo notevolmente più facile da accedere e curare rispetto agli organoidi intestinali umani.

Lo sviluppo e l'ottimizzazione del modello di organoide intestinale di ratto consente la manipolazione genetica, i trattamenti farmacologici e gli studi di biologia intestinale e il modello accessibile con rilevanza fisiologica chiave per gli esseri umani. Inoltre, questi organoidi di ratto consentiranno lo studio della fisiologia specie-specifica, dei destini cellulari, delle variazioni fenotipiche e dei modelli di malattia nell'intestino.