Name: Setacciare la polpa della frutta per rilevare moscerini della frutta tefritidi immaturi sul campo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 21 s
Description: Scopri un metodo di setacciamento della polpa fruttata per rilevare larve di moscerini della frutta tefritidi sul campo. Questa tecnica più rapida e accurata migliora la gestione dei parassiti e supporta gli sforzi di eradicazione.

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Vorremmo ringraziare Silvia Durand, Teri Allen, Jose Alebria e Alejandra Canon per l'assistenza nella lavorazione della guava presso l'Università della Florida, Rick Kurashima, Jean Auth e Bruce Inafuku per l'aiuto nella valutazione del frutto infestato artificialmente alle Hawaii e Michael Stulberg per gli utili commenti sulle versioni precedenti del manoscritto. Questo progetto è stato finanziato in parte dall'USDA APHIS e dall'University of Florida Cooperative Agreement e sostenuto in parte dall'USDA-ARS (progetto 2040-22430-027-00D). I risultati e le conclusioni di questa pubblicazione preliminare non sono stati formalmente diffusi dall'USDA e non devono essere interpretati come una determinazione o una politica dell'agenzia. La menzione di nomi commerciali o prodotti commerciali in questa pubblicazione ha il solo scopo di fornire informazioni specifiche e non implica raccomandazione o approvazione da parte dell'USDA. L'USDA è un fornitore di pari opportunità e datore di lavoro.

1. Selezione di frutta
<ol><li>Determina quale frutta è disponibile nell'area da esaminare.</li>
	<li>Selezionare il frutto ospite in base all'elenco degli ospiti noti per le specie tefritidi target.</li>
	<li>Scegli frutta matura a polpa morbida, come mango, papaia e guava. I frutti acerbi o a polpa dura, come le mandorle tropicali, dovrebbero essere ispezionati con un metodo diverso, come il taglio della frutta.</li>
	<li>Seleziona frutta caduta, troppo matura o frutta matura su alberi che hanno segni di danni, cicatrici da ovideposizione e punti deboli.</li>
	<li>Elaborare circa 2 litri di frutta in una sola volta (ad esempio, 5 guaiave o 5 mango di medie dimensioni costituiscono campioni adeguati per questo metodo). Il numero di frutti che possono essere lavorati contemporaneamente dipende dalla dimensione dei frutti (Figura 1A).</li>
</ol>2. Mushing
<ol><li>Tagliare il frutto in pezzi grandi e metterlo in un sacchetto da 4 litri con chiusura a zip (Figura 1B).</li>
	<li>Aggiungere acqua al sacchetto fino a quando l'acqua copre il frutto tritato di 25-50 mm (Figura 1C).</li>
	<li>Spremere delicatamente il frutto a mano fino a quando tutta la polpa si è staccata dalla buccia e ha una consistenza liscia (cioè senza grossi pezzi) (Figura 1D).</li>
</ol>3. Setacciatura per la raccolta tardiva
<ol><li>Impilare i setacci. Utilizzare setacci grandi (diametro 457 mm) per la lavorazione di grandi quantità di frutta (~ 5 frutti contemporaneamente) e setacci più piccoli (diametro 305 mm) per singoli frutti o campioni più piccoli (< 5 frutti).</li>
	<li>Impilare il setaccio con un setaccio a maglie larghe (n. 8; 2,36 mm) sopra un setaccio a maglie piccole (n. 20; 0,85 mm). Per il rilevamento delle prime stelle, posizionare un terzo setaccio (n. 45; 0,35 mm) sul fondo della pila (Figura 1E).</li>
	<li>Versare la polpa nel setaccio superiore (Figura 1F).</li>
	<li>Lavare accuratamente la polpa attraverso la pila di setacci usando acqua da un rubinetto, un tubo flessibile o una bottiglia fino a quando la polpa fine non è passata attraverso i setacci (Figura 1G).</li>
	<li>Scansionare visivamente i setacci superiori alla ricerca di larve tardive che potrebbero essere state trattenute con la buccia o qualsiasi grande pezzo di frutta (Figura 1H).</li>
	<li>Ispezionare attentamente il secondo setaccio per le larve tardive. Con grandi quantità di polpa fine, potrebbe essere necessario un ulteriore risciacquo.</li>
	<li>Raccogliere le larve dai setacci con pinze larvali e metterle in fiale con il 70% di EtOH.</li>
</ol>4. Fluttuazione dello zucchero per la raccolta anticipata
<ol><li>Premiscelare la soluzione zuccherina sciogliendo 453 g (1 scatola) di zucchero di canna scuro in 2 L di acqua di rubinetto, che produce una lettura Brix di 19°10.</li>
	<li>Lavare la polpa dai setacci a maglie più fini (ad esempio, n. 20 e n. 45) fino al bordo del setaccio con acqua di rubinetto, quindi spostare il materiale in una padella di plastica (11 L).</li>
	<li>Aggiungere la soluzione di zucchero di canna fino a coprire la polpa di 25-50 mm e aggiungere 2 gocce di antischiuma. Lasciare riposare la polpa nella soluzione di zucchero di canna per circa 5 minuti.</li>
	<li>Raccogliere le larve che galleggiano sulla superficie della soluzione con pinze larvali in flaconcini con il 70% di EtOH.</li>
</ol>5. Cura larvale
<ol><li>Etichettare una fiala con il luogo di raccolta, la data, il tipo di frutta e il raccoglitore per un successivo esame e identificazione.</li>
</ol>

Il metodo di mushing, setacciatura e galleggiamento per rilevare le larve di moscerino della frutta

<ol><li>White, I. M., Elson-Harris, M. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhite%2C+IM+%22Fruit+Files+of+Economic+Significance%3A+Their+Identification+and+Bionomics%22">Fruit Files of Economic Significance: Their Identification and Bionomics</a>. , CAB International. Wallingford, UK. (1992).</li>
<li>Papadopoulos, N. T., Plant, R. E., Carey, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+trickle+to+flood%3A+the+large-scale%2C+cryptic+invasion+of+California+by+tropical+fruit+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">From trickle to flood: the large-scale, cryptic invasion of California by tropical fruit flies.</a> Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 280 (1768), 20131466(2013).</li>
<li>Suckling, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eradication+of+tephritid+fruit+fly+pest+populations%3A+outcomes+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Eradication of tephritid fruit fly pest populations: outcomes and prospects.</a> Pest Management Science. 72 (3), 456-465 (2016).</li>
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<li>Mutamiswa, R., Nyamukondiwa, C., Chikowore, G., Chidawanyika, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+oriental+fruit+fly%2C+Bactrocera+dorsalis+%28Hendel%29+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+in+Africa%3A+From+invasion%2C+bio-ecology+to+sustainable+management%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Protection%22%5BJournal%5D)">Overview of oriental fruit fly, Bactrocera dorsalis (Hendel) (Diptera: Tephritidae) in Africa: From invasion, bio-ecology to sustainable management.</a> Crop Protection. 141, 105492(2021).</li>
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<li>Yee, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+Rhagoletis+indifferens+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+larvae+using+brown+sugar+flotation+and+hot+water+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Detection of Rhagoletis indifferens (Diptera: Tephritidae) larvae using brown sugar flotation and hot water methods.</a> Journal of Applied Entomology. 136 (7), 549-560 (2012).</li>
<li>Yee, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+brown+sugar%2C+hot+water%2C+and+salt+methods+for+detecting+western+cherry+fruit+fly+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+larvae+in+sweet+cherry%5BTitle%5D)+AND+%22Florida+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Comparison of the brown sugar, hot water, and salt methods for detecting western cherry fruit fly (Diptera: Tephritidae) larvae in sweet cherry.</a> Florida Entomologist. 97 (2), 422-430 (2014).</li>
<li>Van Timmeren, S., Diepenbrock, L. M., Bertone, M. A., Burrack, H. J., Isaacs, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+filter+method+for+improved+monitoring+of+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+larvae+in+fruit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Integrated+Pest+Management%22%5BJournal%5D)">A filter method for improved monitoring of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) larvae in fruit.</a> Journal of Integrated Pest Management. 8 (1), 23(2017).</li>
<li>Van Timmeren, S., Davis, A. R., Isaacs, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+a+larval+sampling+method+for+monitoring+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+in+blueberries%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Optimization of a larval sampling method for monitoring Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) in blueberries.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (4), 1690-1700 (2021).</li>
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<li>Kendra, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gas+chromatography+for+detection+of+citrus+infestation+by+fruit+fly+larvae+%28Diptera%3A+Tephritidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Postharvest+Biology+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Gas chromatography for detection of citrus infestation by fruit fly larvae (Diptera: Tephritidae).</a> Postharvest Biology and Technology. 59 (2), 143-149 (2011).</li>
<li>SAS Institute Inc. SAS 9.4 Guide to Software Updates and Product Changes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22SAS+Institute+Inc%22">SAS Institute Inc</a>. , (2013).</li>
</ol>

Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.

Il nostro obiettivo era quello di sviluppare un modo efficiente ed efficace per trovare larve di tefritidi sul campo. La motivazione del lancio di un programma di eradicazione o della creazione di un'area di quarantena è il rilevamento di femmine o larve accoppiate6, che indica una popolazione riproduttiva. L'attuale metodo di taglio e ricerca visiva dei frutti è inefficiente nel trovare le larve poiché di solito sono presenti molti più frutti ospiti di quelli che possono essere ispezionati individualmente. Inoltre, le popolazioni dei tefritidi sono probabilmente basse in un'area di nuova invasione, rendendo incredibilmente difficili le possibilità di trovare larve in una grande quantità di frutti. Ad esempio, nel programma di eradicazione della Bactrocera dorsalis del 2015 in Florida, sono state identificate 54 diverse specie ospiti e sono stati tagliati più di 4.000 frutti. In questo programma di eradicazione, solo poche larve sono state trovate nel mango e nessun altro ospite è stato trovato infestato6. Abbiamo scoperto che il metodo MSF / MS era sia più sensibile che più veloce nel rilevare le larve di A. suspensa e B. dorsalis durante la lavorazione di frutti che avevano una grande quantità di polpa (mango, guava e papaia) alla rinfusa rispetto al taglio della frutta. La maggiore quantità di frutti ospiti che è possibile ispezionare utilizzando il metodo mushing e setacciatura, combinata con l'aumento del rilevamento di una larva rara, potrebbe aumentare la probabilità che un'infestazione venga trovata precocemente. L'individuazione precoce di una popolazione riproduttiva potrebbe aumentare la probabilità di eradicazione e ridurre i costi del programma.
I nostri esperimenti hanno dimostrato che il numero di larve rilevate dai lavoratori che tagliano e ispezionano visivamente i frutti variava considerevolmente. I lavoratori che tagliano la frutta hanno perso il 50% e il 75% delle larve di B. dorsalis collocate rispettivamente nel mango e nella papaia. Al contrario, solo il 5% e il 15% delle larve sono mancati utilizzando il metodo MS per la lavorazione del mango e della papaia, rispettivamente. Analogamente, uno studio che ha valutato il taglio della frutta nei porti di entrata ha mostrato una notevole variazione nel numero di frutti e larve infestati trovati dagli ispettori8. Lo studio ha dimostrato che gli ispettori portuali esperti hanno perso il 64% -99% delle larve di A. suspensa e il 16% -82% della frutta infestata quando la frutta è stata tagliata e ispezionata visivamente8. I nostri risultati suggeriscono che il metodo di mushing e setacciatura potrebbe ridurre la probabilità che un lavoratore manchi di rilevare un frutto infestato.
La galleggiazione dello zucchero e dell'acqua calda sono protocolli accettati in un metodo di approccio sistemico per garantire che le ciliegie e i mirtilli siano privi di moscerini della frutta14. Un sottoinsieme di una spedizione viene schiacciato nella soluzione, dopodiché un ispettore scherma visivamente la superficie della soluzione zuccherina per la presenza di uova e larve. Sebbene sia possibile elaborare un numero maggiore di frutti rispetto al taglio dei singoli frutti, la probabilità di trovare larve utilizzando queste tecniche è ancora influenzata dall'abilità dell'ispettore, dallo stadio e dal numero di larve presenti e dal tipo di frutto8. Abbiamo scoperto che, come altri tefritidi, B. dorsalis e A. suspensa si staccano dalla polpa del frutto e galleggiano in superficie. È interessante notare che abbiamo scoperto che con larve più grandi, che sono l'obiettivo nei programmi di emergenza e di eradicazione in quanto possono essere identificate morfologicamente, compresa la flottazione dello zucchero non ha aumentato l'accuratezza del metodo. Infatti, l'aggiunta del metodo di galleggiamento ha aumentato il tempo di lavorazione del 90% per la papaia e del 48% per il mango. L'aumento del tempo di elaborazione e i materiali aggiuntivi (ad esempio, acqua, contenitori, zucchero, ecc.) non supportano operativamente l'aggiunta di questo passaggio durante la ricerca di grandi stelle sul campo. Il metodo di galleggiamento dello zucchero può essere appropriato quando l'obiettivo è quello di rilevare tutte le fasi, comprese le prime fasi, ad esempio nei porti di ingresso e nelle centrali ortofrutticole. Filtrare la soluzione zuccherina con un setaccio a maglie fini fornirebbe molto probabilmente la rilevazione più accurata delle uova e delle prime stelle larvali11,12.
Le tecniche MS e MSF funzionano bene con frutta che può essere facilmente mushed e ha un grande volume di polpa. Le larve di tefritidi tendono a scavare nella polpa del frutto, il che rende difficile il rilevamento visivo. Un aspetto critico dei metodi MS e MSF è separare le larve dalla polpa. Il processo di setacciatura rimuove la polpa, esponendo così le larve su schermi di setaccio. Allo stesso modo, il metodo dell'acqua zuccherata separa le larve dalla polpa facendo galleggiare le larve, mentre la polpa affonda sul fondo della padella. Le larve separate dalla polpa con i metodi MS o MSF sono facilmente osservabili muoversi sul vaglio o sulla superficie dell'acqua. Sebbene il metodo di mushing, setacciatura e facoltativamente galleggiante abbia notevolmente migliorato la velocità e l'accuratezza del rilevamento delle larve di tefritidi in importanti frutti ospiti, il processo potrebbe non essere appropriato per tutti i frutti. Ad esempio, la frutta ospite con polpa dura, come avocado verdi o frutta con un grande seme / nocciolo e una quantità relativamente piccola di polpa, come le mandorle tropicali, può essere più facile da lavorare tagliando a mano e ispezione visiva.
Abbiamo scoperto che i metodi MS e MSF erano più veloci quando veniva elaborato un numero relativamente piccolo di frutta (5-10). La differenza sarebbe probabilmente maggiore se venissero lavorate maggiori quantità di frutta, il che potrebbe essere necessario e tipico dei programmi di emergenza per la mosca della frutta. La rimozione della fase di galleggiamento ha ulteriormente aumentato la velocità di rilevamento senza compromettere la precisione del rilevamento di larve di tefritidi di grandi dimensioni (>3 mm). Abbiamo dimostrato che queste tecniche potevano essere portate sul campo, che simulava le condizioni vissute dai lavoratori durante un programma di emergenza di moscerini della frutta. I nostri studi indicano che i metodi per la SM possono consentire una rilevazione più tempestiva delle larve tardive e la successiva eradicazione delle popolazioni riproduttive di tefritidi. MSF potrebbe essere utilizzata per rilevare uova e early instars attualmente non presi di mira dai programmi di eradicazione.

I moscerini della frutta tefritidi sono tra i parassiti agricoli più distruttivi, con i generi Anastrepha, Bactrocera e Ceratitis che rappresentano il maggior rischio1. Molte aree sono ad alto rischio per l'insediamento di moscerini della frutta esotica, sulla base di 1) incursioni storiche e programmi di delimitazione ed eradicazione associati, 2) l'alto tasso di arrivo di materiale ospite di mosca della frutta nei porti di ingresso e 3) condizioni climatiche favorevoli per l'insediamento di popolazioni riproduttive. Lo stato della California sperimenta molteplici incursioni e rilevamenti di tefritidi ogni anno2. Ci sono state più di 200 incursioni e programmi di eradicazione contro i tefritidi a livello globale nel corso dell'ultimo secolo, e questo ha accelerato significativamente negli ultimi decenni3. Sebbene la stragrande maggioranza di questi programmi riesca a sradicare la mosca della frutta invasore3,4, l'onere economico e ambientale di queste invasioni rimane ancora elevato e la possibilità di stabilirsi è sempre presente; un recente esempio catastrofico è l'infezione di Bactrocera dorsalis nel continente africano5.
Durante i programmi di emergenza per la mosca della frutta, viene fatto uno sforzo concertato per rilevare e controllare le popolazioni riproduttive delle specie invasori. Ad esempio, lo stato della Florida risponde alle incursioni tefritidi applicando inzuppamenti del suolo (sotto la linea di gocciolamento di piante ospiti fruttifere) e rimuovendo i frutti ospiti in un raggio di 200 m intorno ai siti in cui si trovano femmine accoppiate e / o larve6. Queste azioni e tattiche servono a uccidere larve e pupe nel terreno e rimuovere eventuali uova e larve dai frutti all'interno dell'area. In alcuni programmi di eradicazione, viene rimossa una quantità significativa di frutta ospite. Nel 2015, oltre 100.000 kg di frutta sono stati distrutti durante il programma di eradicazione di B. dorsalis in Florida6. Le perdite economiche per i coltivatori e le industrie associate nella sola area in quarantena sono state stimate in oltre $ 10,7 milioni7.
Per trovare larve di tefritidi nelle aree di quarantena, un piccolo team di entomologi raccoglie i frutti ospiti in un raggio di 200 m attorno a un'area di rilevamento delle mosche femmine e taglia e ispeziona visivamente ogni frutto per le larve6. Con risorse di personale limitate e centinaia di possibili ospiti, il compito diventa difficile, in particolare nelle aree in cui la diversità degli impianti sia nelle aree di produzione commerciale che nei cantieri residenziali è elevata. Inoltre, le larve possono mancare quando si tagliano i frutti ospiti. In uno studio che ha valutato il taglio della frutta nei porti di entrata, il taglio della frutta non è risultato altrettanto efficace nel rilevare A. suspensa rispetto a tenere i frutti infestati per diverse settimane e contare le larve e le pupe trovate nel substrato di pupa8.
Esistono alternative al taglio della frutta per rilevare un'infestazione 9,10,11,12,13. Ad esempio, una galleggiazione dello zucchero di canna e un metodo di acqua calda sono entrambe procedure accettate utilizzate per rilevare i moscerini della frutta delle ciliegie occidentali nelle ciliegie raccolte 9,10. Il metodo dello zucchero di canna prevede il posizionamento di frutta schiacciata in soluzione di acqua zuccherata e la raccolta delle larve che galleggiano verso l'alto. Il metodo di galleggiamento dello zucchero di canna è stato sviluppato specificamente per soddisfare le norme normative per le ciliegie esportate, che richiedono ai centri di imballaggio di monitorare i parassiti della mosca della frutta in quarantena. Esiste anche un programma di certificazione dei mirtilli USA-Canada approvato che include la galleggiazione dell'acqua di zucchero di canna, la galleggiazione dell'acqua salata o l'ebollizione per supportare la fitosanizzazione14. Durante il test dell'accuratezza della galleggiazione dello zucchero e dell'acqua calda, i ricercatori hanno utilizzato il metodo di setacciatura per determinare quante larve sono perse 9,10,11,12,13. Uno studio ha dimostrato che mescolare mirtilli tritati in una soluzione salina e filtrare la soluzione attraverso un filtro da caffè riutilizzabile era quattro volte migliore nel rilevare le larve di Drosophila suzukii rispetto all'ispezione visiva della superficie delle soluzioni di sale e zucchero14. Inoltre, la gascromatografia è stata utilizzata per la rilevazione di larve di A. suspensa negli agrumi15. Questi approcci non sono stati testati per l'applicabilità nelle indagini sul campo.
Il nostro obiettivo era quello di sviluppare e testare un metodo per trovare larve di tefritidi sul campo utilizzando setacciatura e galleggiamento dell'acqua zuccherata. Questo metodo consente il rilevamento più efficiente dei moscerini della frutta immaturi rispetto al tradizionale metodo di taglio della frutta, supportando il controllo tempestivo delle popolazioni riproduttive durante i programmi di eradicazione della mosca della frutta.

<table><tbody><tr><td>Antischiuma</td><td>MicroLubrol</td><td>ML200-50-4</td><td>MicroLubrol 2000 Olio di silicone puro fluido, https://www.microlubrol.com</td></tr><tr><td>Brown Sugar</td><td>Dominos</td><td></td><td>1 lb Box&nbsp; Cristalli di zucchero di canna scuro, https://www.dominosugar.com/products/dark-brown-sugar</td></tr><tr><td>taglieri</td><td>KitchenAid</td><td>KE703NOSMGA</td><td>KitchenAid Classic Tagliere in plastica antiscivolo, 12x18 pollici, https://www.amazon.com/KitchenAid-Classic-Nonslip-Plastic-11x14-Inch/dp/B09117L774/ref=sxin_24_ac_d_mf_brs?ac_md=2-1-S2l0Y2hlbkFpZA%3D%3D-ac_d_mf_brs_brs&content-id=amzn1.sym.1ad31f34-ba12-4dca-be4b-f62f7f5bb10d%3Aamzn1.sym.1ad31f34-ba12-4dca-be4b-f62f7f5bb10d&crid=UXMLNC72BL0 M& cv_ct_cx=taglio%2Btavole& keywords=cutting%2Bboards & pd_rd_i=B091118V8T& pd_rd_r= 4c48b4ad-4d4d-4b4b-8799-fc7313 2f8e34& pd_rd_w=li862& pd_rd_wg = KogbB& pf_rd_p=1AD31F34-BA12-4DCA-BE4B-F62F7F5BB10D& pf_rd_r=9ATJD6W QBF9DVRY889MP& qid=1673911 429& refresh=1& sprefix=taglio%2Bboards%2Caps%2C198& sr=1-2-8b2f235a-dddf-4202-bbb9-592393927392& th=1</td></tr><tr><td>Piatti Pentole</td><td>Sterilizzare</td><td>06578012</td><td>Bianco 12 qrt Piatto, https://www.amazon.com/STERILITE-06578012-Sterilite-White-Dishpan/dp/B0039V2G5E/ref=sr_1_1?crid=2SMBMLFJF18U&keywords= bianco+12+qt+piatto+Sterilizzare& qid=1673911729& s=casa -giardino& sprefix=bianco+12+qr+piatto+sterlite%2Cgarden%2C184& sr=1-1</td></tr><tr><td>EthOH</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP8202500</td><td>Soluzione di etanolo 96%, Grado di biologia molecolare, https://www.fishersci.com/shop/products/ethanol-solution-96-molecular-biology-grade-fisher-bioreagents/BP8202500</td></tr><tr><td>fiale di vetro</td><td>Fisher Scientific</td><td>0333921H</td><td>Fisherbrand&nbsp; Classe B Fiale filettate in vetro trasparente con chiusure, coltelli https://www.fishersci.com/shop/products/class-b-clear-glass-threaded-vials-with-closures-packaged-separately/0333921H</td></tr><tr><td></td><td>Zyliss</td><td>31380</td><td>5.25 "coltello multiuso, https://www.amazon.com/ZYLISS-Utility-Kitchen-5-5-Inch-Stainless/dp/B00421ATJK/ref=sr_1_7?crid=2U27KE1HTG5N1&keywords= frutta%2Bcutting%2Bknives& qid=1673911609& s= casa-giardino& sprefix=frutta%2Btaglio%2Bcoltelli%2Cgiardino%2C145& sr=1-7& th=1</td></tr><tr><td>No. 20 Setacci a maglie</td><td>Hogentogler & Co. Inc.</td><td>4221</td><td>Standard degli Stati Uniti&nbsp; Setacci di prova, https://www.hogentogler.com/sieves/18-inch-sieves.asp</td></tr><tr><td>No. 45 Setacci a maglie</td><td>Hogentogler & Co. Inc.</td><td>4226</td><td>Standard degli Stati Uniti&nbsp; Setacci di prova, https://www.hogentogler.com/sieves/18-inch-sieves.asp</td></tr><tr><td>Setacci a maglie n. 8</td><td>Hogentogler & Co. Inc.</td><td>4215</td><td>Standard degli Stati Uniti&nbsp; Setacci per test, pinze morbide https://www.hogentogler.com/sieves/18-inch-sieves.asp</td></tr> DR <tr><td></td><td>Instruments</td><td>DRENTF01</td><td>DR Instruments Pinze per entomologia Featherweight, https://www.amazon.com/DR-Instruments-DRENTF01-Featherweight-Entomology/dp/B008RBLO8Q</td></tr><tr><td>Sacchetti per la conservazione con chiusura a cerniera</td><td>Ziploc</td><td>682254</td><td>Sacchetti per congelatore trasparenti da 2 galloni di marca Ziploc, https://www.amazon.com/Ziploc-Freezer-Bag-Gallon-100/dp/B01NCDWR8A/ref=sr_1_1_sspa?crid=3SQFBT64Z76ES&keywords = Ziploc + congelatore + sacchetti + 2 + gallone & qid=1674504602&</td></tr></tbody></table>

setacciare la polpa della frutta per rilevare moscerini della frutta tefritidi immaturi sul campo

Sieving Fruit Pulp to Detect Immature Tephritid Fruit Flies in the Field

I moscerini della frutta della famiglia Tephritidae sono tra i parassiti agricoli più distruttivi e invasivi del mondo. Molti paesi intraprendono costosi programmi di eradicazione per eliminare le popolazioni incipienti. Durante i programmi di eradicazione, viene fatto uno sforzo concertato per rilevare le larve, poiché ciò indica fortemente una popolazione riproduttiva e aiuta a stabilire l'estensione spaziale dell'infestazione. Il rilevamento di fasi di vita immature innesca ulteriori azioni di controllo e regolamentazione per contenere e prevenire qualsiasi ulteriore diffusione del parassita. Tradizionalmente, il rilevamento larvale viene effettuato tagliando i singoli frutti dell'ospite ed esaminandoli visivamente. Questo metodo è laborioso, poiché è possibile elaborare solo un numero limitato di frutta e la probabilità di perdere una larva è alta. È stata testata una tecnica di estrazione che combina i) mushing frutta ospite in un sacchetto di plastica, ii) filtrare la polpa attraverso una serie di setacci, iii) mettere la polpa trattenuta in una soluzione di acqua zuccherata marrone e iv) raccogliere le larve che galleggiano in superficie. Il metodo è stato valutato in Florida con guava raccolta sul campo infestata naturalmente da Anastrepha suspensa. Per imitare le popolazioni basse più rappresentative di un programma di eradicazione della mosca della frutta, mango e papaia nelle Hawaii sono stati infestati da un noto basso numero di larve di Bactrocera dorsalis . L'applicabilità del metodo è stata testata sul campo su guava naturalmente infestata da B. dorsalis per valutare il metodo nelle condizioni sperimentate dai lavoratori durante un programma di emergenza di mosca della frutta. Sia nelle prove sul campo che in laboratorio, l'ammucchiatura e la setacciatura della polpa erano più efficienti (richiedevano meno tempo) e più sensibili (più larve trovate) rispetto al taglio della frutta. Far galleggiare la polpa in una soluzione di acqua di canna zuccherata ha aiutato a rilevare le prime larve instar. Mushing e setacciare la polpa di frutta di importanti ospiti tefritidi può aumentare la probabilità di rilevare larve durante i programmi di emergenza.

Aumentare il rilevamento di moscerini della frutta tefritidi immaturi sul campo può innescare sforzi tempestivi per eliminare le popolazioni di questi parassiti distruttivi. Rilevare le larve tardive è più veloce e più preciso quando si mushing frutta ospite in un sacchetto e si passa la polpa attraverso una serie di setacci rispetto al taglio manuale e all'ispezione visiva.

Setacciare la polpa della frutta per rilevare moscerini della frutta tefritidi immaturi sul campo

Fruit flies of the Tephritidae family are among the most destructive and invasive agricultural pests in the world. Many countries undertake expensive ...

Stiamo sviluppando un metodo per trovare larve di moscerino della frutta tefritide che è più veloce e più preciso dell'attuale metodo di taglio e ispezione visiva di ogni frutto. Vogliamo sviluppare una tecnica semplice che possa essere utilizzata sul campo per lavorare grandi quantità di frutta. Una sfida di questo studio è stata trovare frutti con una bassa infestazione, che probabilmente rappresenterebbe ciò che vediamo durante un programma di emergenza o di eradicazione.Poiché non possiamo vedere nel frutto, usiamo metodi per infestare artificialmente ospiti chiave con un basso numero di larve. Sia nelle prove sul campo che in laboratorio, l'ammucchiatura e la setacciatura della polpa richiedono meno tempo e sono state trovate più larve che frutta da taglio. Far galleggiare la polpa in una soluzione di acqua zuccherata ha aiutato a rilevare le prime larve instar.Mushing e setacciare la polpa di frutta di importanti ospiti tefritidi può aumentare la probabilità di rilevare larve durante i programmi di emergenza. Continueremo a ottimizzare il protocollo per determinare la dimensione ottimale del setaccio per diverse specie di moscerini della frutta regolati e stabilire criteri come il tipo di frutta, la quantità di frutta, eccetera, che aiuteranno a decidere se l'uso del metodo di distruzione larvale o il taglio standard della frutta è giustificato.

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Studiare Aggressione in Drosophila (moscerino della frutta)

Fopius arisanus è un uovo-parassitoide larvale di moscerini della frutta Tephritid che viene utilizzato con successo nel controllo biologico di questi parassiti importanti tropicale. Descriviamo qui un protocollo ottimizzato per l'allevamento di F. arisanus su piccola scala con materiali facilmente reperibili.

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In questo articolo video, descriviamo un test automatico per misurare l'effetto della fame o sazietà su olfattiva dipende comportamento di ricerca di cibo nel frutto adulto Drosophila melanogaster.

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Un metodo per l'allevamento di Drosophila melanogaster in condizioni axeniche e gnotobiotic è presentato. Fly embrioni vengono dechorionated in ipoclorito di sodio, trasferiti asetticamente alla dieta sterili, e allevati in contenitori chiusi. Inoculando dieta ed embrioni con i batteri porta ad associazioni gnotobiotic, e la presenza di batteri è confermata dalla placcatura di tutto il corpo omogenati Drosophila.

Allevamento la mosca della frutta<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Sotto axeniche e Gnotobiotic Condizioni

Qui vi presentiamo un metodo per misurare i livelli di grasso organismal nel terzo instar (L3) stadio larvale di Drosophila melanogaster. Questo metodo sfrutta la relativamente bassa densità di tessuto adiposo a distinguere tra le larve con depositi di grasso alterati. analisi di galleggiabilità-based è uno strumento prezioso per lo screening rapido, riproducibile, ed economico.

Un metodo galleggiabilità a base della determinazione dei livelli di grasso nel<em&gt; Drosophila</em

Descritto qui è l'uso di diversi strumenti fatti in casa per trasferire, raffreddare e uccidere la Drosophilaadulta , così come per pulire fiale di cultura del vetro e raccogliere le uova. Questi strumenti sono facili da realizzare e sono piuttosto efficienti nella gestione della Drosophila.

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Presentato qui è un protocollo per determinare il numero di tripidi e piccoli predatori di insetti pirata nelle colture in più date negli esperimenti sul campo. Anche illustrato è come determinare l'efficacia delle tattiche di gestione contro i tripidi e valutare i benefici della predazione da bug pirata minuto.

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Presentiamo un protocollo per un saggio di alimentazione a due scelte per le mosche. Questo test di alimentazione è veloce e facile da eseguire ed è adatto non solo per la ricerca di laboratorio su piccola scala, ma anche per schermi comportamentali ad alta produttività nelle mosche.

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Scopri un metodo di setacciamento della polpa fruttata per rilevare larve di moscerini della frutta tefritidi sul campo. Questa tecnica più rapida e accurata migliora la gestione dei parassiti e supporta gli sforzi di eradicazione.

Setacciare la polpa della frutta per rilevare moscerini della frutta tefritidi immaturi sul campo

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