Fabbricazione e incapsulamento di sferoidi tumorali in idrogel di polietilenglicole per lo studio delle interazioni sferoide-matrice
September 22nd, 2023
Qui, presentiamo un protocollo che consente la fabbricazione rapida, robusta ed economica di sferoidi tumorali seguita dall'incapsulamento dell'idrogel. È ampiamente applicabile in quanto non richiede attrezzature specializzate. Sarebbe particolarmente utile per esplorare le interazioni sferoide-matrice e costruire modelli di fisiologia o patologia tissutale in vitro .
Il nostro laboratorio si concentra sulla progettazione di modelli di idrogel in vitro per l'incapsulamento steroideo del glioblastoma per imitare il microambiente extracellulare del tumore. Con tali modelli vengono studiati il substrato efficace, le proprietà meccaniche e biochimiche sulla vitalità, la circolarità, la staminalità e la diffusione delle cellule steroidee. Le attuali sfide sperimentali nello sviluppo di moduli tumorali ruotano attorno al desiderio di complessità per imitare tutti gli aspetti del microambiente tumorale per rilevanza fisiologica, e anche al desiderio di semplicità per rendere il modello accessibile, robusto, a basso costo e facile da usare e compatibile con gli approcci di screening multiplex.
Presentiamo un protocollo che consente la fabbricazione rapida, robusta e a basso costo di steroidi tumorali e l'incapsulamento in idrogel realizzati per imitare il microambiente tumorale. Il modello non richiede alcuna attrezzatura specializzata. Sarà particolarmente utile per esplorare le interazioni della matrice steroidea nella costruzione di modelli di fisiologia o patologia tissutale in vitro.
Comprendere le interazioni tra le cellule tumorali del glioblastoma e il loro microambiente può incoraggiare lo sviluppo di nuove terapie per trattare meglio questo cancro. Inoltre, lo sviluppo di un modello in vitro per il cancro del glioblastoma può migliorare lo sviluppo di questo modello per altre malattie tumorali.
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Panoramica
Questo articolo presenta un protocollo per la fabbricazione rapida ed economica di sfere tumorali, seguite dalla loro incapsulazione in idrogel. Il metodo è progettato per imitare il microambiente extracellulare del tumore ed è accessibile senza attrezzature specializzate.
Componenti chiave dello studio
Area della scienza
- Neuroscienze
- Biologia
- Modellazione in vitro
Contesto
- Gli attuali modelli tumorali spesso mancano di rilevanza fisiologica.
- È necessaria complessità per imitare il microambiente tumorale.
- I modelli devono anche essere semplici, robusti e a basso costo.
- L'incapsulazione in idrogel può migliorare lo studio delle interazioni sfera-matrice.
Obiettivo dello studio
- Sviluppare un protocollo per la fabbricazione di sfere tumorali.
- Esplorare le interazioni sfera-matrice.
- Creare modelli in vitro per la fisiologia o patologia dei tessuti.
Metodi utilizzati
- Fabbricazione di sfere tumorali.
- Tecniche di incapsulazione in idrogel.
- Valutazione della vitalità e morfologia delle sfere.
- Valutazione delle proprietà meccaniche e biochimiche dei substrati.
Risultati principali
- Il protocollo consente una produzione rapida e robusta di sfere.
- L'incapsulazione in idrogel imita efficacemente il microambiente tumorale.
- Il metodo è a basso costo e non richiede attrezzature specializzate.
- Facilita lo studio di interazioni complesse tra sfere e matrice.
Conclusioni
- Questo protocollo è uno strumento prezioso per i ricercatori in biologia tumorale.
- Supporta lo sviluppo di modelli in vitro più fisiologicamente rilevanti.
- L'approccio può migliorare la comprensione delle dinamiche tumorali e delle risposte al trattamento.
Domande frequenti
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:21
Fabrication of Square Pyramidal Microwells for Tumor Spheroid Fabrication
3:42
Multicellular Tumor Spheroid Formation, Harvest, and Encapsulation in Hydrogels
7:08
Immunofluorescence Fixation, Staining, and Clearing of Encapsulated Spheroidsfor Confocal Microscopy
