Trapianto ortotopico di fegato di successo nei topi che utilizzano l'angiografia con tomografia microcomputerizzata
September 22nd, 2023
In questo protocollo, discutiamo l'implementazione di un modello di trapianto ortotopico di fegato (OLT) di successo nei topi. Inoltre, vengono discussi anche gli adiuvanti per analizzare ulteriormente la pervietà dell'allotrapianto dopo il successo dell'OLT in un topo, in particolare utilizzando scansioni di tomografia microcomputerizzata (microCT).
Il trapianto è spesso l'unica terapia efficace per la malattia d'organo allo stadio terminale. Per comprendere i complessi meccanismi inerenti al danno del trapianto nel fegato, sono stati sviluppati robusti modelli di trapianto di piccoli animali per ricapitolare la fisiologia e la fisiopatologia del danno da allotrapianto. Dovranno essere sviluppate strategie innovative per indagare in profondità i percorsi meccanicistici coinvolti nel danno tissutale osservato nel trapianto e per espandere il pool di donatori.
L'uso dei topi per studiare il trapianto è fondamentale in quanto consente l'uso di linee di topi geneticamente modificati e transgenici per studiare il ruolo di specifici percorsi molecolari sulla fisiopatologia del danno da allotrapianto. Ci sono una serie di sfide tecniche con il trapianto di fegato di topo, tra cui il piccolo diametro dell'anastomosi vascolare e il conseguente rischio di trombosi che porta al fallimento dell'allotrapianto. Sebbene siano state impiegate molte tecnologie come l'angiografia a ultrasuoni, la tomografia microcomputerizzata presenta vantaggi tra cui la capacità di ottenere immagini ad alta risoluzione dell'anastomosi vascolare in tutto l'addome.
Questi studi possono essere eseguiti longitudinalmente per valutare la pervietà vascolare e la profusione del fegato nel tempo. Ci sono molte sfide nell'eseguire studi di microangiografia TC accurati e chiari nei roditori. Abbiamo scoperto che l'uso del gating cardiaco e la regolazione delle concentrazioni di isoflurano per ridurre la frequenza respiratoria producono le immagini più chiare.
Abbiamo anche scoperto che l'utilizzo di tempi di contrasto specifici per roditori per fasi specifiche ha anche migliorato la visualizzazione.
Panoramica
Questo protocollo delinea un modello per il trapianto di fegato ortotopico (OLT) di successo nei topi, concentrandosi sull'uso di scansioni di microtomografia computerizzata (microCT) per analizzare la pervietà dell'allotrapianto dopo il trapianto.
Componenti chiave dello studio
Area della scienza
- Biologia dei trapianti
- Modelli di piccoli animali
- Imaging con microtomografia computerizzata
Sfondo
- Il trapianto è una terapia critica per la malattia d'organo in fase terminale.
- I modelli murini sono essenziali per studiare i meccanismi di danno dell'allotrapianto.
- La microCT offre immagini ad alta risoluzione per valutare l'anastomosi vascolare.
- Esistono sfide tecniche nell'esecuzione del trapianto di fegato nei topi.
Obiettivo dello studio
- Sviluppare un modello affidabile per OLT nei topi.
- Utilizzare la microCT per valutare la pervietà dell'allotrapianto.
- Affrontare le sfide nelle tecniche di imaging e chirurgiche.
Metodi utilizzati
- Trapianto di fegato ortotopico nei topi.
- Imaging microCT per la valutazione vascolare.
- Gating cardiaco e aggiustamenti di iso fluorine per un'imaging più chiara.
- Protocollo chirurgico dettagliato per il prelievo e il trapianto del fegato.
Principali risultati
- Implementazione di successo di OLT in un modello murino.
- La microCT ha fornito immagini chiare delle strutture vascolari.
- Le tecniche perfezionate hanno migliorato la qualità dell'imaging e la valutazione dell'allotrapianto.
- Identificati i passaggi chiave nelle procedure chirurgiche per migliorare i tassi di successo.
Conclusioni
- Il modello stabilito è efficace per studiare il trapianto di fegato.
- La microCT è uno strumento prezioso per monitorare la pervietà dell'allotrapianto.
- Il continuo perfezionamento delle tecniche migliorerà gli studi futuri.
Domande frequenti
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:39
Midline Laparotomy Surgery in Donor Mice for Orthotopic Liver Transplantation
4:16
Midline Laparotomy Surgery in Recipient Mice for Orthotopic Liver Transplantation
6:45
Mouse MicroCT Angiography Imaging to Evaluate Allograft Patency and Durability of Anastomoses After Liver Transplantation
