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DOI: 10.3791/66164-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Descriviamo un protocollo per lo xenotrapianto nel tuorlo di embrioni trasparenti di zebrafish ottimizzato con un metodo di stadiazione semplice e rapido. Le analisi post-iniezione includono la sopravvivenza e la valutazione del carico di malattia delle cellule xenotrapiantate mediante citometria a flusso.
Cerchiamo di ottenere informazioni molecolari sul controllo dell'emopoiesi normale e maligna e quindi di sfruttare tali informazioni per sviluppare nuove terapie per il trattamento dei tumori del sangue. Gli xenotrapianti tumorali sono uno strumento indispensabile per valutare l'impatto di un'alterazione genetica o di un trattamento sul comportamento del tumore. Tuttavia, gli xenotrapianti di topi sono costosi, richiedono tempo e hanno una portata limitata.
L'uso del pesce zebra per lo xenotrapianto tumorale supera tutti questi inconvenienti. In questo protocollo, dimostriamo un processo di montaggio facile e rapido per lo xenotrapianto, che aumenta la produttività. Utilizziamo inoltre la colorazione cellulare per conoscere la qualità dell'inoculo e quindi la citometria a flusso per valutare la progressione del tumore valutando o quantificando il carico di malattia.
Intendiamo utilizzare questo approccio per identificare nuovi modi per bloccare la funzione della cascata chinasica Ras/MAP, che guida la stragrande maggioranza dei tumori umani. E lo faremo non cercando di bloccare l'attività catalitica della cascata della chinasi Ras/MAP, ma piuttosto impedendo la sua capacità di fosforilare quei substrati cancerogeni che modifica.
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