Name: Un modello di ustione suina per studiare il processo di guarigione nelle ferite da ustione di profondità multipla (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-02-23T13:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 49 s
Description: Scopri un modello di ustione multi-profondità su maiali Yucatan per studiare la guarigione delle ferite da ustione. Questo protocollo standardizzato permette di riprodurre lesioni simili a quelle umane con follow-up a lungo termine.

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<meta charset="utf8"></head><body>Yucatan Minipig Burn Wound Model per l'analisi delle ustioni multi-profondità

<table><tbody><tr><td>Pinza per tessuti</td><td>Adson Jarit</td><td>130-234</td><td></td></tr><tr><td>Perline di alluminio</td><td>Armatura da laboratorio</td><td>42370-002</td><td>Perline per armature da laboratorio&nbsp;</td></tr><tr><td>Buprenorfina cloridrato</td><td>Ranbaxy Pharmaceuticals</td><td>NDC: 12469-0757-01</td><td>Buprenex</td></tr><tr><td>carprofene</td> iniettabile <td>Pfizer</td><td>NADA 141-199</td><td>Rymadyl 50mg / ml iniettabile&nbsp;</td></tr><tr><td>Blocco cilindrico in ottone</td><td>Fatto a mano</td><td>N/A</td><td>Disegno ingegneristico incluso nel manoscritto</td></tr><tr><td>Penna dermografica</td><td>McKesson</td><td>Surgical Skin Marker Sterile</td><td></td></tr><tr><td>Monouso #15 bisturi chirurgici</td><td>Medline</td><td>MDS15315</td><td>Lame per bisturi</td></tr><tr><td>Cerotto al fentanil</td><td>Mylan</td><td>NDC:60505-7082</td><td>Fentanyl Transdermal System</td></tr><tr><td>Isoflurane&nbsp;</td><td>Piramal</td><td>NDC:66794-013-25</td><td>Isoflurano, USP</td></tr><tr><td>McPherson Pinze per coagulazione bipolare</td><td>Bovie</td><td>A842</td><td>Punzoni</td></tr><tr><td>per biopsia assortiti Miltex riutilizzabili e autoclavabili (3,4 e 5 mm)</td><td>Punzoni</td> per biopsia Integra <td>33-38</td><td>- dimensioni per adattarsi allo studio</td></tr><tr><td>Garza non tessuta</td><td>Starryshine</td><td>GZNW22</td><td>2 x 2" garza medica a 4 strati in tessuto non tessuto</td></tr><tr><td>Povidone-Iodio</td><td>Betadine</td><td>NDC:0034-9200-88</td><td>Scrub chirurgico 7,5%&nbsp;</td></tr><tr><td>Soluzione sterile di cloruro di sodio isotonico 0,9%</td> <td>Aqualite System</td><td>RL-2095</td><td>Soluzione salina sterile</td></tr><tr><td>Inchiostro per tatuaggi</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>Nero - 2 oz - #9053</td><td></td></tr><tr><td>Tatuaggio pennarello</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>Special Electric Tattoo Marker</td><td></td></tr><tr><td>Ago per tatuaggi</td><td>Spaulding & Rogers</td><td>1310251</td><td>Tattoo Ago a 5 punte</td></tr><tr><td>Tegaderm Transparent Film Dressing</td><td>3M</td><td>1.628</td><td>Medicazione adesiva trasparente grande</td></tr><tr><td>Piastra riscaldante a temperatura controllata</td><td>Cole-Parmer</td><td>03407-11</td><td>Agitatore con piastra riscaldante StableTemp</td></tr><tr><td>Termometro</td><td>American Scientific</td><td>U14295</td><td>Termometro a mercurio a tubo</td></tr><tr><td>Tiletamina e zolazepam cloridrato</td><td>Zoetis</td><td>NDC:54771-9050</td><td>Tintura</td></tr><tr><td>di Telazol di Benzoino Spray</td><td>Smith& Nephew</td><td>407000</td><td>Spray per strato adesivo</td></tr><tr><td>Unguento antibiotico triplo</td><td>Fougera</td><td>NDC 0168-0012-31</td><td>Unguento antibiotico triplo</td></tr><tr><td>Rasato tubolare</td><td>Medline</td><td>NONNET02</td><td>Curad Medline Reti elastiche senza lattice</td></tr><tr><td>Coperta riscaldante</td><td>3M</td><td>Bair Hugger 750 unità</td><td></td>di riscaldamento</tr><tr><td>Xeroform Striscia di garza occlusiva</td><td>Covidien</td><td>8884433301</td><td>Medicazioni per ferite in vaselina</td></tr><tr><td>Xeroform Xilazina</td><td>Vetone</td><td>NDC:13985-704-10</td><td>AnaSed LA</td></tr><tr><td>Yucat. n maialini (femmina, 30 kg)</td><td>Sinclair Bio Resources</td><td>N/A Pigmentazione</td><td>completa&nbsp;</td></tr></tbody></table>

un modello di ustione suina per studiare il processo di guarigione nelle ferite da ustione di profondità multipla

A Swine Burn Model for Investigating the Healing Process in Multiple Depth Burn Wounds

Le figure 2A, B mostrano i risultati di ustioni multiple sul dorso di un maialino di Yucatàn. Le ferite (I) e (VII) sono ferite di controllo (37 °C). Ferite di secondo grado (II; III e VIII) si presentano con arrossamento intenso e vesciche. Al contrario, le ferite di terzo grado (IV; V; e VI) sono pallide e indurite alla palpazione. Va notato che la ferita VIII sembra intermedia tra il secondo e il terzo grado: ai fini di uno studio in corso, abbiamo aumentato il tempo di contatto a 45 s a 65 gradi. La Figura 2C mostra l'aspetto delle ferite dopo l'escarotomia il giorno 3 postoperatorio. È stata eseguita una vescictomia sulle ferite di secondo grado e sulle ferite di terzo grado è stata eseguita l'escissione "in blocco" del tessuto bruciato indurito, al fine di creare un letto di ferita vitale per la guarigione secondaria. Una cauterizzazione minima del plesso dermico è stata eseguita se l'emorragia non si è fermata spontaneamente. Le figure 2D-F mostrano l'aspetto delle ferite in momenti successivi (rispettivamente 2ª settimana, 3ª e 7ª settimana).
I risultati istologici sono mostrati nella Figura 3 (H&amp;E, 5,5x e 20x). La cute di controllo (Figura 3A, B) mostra un'epidermide intatta (staffa blu), compreso uno strato corneo (freccia blu) aderente al resto del tessuto cutaneo. Il derma presenta eosinofilia omogenea di colore rosa pallido (collagene e fibre elastiche - asterisco rosso). Le ustioni di secondo grado (Figura 3D, E) rivelano la perdita dello strato corneo rispetto ai controlli (piano di scissione, corrispondente alle vesciche). Il derma superficiale mostra eosinofilia più forte e fessure/fratture all'interno delle strutture dermiche (frecce blu). I vasi sanguigni profondi sono preservati (freccia rossa). Le ustioni di terzo grado (Figura 3G, H) mostrano lesioni estese con aumento dell'eosinofilia del derma fino a gravi fratture dermiche (frecce blu), che raggiungono il derma profondo fino all'ipoderma (vacuità degli adipociti, asterisco verde). Infine, la colorazione tricromica (Figura 3C,F,I) consente una migliore valutazione del tessuto connettivo. Utilizza le differenze di colorabilità del collagene denaturato a caldo per mostrare la profondità di combustione. La Figura 3C mostra chiaramente le caratteristiche blu nel derma intatto della biopsia della ferita di controllo con lo strato epidermico superiore. Ciò è in contrasto con l'ustione di secondo grado (Figura 3F), in cui la perdita dell'epitelio è accompagnata dalla denaturazione del collagene nello strato superiore del derma (asterisco bianco). Infine, la ferita di terzo grado (Figura 3I) mostra la perdita dello strato epidermico con un'estesa colorazione rossa (freccia gialla) dello strato dermico, indicando la completa denaturazione del collagene in questo strato della pelle.
<img alt="Diagramma sperimentale del modello di ustione; Blocco in ottone riscaldato per l'induzione controllata delle lesioni termiche." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Figura 1: Posizionamento della sala operatoria, configurazione del dispositivo di combustione e disegno dello studio. L'animale viene anestetizzato, intubato, ventilato e posto supino. Il blocco di ottone viene posto nel contenitore preriscaldato riempito con perline di alluminio +/- acqua. Un termometro è posizionato centralmente nel blocco di ottone per consentire il monitoraggio della temperatura interna. La temperatura mirata dipende dalla profondità di combustione mirata in base al disegno dello studio. Per provocare ustioni a spessore parziale, si consiglia un contatto di 30 s a 65 °C senza pressione aggiunta. Per le ustioni di terzo grado, si consiglia un contatto di 30 s a 93 °C senza pressione aggiunta. Le ustioni di secondo e terzo grado devono essere randomizzate per evitare distorsioni dovute allo spessore differenziale della pelle. La posizione della ferita pre-tatuata consente un facile monitoraggio di ogni ferita randomizzata durante il follow-up. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Grafico di progressione della guarigione delle ferite, diagramma delle biopsie cutanee circolari su diverse tonalità della pelle nel tempo." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Figura 2: Risultati rappresentativi degli aspetti della ferita a seguito di ustioni randomizzate multi-profondità in un maialino dello Yucatan. (A) La procedura del tatuaggio viene eseguita posizionandolo nella posizione di tutti gli 8 punti della ferita. Ogni sede è numerata per facilitare il monitoraggio. (B) Aspetto delle ferite successive alla creazione dell'ustione. Le ferite I e VII sono controlli e le ferite II, III e VIII sono ferite a spessore parziale. Le ferite IV, V e VI sono ferite di terzo grado. (C) Aspetto delle ferite a seguito di escarotomia delle ferite di terzo grado su POD3. È stata eseguita anche una vescictomia sulle ferite a spessore parziale. (D) Aspetto della guarigione della ferita su POD14 che mostra un letto pulito delle ferite di terzo grado (II e V) e isole di riepitelizzazione dalle appendici cutanee sulle ferite a spessore parziale (III, IV, VI, VII, VIII). (E) Aspetto del processo di guarigione della ferita su POD21 che mostra contrattura dei letti di ferita di terzo grado e ulteriore riepitelizzazione sulle ferite di secondo grado. (F) Aspetto delle ferite su POD49 che mostrano contrattura avanzata sulle ferite di terzo grado ed epitelizzazione subtotale delle ferite a spessore parziale con importante iperpigmentazione post-infiammatoria. Si prega di notare che le ferite visualizzate potrebbero presentare cicatrici nel sito della biopsia. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Istologia della guarigione delle ferite da ustione: controllo, ustioni di 2°, 3° grado. Campioni di tessuto colorato, analisi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Figura 3: Risultati istologici. Risultati rappresentativi dell'aspetto istologico delle ferite [Microscopia ottica 10x (A,C,D,F,G,I) e 20x (B,E,H); ematossilina ed eosina (A,B,D,E,G,H); Tricromia di Masson (C,F,I)]. La cute di controllo (A,B) presenta un'epidermide intatta (bracket nero), compreso uno strato corneo (freccia nera) aderente al resto del tessuto cutaneo. Il derma presenta eosinofilia omogenea di colore rosa pallido (collagene e fibre elastiche - asterisco rosso). La colorazione tricromica (C) rivela l'aspetto normale dello strato epidermico e del tessuto connettivo e delle fibre dermiche di collagene. Le ustioni di secondo grado (D,E) rivelano la perdita dello strato corneo rispetto ai controlli (piano di scissione, rimosso durante la vescictomia). Il derma superficiale mostra eosinofilia più forte e fessure/fratture all'interno delle strutture dermiche (frecce blu). I vasi sanguigni profondi sono preservati (freccia rossa). La tricromia (F) rivela la perdita dell'epitelio, accompagnata da denaturazione del collagene nello strato superiore del derma (freccia gialla). Le ustioni di terzo grado (E,F) mostrano lesioni estese con aumento dell'eosinofilia del derma fino a gravi fratture dermiche (frecce blu), che raggiungono il derma profondo fino all'ipoderma (vacuità degli adipociti, asterisco verde) e un'estesa colorazione rossa (I, freccia gialla) dello strato dermico con Trichrome, indicando la completa denaturazione del collagene. Barre di scala: A,D,G, 500 μm; B,E,H, 100 μm; C,F,I, 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig03large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Equilibrio statico; penetrazione del termometro; diagramma, configurazione, risultato; esperimento di dilatazione termica." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66362/66362fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> Figura 4: Disegno ingegneristico del blocco di ottone utilizzato per la creazione della ferita da ustione. (A) Illustrazione che mostra le dimensioni del blocco di ottone utilizzato per la costruzione del blocco. Un diametro di 40 mm consente di ottenere ferite di dimensioni ottimali e di progettare 8 ferite su un maialino Yucatan da 20-30 kg. (B) Diagramma che mostra l'aspetto finale del blocco di ottone con un tunnel centrale che consente al termometro di misurare la temperatura interna del blocco. (C) Immagine che evidenzia il blocco di ottone riscaldato a 65 °C, come visualizzato dal termometro a mercurio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66362/66362fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Un modello di ustione suina per studiare il processo di guarigione nelle ferite da ustione di profondità multipla

Burn wound healing is a complex and long process. Despite extensive experience, plastic surgeons and specialized teams in burn centers still face ...

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Per strettamente imitare la modalità delle lesioni di ustione richiede l'interazione tra l'osservazione clinica e studi in modelli animali. In questo studio, un modello di suina della ferita di ustione severa è stato istituito per valutare una medicazione sperimentale nelle impostazioni fisiologiche e patofisiologiche.

Lesione grave ustione in un modello di suina per valutazione clinica Dressing

Le ferite croniche resistenti agli antibiotici rappresentano una grave minaccia per il sistema sanitario. Le infezioni da biofilm sono ostinate e ostili e possono causare una chiusura funzionale carente della ferita. Riportiamo un modello suino clinicamente rilevante di ferite croniche a tutto spessore infette da biofilm. Questo modello è potente sia per gli studi meccanicistici che per testare gli interventi.

Modello suino di infezione da biofilm e ferite invisibili

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Modello di guarigione delle ferite da ustione simile a una scacchiera di topi basato su un dispositivo di riscaldamento digitale

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