Modello murino di ileo postoperatorio
12 luglio 2024
Descriviamo un modello murino di ileo postoperatorio generato tramite manipolazione intestinale. La funzione del transito gastrointestinale, i cambiamenti patologici e l'attivazione delle cellule immunitarie sono stati valutati 24 ore dopo l'intervento chirurgico.
Lo scopo del nostro studio è l'immunità intestinale. Stiamo cercando di illustrare la fisiopatologia e il meccanismo delle lesioni da POI per lo sviluppo di nuove terapie. Una sfida consiste nello stabilire modelli sperimentali coerenti e riproducibili di POI nel topo.
Ciò comporta il controllo di variabili come le tecniche chirurgiche e la valutazione dei protocolli nella cura degli animali per ridurre al minimo la variabilità tra i gruppi sperimentali. Un'altra sfida consiste nell'illustrare i meccanismi fisiopatologici sottostanti dei POI nel topo. Il nostro protocollo mira a stabilire un modello riproducibile con variazioni minime per lo studio della fisiopatologia dei POI e la valutazione di nuove strategie antinfiammatorie.
Il nostro obiettivo è colmare il divario tra i risultati preclinici nei modelli murini e l'esistenza di rilevanza clinica nell'uomo, aumentando così il potenziale dei risultati sperimentali per tradursi in trattamenti efficaci per i POI. Per iniziare, posizionare il topo anestetizzato sulla piattaforma chirurgica. Usa un rasoio elettrico per rimuovere i peli dall'addome.
Quindi usa un batuffolo di cotone inumidito con soluzione salina per rimuovere tutti i peli sciolti sull'addome. Estendi completamente gli arti per esporre l'addome e posiziona la testa del topo per mantenere libere le vie aeree. Quindi, utilizzando un batuffolo di cotone imbevuto di alcol al 75%, disinfettare due volte la pelle dell'area chirurgica.
Successivamente, utilizzare una garza medica sterile asciutta per rimuovere l'alcol in eccesso dall'addome. Quindi, fai un'incisione attraverso la pelle. Usando una pinzetta, solleva il muscolo retto dell'addome al centro dell'addome e fai una piccola incisione lungo la linea mediana.
Assicurarsi che il margine superiore dell'incisione sia da sei a otto millimetri dal processo xifoideo dello sterno e il margine inferiore sia da sei a otto millimetri dai genitali esterni. Quindi posizionare una garza preinumidita con soluzione fisiologica normale su entrambi i lati dell'incisione addominale. Fissare la garza con una pinza emostatica sui bordi superiore e inferiore dell'incisione per esporla.
Dopo aver fissato correttamente la garza, premere delicatamente contro entrambi i lati della parete addominale con due tamponi di cotone inumiditi con soluzione salina. Quindi spremere una piccola quantità di tubo intestinale attraverso l'incisione e posizionarlo sulla garza per esporlo. Individua il cieco.
E togli l'intestino con tamponi di cotone inumiditi con soluzione salina fino a due centimetri prima dello stomaco per evitare di toccare il pancreas. Estendere l'intestino dall'estremità prossimale del legamento pancreaticoduodenale all'estremità distale della regione ileocecale. Quindi applicare una pressione costante lungo l'intero intestino tenue dal prossimale al distale per cinque minuti fino a quando non emergono piccole macchie sanguinanti.
Successivamente, utilizzare tamponi di cotone pre-inumiditi per riposizionare con cura tutto l'intestino tenue nella cavità addominale. Quindi massaggiare delicatamente l'addome sulla garza e sulla parete addominale per tre-cinque secondi per garantire la normale posizione intestinale e prevenire l'ostruzione o la torsione post-operatoria. Successivamente, iniettare 100 microlitri di soluzione salina nella cavità addominale per sostituire i liquidi persi e lubrificare il tessuto addominale.
Quindi rimuovere la garza ed eseguire una chiusura a due strati in corrispondenza dell'incisione addominale. Dopo la sutura, strofinare delicatamente l'area vicino all'incisione addominale con una garza medica sterile asciutta per mantenerla asciutta e pulita da sangue, liquido tissutale o soluzione fisiologica. Applicare una piccola quantità di adesivo per incisioni mediche su e intorno all'incisione per evitare spaccature dopo l'intervento chirurgico.
Una volta che l'adesivo si è asciugato, posizionare il mouse su una coperta riscaldata a 37,5 gradi Celsius e monitorare il mouse fino a quando non si riprende completamente.
Panoramica
Questo studio presenta un modello murino di ileo postoperatorio (POI) generato mediante manipolazione intestinale. La ricerca si concentra sulla comprensione dell'immunità intestinale e della patofisiologia del POI al fine di sviluppare nuove terapie.
Componenti Chiave dello Studio
Ambito Scientifico
- Neuroscienze
- Gastroenterologia
- Immunologia
Sfondo
- L'ileo postoperatorio è una complicanza comune dopo un intervento chirurgico.
- La creazione di modelli sperimentali riproducibili nei topi è una sfida.
- Il controllo delle tecniche chirurgiche e dei protocolli di cura degli animali è fondamentale.
- Comprendere i meccanismi alla base dell'ileo postoperatorio è essenziale per lo sviluppo di terapie.
Scopo dello studio
- Illustrare la patofisiologia delle lesioni da IOP.
- Sviluppare nuove strategie antinfiammatorie.
- Stabilire un modello uniforme per lo studio dell'IOP.
Metodi Utilizzati
- Manipolazione intestinale per indurre il IO post-operatorio nei topi.
- Valutazione della funzione del transito gastrointestinale.
- Valutazione dei cambiamenti patologici.
- Analisi dell'attivazione delle cellule immunitarie a 24 ore dall'intervento chirurgico.
Risultati principali
- Stabilimento con successo di un modello murino per l'ileo postoperatorio (POI).
- Documentate alterazioni della funzione del transito gastrointestinale.
- Identificate alterazioni patologiche associate al POI.
- Osservata l'attivazione delle cellule immunitarie a seguito dell'intervento chirurgico.
Conclusioni
- Il modello fornisce una piattaforma per lo studio dei meccanismi dell'insufficienza ovarica primaria (POI).
- Può facilitare la valutazione di nuove strategie terapeutiche.
- Sono necessarie ulteriori ricerche per esplorare le implicazioni dei risultati.
Domande frequenti
Rilevanza Industriale del Progetto
Modelli murini riproducibili di ileo postoperatorio (POI) sono essenziali per ridurre i rischi nella fase iniziale della scoperta di terapie anti-infiammatorie e pro-motilità mirate alla disfunzione gastrointestinale dopo interventi chirurgici. Questo modello permette l'analisi meccanicistica delle vie neuronali, epiteliali e immunitarie coinvolte nel POI, sostenendo una previsione affidabile per il progresso traslazionale. Risultati sperimentali costanti facilitano la selezione e la priorizzazione del portafoglio di interventi candidati per il recupero gastrointestinale.
Applicazioni Strategiche nella Ricerca e Sviluppo in Biopharma
Scoperta Precoce e Validazione del Bersaglio
- Permette un'indagine sistematica della patofisiologia del disturbo intestinale postoperatorio (POI) e dei percorsi terapeutici bersagliabili.
- Supporta la validazione funzionale di potenziali bersagli coinvolti nella motilità intestinale e nell'infiammazione.
- Facilita la riduzione del rischio meccanicistico isolando i contributi neuronali, epiteliali e immunitari al POI.
- Fornisce una piattaforma per la valutazione basata su ipotesi di nuove strategie terapeutiche.
Sviluppo di screening e saggi
- Fornisce un sistema standardizzato in vivo per la valutazione quantitativa del transito gastrointestinale e della patologia tissutale.
- Permette la misurazione riproducibile dell'infiltrazione di cellule immunitarie e dell'integrità della barriera epiteliale.
- Supporta lo sviluppo di saggi per lo screening di composti antinfiammatori o pro-motilità in un contesto rilevante per la malattia.
- Consente confronti tra studi e scalabilità nella valutazione preclinica di composti.
Ricerca Translazionale e Preclinica
- Allinea i risultati preclinici ai meccanismi clinici di POI, migliorando la continuità traslazionale.
- Permette l'avanzamento dei candidati con efficacia dimostrata in modelli in vivo pertinenti, adeguato al rischio.
- Supporta la scoperta e la validazione di biomarcatori per lesioni gastrointestinali e recupero.
- Collega le informazioni meccanicistiche provenienti da modelli murini allo sviluppo di terapie umane.
Integrazione di Pipeline e Flusso di Lavoro
Questo modello murino di POI si inserisce nel percorso dalla scoperta alla fase preclinica, supportando la validazione degli obiettivi terapeutici, l'identificazione di composti promettenti e la ricerca traslazionale per farmaci gastrointestinali.
- Biologia della scoperta: Fornisce un sistema controllato per la verifica delle ipotesi e la chiarificazione meccanicistica del POI.
- Screening: Offre letture quantitative del transito gastrointestinale e dell'attivazione immunitaria per la valutazione dei composti.
- Analisi: Consente il confronto statistico degli effetti delle interazioni sulla motilità e sulla patologia tissutale.
- Ricerca traslazionale: Facilita l'allineamento dell'efficacia preclinica con gli endpoint clinici nel POI.
- Riutilizzo aziendale: Funge da piattaforma riutilizzabile per test iterativi di diverse modalità terapeutiche rivolte al POI.
Impatto Operativo ed Aziendale
- Valore scientifico: Aumenta la fiducia predittiva e riduce l'ambiguità meccanicistica nella ricerca del bersaglio d'interesse (POI).
- Valore operativo: Standardizza le procedure sperimentali e migliora la riproducibilità tra gli studi.
- Valore strategico: Guida le decisioni di avanzamento o interruzione e ottimizza l'allocazione delle risorse nei programmi terapeutici per l'ingegneria genica (GI).
- Impatto sul portafoglio: Supporta la priorizzazione e la progressione di candidati con potenziale traslazionale, adeguata al rischio.
Considerazioni sull'implementazione
- Richiede competenze nelle tecniche chirurgiche su modelli murini e nella gestione postoperatoria.
- Richiede l'accesso a infrastrutture per la rilevazione della fluorescenza, l'istologia e la citometria a flusso.
- Necessita di una rigorosa standardizzazione dei protocolli chirurgici e di valutazione tra i diversi gruppi.
- Potrebbe richiedere adattamenti per diverse linee di topi o per diversi endpoint sperimentali.
- Un controllo accurato delle variabili procedurali è fondamentale per ridurre al minimo la variabilità tra i gruppi.
