Analisi degli elettrocardiogrammi e del comportamento nei topi dalla gravidanza al periodo di allattamento

La nostra ricerca si concentra sui cambiamenti fisiologici nelle madri dalla gravidanza all'allattamento e su come influenzano il comportamento materno e lo sviluppo dei suoi cuccioli. Cerchiamo di determinare come la fisiologia di una madre si adatta per sostenere la crescita e lo sviluppo sani della sua prole. L'implementazione dei territori nel topo gravido consente il monitoraggio continuo dell'ECG dalla gravidanza all'allattamento, fornendo una visione dell'attività automatica durante un evento riproduttivo. Questo metodo si traduce in osservazioni del comportamento più naturali e le registrazioni ECG simultanee offrono una chiara comprensione del cambiamento della fisiologia materna.

La nostra ricerca ha migliorato i metodi chirurgici e i metodi di osservazione dei topi, rendendo possibile monitorare i topi per lungo tempo.

La nostra ricerca ci aiuta a capire come la risposta fisica della madre durante la gravidanza e l'allattamento in termini di attività automatica. La nostra ricerca potrebbe portare a una migliore cura materna e al supporto per lo sviluppo dei cuccioli e potrebbe ispirare nuovi approcci per studiare la riproduzione, non solo negli animali, ma anche negli esseri umani.

In futuro, abbiamo in programma di indagare dove le madri che hanno commesso infanticidio o negligenza nell'ambiente naturale hanno differenze nell'attività autonomica e nel comportamento materno dalla gravidanza all'allattamento rispetto alle madri normali. Riteniamo che questo protocollo sarà utile anche per comprendere i fattori alla base dell'abbandono e dell'infanticidio.

[Istruttore] Per iniziare, posizionare il mouse anestetizzato in posizione prona sul riscaldatore del pannello. Usando le forbici, praticare un'incisione cutanea tra le orecchie, quindi inserire una pinza nell'incisione per separare la pelle e il muscolo intorno al collo e al lato ventrale, creando uno spazio per il posizionamento del telemetro. Ora inserisci il telemetro attraverso l'incisione tra le orecchie e posizionalo nello spazio creato sul lato ventrale. Utilizzare una pinza per arrotolare e raggruppare gli elettrocateteri positivo e negativo del telemetro e posizionare questi elettrocateteri nello spazio del collo. Per chiudere l'incisione, utilizzare un ago da 13 millimetri e una sutura da 20 centimetri. Quindi, posiziona il mouse in posizione supina. Usando le forbici, fai una piccola incisione intorno alla pelle della clavicola e separa i muscoli dalla pelle del collo. Con una pinza, estrarre gli elettrocateteri positivo e negativo dalla parte posteriore del collo. Quindi separare delicatamente le ghiandole salivari per esporre l'aspetto a forma di V del muscolo sternocleidomastoideo. Successivamente, regolare la lunghezza dell'elettrocatetere negativo in modo che raggiunga il muscolo sternocleidomastoideo vicino alla clavicola e rimuovere con cautela il tubo dell'elettrocatetere dall'elettrocatetere negativo. Ora passa l'ago da cucitura con una sutura di 10 centimetri attraverso la curva a forma di V del muscolo sternocleidomastoideo per creare un anello. Infilare l'elettrodo in acciaio inossidabile dal cavo negativo attraverso questo anello e posizionarlo sotto il muscolo vicino alla clavicola. Legare leggermente l'anello per fissare l'elettrodo in acciaio inossidabile senza danneggiare il muscolo sternocleidomastoideo. Inoltre, posizionare una seconda sutura sul lato cranico del muscolo e legarla attorno al tubo dell'elettrocatetere negativo per fissarla. Successivamente, sezionare il processo xifoideo e separare accuratamente la pelle dal muscolo tra il processo xifoideo e la clavicola. Quindi estendere l'elettrocatetere positivo per raggiungere il processo xifoideo. Rimuovere il tubo di derivazione dal cavo positivo, assicurandosi che l'elettrodo in acciaio inossidabile a spirale all'interno sia allungato utilizzando una pinzetta fine. Quindi, usa un ago calibro 18 per creare un tunnel sotto il muscolo attorno al processo xifoideo. Quindi posizionare l'elettrodo in acciaio inossidabile in un ago e farlo passare attraverso il muscolo attorno al processo xifoideo. Dopo aver rimosso l'ago, utilizzare un ago da cucitura con una sutura di 10 centimetri per suturare leggermente l'elettrodo in acciaio inossidabile a spirale al muscolo attorno al processo xifoideo. Per fissare ulteriormente l'elettrocatetere positivo, posizionare una seconda sutura sul lato cranico del processo xifoideo e legarla attorno al tubo dell'elettrocatetere positivo. Utilizzando un ago da cucitura con una sutura di 20 centimetri, chiudere tutte le incisioni. Dopo l'impianto, metti il topo in una gabbia pulita. Per iniziare, posiziona il mouse con il telemetro nella gabbia e posiziona la gabbia sulla base a T che funge da ricevitore per la telemetria del mouse. Accendere il computer registrabile e utilizzare l'applicazione software di analisi dei dati installata per raccogliere i dati dell'elettrocardiogramma dal mouse. Quindi, utilizzando l'applicazione della cartella clinica sul computer registrabile, registrare l'elettrocardiogramma. Per analizzare i dati dell'elettrocardiogramma, avviare LabChart e aprire il file di dati per il periodo di registrazione. Fare clic sul pulsante HRV e regolare di conseguenza le impostazioni di rilevamento del battito per analizzare la variabilità della frequenza cardiaca. Quindi fare clic sul pulsante HRV e selezionare la vista Classificatore di battiti. Scegliere tutti i battiti nella visualizzazione Classificatore battute e selezionare la visualizzazione Report dal pulsante HRV. Copiare i dati dalla visualizzazione report e incollarli in Excel per ulteriori analisi. L'analisi dell'elettrocardiogramma ha mostrato che la frequenza cardiaca diminuiva gradualmente mentre l'intervallo di frequenza respiratoria aumentava gradualmente da GD 17 a PD 21. L'analisi HRV ha mostrato che il rapporto tra le basse e le alte frequenze è aumentato bruscamente da PD 0 a PD 21.