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Saggio di migrazione in vitro in tempo reale per cellule T CD8+ murine primarie
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JoVE Journal Immunology and Infection
Real-Time In Vitro Migration Assay for Primary Murine CD8+ T Cells

Saggio di migrazione in vitro in tempo reale per cellule T CD8+ murine primarie

Full Text
2,292 Views
06:42 min
May 24, 2024

DOI: 10.3791/66580-v

Allison T. Ryan1,2, Ankit Dahal1,2, Sana Mir1,2, Minsoo Kim1,2, Kihong Lim1,2

1Department of Microbiology and Immunology,University of Rochester, 2David H. Smith Center for Vaccine Biology and Immunology,University of Rochester

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo protocollo fornisce un metodo di isolamento primario delle cellule T murine e la microscopia time-lapse della migrazione delle cellule T in specifiche condizioni ambientali con analisi quantitativa.

L'obiettivo della nostra ricerca è comprendere i modelli di migrazione delle cellule T in condizioni ambientali altamente definite per consentire una sperimentazione informata in vitro e decifrare le interazioni molecolari che influenzano la migrazione. L'imaging dal vivo, come la microscopia multifotone intravitale, viene utilizzato per la comprensione in vivo della cinetica delle cellule immunitarie. Ma i dispositivi microfluidici sono uno strumento in vitro comune che offre un controllo preciso sul microambiente che non può essere offerto in un campione vivo.

Il nostro protocollo ci consente di analizzare complesse vie di segnalazione e fornisce una migliore comprensione per esperimenti mirati in vitro per affrontare ulteriormente i ruoli biologici dei singoli segnali in un modo specifico per tipo di cellula. Il nostro metodo è semplice, riproducibile e di facile accesso nei laboratori di ricerca che dispongono di un microscopio a campo chiaro con una fotocamera digitale collegata. Pertanto, il nostro approccio garantisce un insieme affidabile di metodi per studiare gli eventi dinamici di migrazione cellulare.

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Parole chiavi: Migrazione delle Cellule T Risposta Immunitaria Adattativa Chemochine Recettori delle Chemochine Molecole di Adesione Saggio di Migrazione In Vitro Analisi In Tempo Reale Segnali Ambientali Isolamento delle Cellule T Analisi Assistita da Computer Interazioni Molecolari Motilità Cellulare Terapie

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