Name: Quantificazione della densità microvascolare polmonare nei topi attraverso i lobuli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min
Description: Scopri come quantificare la densità microvascolare polmonare nei topi attraverso i lobuli utilizzando la colorazione con isolectin B4 e l'analisi con ImageJ. Questo metodo affronta le variazioni anatomiche e legate all'età per una maggiore accuratezza.

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<meta charset="utf8"></head><body>Valutazione della microvascolarizzazione polmonare con colorazione con isolectina B4 nei topi

<ol><li>Jia, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fgf-2+promotes+angiogenesis+through+a+srsf1%2Fsrsf3%2Fsrpk1-dependent+axis+that+controls+vegfr1+splicing+in+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biol%22%5BJournal%5D)">Fgf-2 promotes angiogenesis through a srsf1/srsf3/srpk1-dependent axis that controls vegfr1 splicing in endothelial cells.</a> BMC Biol. 19 (1), 173(2021).</li>
<li>Schneider, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aging+lung%3A+Physiology%2C+disease%2C+and+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The aging lung: Physiology, disease, and immunity.</a> Cell. 184 (8), 1990-2019 (2021).</li>
<li>Rafii, S., Butler, J. M., Ding, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiocrine+functions+of+organ-specific+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Angiocrine functions of organ-specific endothelial cells.</a> Nature. 529 (7586), 316-325 (2016).</li>
<li>Lipskaia, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+telomerase+in+p21-positive+cells+counteracts+capillaries+rarefaction+in+aging+mice+lung%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Induction of telomerase in p21-positive cells counteracts capillaries rarefaction in aging mice lung.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
<li>Hoshino, M., Takahashi, M., Aoike, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+vascular+endothelial+growth+factor%2C+basic+fibroblast+growth+factor%2C+and+angiogenin+immunoreactivity+in+asthmatic+airways+and+its+relationship+to+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Expression of vascular endothelial growth factor, basic fibroblast growth factor, and angiogenin immunoreactivity in asthmatic airways and its relationship to angiogenesis.</a> J Allergy Clin Immunol. 107 (2), 295-301 (2001).</li>
<li>Ackermann, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vascular+endothelialitis%2C+thrombosis%2C+and+angiogenesis+in+covid-19%5BTitle%5D)+AND+%22New+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vascular endothelialitis, thrombosis, and angiogenesis in covid-19.</a> New Engl J Med. 383 (2), 120-128 (2020).</li>
<li>Wertheim, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolating+pulmonary+microvascular+endothelial+cells+ex+vivo%3A+Implications+for+pulmonary+arterial+hypertension%2C+and+a+caution+on+the+use+of+commercial+biomaterials%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Isolating pulmonary microvascular endothelial cells ex vivo: Implications for pulmonary arterial hypertension, and a caution on the use of commercial biomaterials.</a> PLoS One. 14 (2), e0211909(2019).</li>
<li>Thomas, S. M., Bednarek, J., Janssen, W. J., Hume, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air-inflation+of+murine+lungs+with+vascular+perfusion-fixation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Air-inflation of murine lungs with vascular perfusion-fixation.</a> J Vis Exp. (168), e62215(2021).</li>
<li>Ramasamy, S. K., Kusumbe, A. P., Adams, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+tissue+morphogenesis+by+endothelial+cell-derived+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of tissue morphogenesis by endothelial cell-derived signals.</a> Trends Cell Biol. 25 (3), 148-157 (2015).</li>
<li>Amersfoort, J., Eelen, G., Carmeliet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulation+by+endothelial+cells+-+partnering+up+with+the+immune+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunomodulation by endothelial cells - partnering up with the immune system.</a> Nat Rev Immunol. 22 (9), 576-588 (2022).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+role+of+pulmonary+endothelial+cell+heterogeneity+in+the+response+to+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Defining the role of pulmonary endothelial cell heterogeneity in the response to acute lung injury.</a> eLife. 9, e53072(2020).</li>
<li>Corliss, B. A., Mathews, C., Doty, R., Rohde, G., Peirce, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+label%2C+image%2C+and+analyze+the+complex+structural+architectures+of+microvascular+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Methods to label, image, and analyze the complex structural architectures of microvascular networks.</a> Microcirculation. 26 (5), e12520(2019).</li>
<li>Phillips, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+evaluating+the+murine+pulmonary+vasculature+using+micro-computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A method for evaluating the murine pulmonary vasculature using micro-computed tomography.</a> J Surg Res. 207, 115-122 (2017).</li>
<li>Chadwick, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+network+extraction+and+analysis+of+mouse+pulmonary+vasculature+via+x-ray+micro-computed+tomographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Vessel network extraction and analysis of mouse pulmonary vasculature via x-ray micro-computed tomographic imaging.</a> PLoS Comput Biol. 17 (4), e1008930(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>4% Paraformaldeide</td><td>Biosharp</td><td>BL539A</td><td>Fissativo tissutale</td></tr><tr><td>4',6-diamidino-2-fenilindolo</td><td>MCE</td><td>HY-D0814</td><td>Coloranti nucleici</td></tr><tr><td>Alexa-647 Isolectina coniugata fluorescente B4</td><td>Thermo</td><td>I32450</td><td>Microvasi leganti</td></tr><tr><td>Sigillante per compresse antifluorescente</td><td>Abcam</td><td>AB104135</td><td>Liquido</td></tr> di <tr><td>riparazione dell'antigene</td> per la fissazione del campione<td>Biosharp</td><td>BL151A</td><td>Riparazione di siti antigenici Cassetta per</td></tr><tr><td>biopsia</td><td>ActivFlo</td><td>39LC-500-1</td><td>Fissaggio e posizionamento di campioni di tessuto</td></tr><tr><td>Siero bovino Albumina</td><td>Sigma</td><td>B2064-50G</td><td>Soluzione sigillante</td></tr><tr><td>Piastra fredda</td><td>Leica</td><td>HistoCore Arcadia H&nbsp;</td><td>Congelamento dei campioni</td></tr><tr><td>Forno di essiccazione elettrico a temperatura costante</td><td>Taisite</td><td>101-0AB</td><td>Lama</td></tr> per <tr><td>microtomo monouso</td><td>per riparazione ad</td> alta temperatura Leica <td>14035838383</td><td>Taglio di campioni di tessuto per preparare sezioni</td></tr><tr><td>Stampi di inclusione</td><td>Shitai</td><td>26155166627</td><td>Fissaggio di campioni di tessuto</td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>Kelong</td><td>CAS 64-17-5</td> Soluzione di <td>disidratazione tissutale</td></tr><tr><td>Paraffina riscaldata Stazione di inclusione</td><td>Leica</td><td>EG1150</td><td>Inclusione di campioni di Tssue in</td></tr><tr><td>bagno d'acqua di</td> paraffina <td>HistoCore Leica</td><td>HI1220</td><td>Appiattisci e fissa campioni di tessuto</td></tr><tr><td>ImageJ (Fiji)&nbsp;</td><td>NIH</td><td>1.54f</td><td>Strumento quantitativo</td></tr><tr><td>Penne per immunoistochimica</td><td>Biosharp</td><td>BC004</td><td>Agente bloccante dell'acqua</td></tr><tr><td>Pinze mediche Attrezzature</td><td>mediche Shanghai Attrezzature mediche</td><td>N/A Afferrare</td><td>, manipolare o spostare campioni di tessuto</td></tr><tr><td>Microscopio</td><td>Nikon</td><td>Ts2</td><td>Dispositivo di imaging</td></tr><tr><td>Supporti di montaggio</td><td>Jiangyuan</td><td>Fissaggio e conservazione insapore</td><td> Sezioni di tessuto</td></tr><tr><td>Cera di paraffina</td><td>SCHLEDEN</td><td>80200-0014</td><td>Fissaggio della struttura del tessuto</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Beyotime</td><td>C0221A</td><td>Tampone di lavaggio</td></tr><tr><td>Pentobarbital di sodio</td><td>Pechino Reagente chimico Azienda</td><td>Q/H82-F158-2002</td><td></td></tr><tr><td>Microtomo rotante</td> anestetico <td>Biobase</td><td>Bk-2258</td><td>Preparazione di fette</td></tr><tr><td>Forbici sterili</td><td>Shanghai Medical Attrezzature</td><td>N/A</td><td>Segmentazione Campioni di tessuto</td></tr><tr><td>Bisturi chirurgico</td><td>Shanghai Medical Equipment</td><td>N/A</td><td>Taglio di campioni di tessuto Triton</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Solarbio</td><td>T8200</td><td>Soluzione di permeabilizzazione</td></tr><tr><td>Vetrino senza lavaggio</td><td>PLATINUM PRO</td><td>PRO-04</td><td>Campioni di fissaggio per la colorazione di</td></tr><tr><td>xilene</td><td>SUM</td><td>XK13-011-00031</td><td>Soluzione di deceratura dei tessuti</td></tr></tbody></table>

quantificazione della densità microvascolare polmonare nei topi attraverso i lobuli

Quantifying Pulmonary Microvascular Density in Mice Across Lobules

Per distinguere tra le lesioni nei bronchi principali e i piccoli rami delle vie aeree, è fondamentale assicurarsi che si osservi la struttura continua delle lesioni in questi due tipi di vie aeree. Ciò può essere ottenuto seguendo le procedure di taglio e incorporamento descritte nella Figura 1. Dati i numerosi lobi polmonari nei topi, che sono orientati in varie direzioni e possiedono una struttura a rete, sono più suscettibili al collasso rispetto ad altri tessuti solidi. Per ottenere un'...

Quantificazione della densità microvascolare polmonare nei topi attraverso i lobuli

The abnormal alternation of pulmonary angiogenesis is related to lung microvascular dysfunction and is deeply linked to vascular wall integrity, blood ...

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Un protocollo specifico e rapido per indagare contemporaneamente la funzione del cuore destro, infiammazione polmonare, e la risposta immunitaria viene descritto come strumento di apprendimento. Video e dati descrivono fisiologia e tecniche di microdissezione organizzata in un approccio di squadra che è adattabile per essere utilizzato per piccole e grandi dimensioni studi.

Ventricolo destro di pressione sistolica Misure in combinazione con raccolta di campioni di tessuto polmonare e immunitaria nei topi

Il glicocalice endoteliale / endoteliale strato superficiale è perfettamente studiata usando la microscopia intravitale. Microscopia intravitale è tecnicamente difficile in un organo in movimento come il polmone. Si dimostra come brightfield simultanea e microscopia a fluorescenza possono essere utilizzate per stimare endoteliale spessore dello strato di superficie in un movimento...

Nella misura in vivo della superficie polmonare strato endoteliale mouse

La vasocostrizione polmonare ipossica (HPV) è un importante fenomeno fisiologico con cui alla perfusione polmonare ipossia alveolare viene abbinata alla ventilazione. Il principale segmento vascolare che contribuisce all'HPV è l'arteria intra-acinare. Qui descriviamo il nostro protocollo per l'analisi dell'HPV dei vasi polmonari murini con diametri di 20-100 μm.

Analisi videomorfometrica della vasocostrizione polmonare ipossica delle arterie intrapolmonari utilizzando fette polmonari tagliate con precisione murina

La preparazione isolato polmone sangue perfuso rende possibile visualizzare le reti microvasali sulla superficie polmonare. Qui si descrive un metodo per quantificare permeabilità delle singole microvasi nei polmoni isolati utilizzando l'imaging di fluorescenza in tempo reale.

Quantificare singolo microvasi Permeabilità in Isolata Blood-perfusione Rat Lung Preparazione

Descriviamo un mezzo per misurare rapidamente e semplicemente la capacità di diffusione polmonare nei topi e dimostriamo che è sufficientemente sensibile ai cambiamenti fenotipici in molteplici patologie polmonari comuni.  Questa metrica porta quindi una rilevanza traslazionale diretta ai modelli murini, poiché la capacità di diffusione è facilmente misurabile anche negli esseri umani.

Fenotipizzazione mouse Pulmonary Function In Vivo Con la capacità polmonare Diffusione

Qui presentiamo un protocollo per misurare in modo semplice e affidabile la curva pressione-volume polmonare nei topi, dimostrando che è sufficientemente sensibile per rilevare cambiamenti parenchimali fenotipici in due patologie polmonari comuni, la fibrosi polmonare e l'enfisema. Questa metrica fornisce un mezzo per quantificare i cambiamenti strutturali del polmone con lo sviluppo della patologia.

Misura della curva di pressione-volume in mouse polmoni

La superficie interna polmonare (ISA) è un criterio critico per valutare la morfologia polmonare e la fisiologia delle malattie polmonari e della rigenerazione alveolare indotta da lesioni. Qui descriviamo un metodo standardizzato che può ridurre al minimo la polarizzazione di misura per ISA sia nei modelli di polmonite polmonare sia nei modelli di protesi.

Un metodo standardizzato per la misurazione della superficie interna polmonare tramite la polmonite e l&#39;impianto di protesi

La somministrazione intratracheale (IT) di agenti sperimentali nei topi spesso si traduce in consegna asimmetrica ai polmoni distali.  In questa relazione, descriviamo un approccio intrabronchiale diretto (IB) per cannulare ogni polmone in topi viventi non chirurgici.  Questo approccio può essere utilizzato per somministrare selettivamente gli agenti a un polmone o può essere adattato per migliorare la somministrazione simmetrica dell'agente a entrambi i polmoni.

Amministrazione intrabronchiale diretta per migliorare la deposizione selettiva dell'agente all'interno del polmone del mouse

Vi presentiamo un metodo piuttosto semplice e sensibile per la quantificazione accurata della densità del condotto biliare nel fegato del topo. Questo metodo può aiutare a determinare gli effetti dei modificatori genetici e ambientali e l'efficacia delle potenziali terapie nei modelli murini delle malattie biliari.

Determinazione della densità del dotto biliare nel fegato del topo

Lo scopo di questa tecnica è la visualizzazione ex vivo delle reti arteriliiche polmonari dei primi topi postnatali e adulti attraverso l'inflazione polmonare e l'iniezione di un composto a base di polimeri radio-opaco attraverso l'arteria polmonare. Vengono inoltre discusse le potenziali applicazioni per i tessuti castati.

Casting vascolare di polmoni di mouse postnatali adulti e precoci per l'imaging Micro-CT

Scopri come quantificare la densità microvascolare polmonare nei topi attraverso i lobuli utilizzando la colorazione con isolectin B4 e l'analisi con ImageJ. Questo metodo affronta le variazioni anatomiche e legate all'età per una maggiore accuratezza.

Quantificazione della densità microvascolare polmonare nei topi attraverso i lobuli

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