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DOI: 10.3791/66836-v
Angélica Cruz Lebrón1, Emily Blackwell1,2, Pedro Balbuena Almodóvar1, Tasnim Syakirah Faiez1, Luke A. Mummert1, Karen S. Sfanos1,3,4
1Department of Pathology,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Molecular and Comparative Pathobiology,Johns Hopkins University School of Medicine, 3Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, 4Department of Urology,Johns Hopkins University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Qui, descriviamo la somministrazione di farmaci guidata da micropipette (MDA) come un metodo alternativo alla sonda gastrica orale che incentiva l'animale da ricerca a ingerire prontamente i trattamenti con il minimo stress e disagio.
Siamo un laboratorio di ricerca sul cancro alla prostata e stiamo studiando l'effetto dei microbi dell'ospite umano e dei loro metaboliti sull'inizio del cancro alla prostata e sulla risposta al trattamento. Attualmente stiamo utilizzando modelli murini per studiare specifici metaboliti microbici che riteniamo possano influenzare la risposta al trattamento del cancro alla prostata. Avevamo bisogno di un metodo per somministrare quotidianamente composti di ricerca ai topi.
Il metodo più comunemente usato, il gavagage orale, può essere stressante per gli animali da ricerca e può causare distorsioni sperimentali. Pertanto, esploriamo la somministrazione di farmaci guidata da micropipette, MDA, come metodo alternativo. Abbiamo determinato che l'MDA è una tecnica che riduce i tempi e l'invasività della somministrazione orale di farmaci agli animali da ricerca.
Nel complesso, abbiamo dimostrato che l'MDA può offrire un'alternativa meno stressante ed efficace al gavagage orale. Per iniziare, misura il latte condensato zuccherato in un tubo conico da 15 millilitri. Quindi, utilizzando un tubo conico da 50 millilitri, mescolare lentamente l'acqua di biologia molecolare con il latte condensato zuccherato.
Quindi, tieni delicatamente la collottola del collo dell'animale di studio con una mano per trattenerla. Utilizzando una pipetta monocanale e un puntale da 200 microlitri, offrire all'animale 100 microlitri di soluzione di latte zuccherato. Ricostituire l'S-equolo in DMSO combinato con il 90% di olio di mais.
Mescolare 220 microlitri di aliquota di S-equolo in olio di mais con 480 microlitri di soluzione condensata di latte e acqua zuccherata. Allo stesso modo, preparare il veicolo senza aggiungere S-equolo. Realizzare un master mix di soluzioni di controllo PBS, veicolo DMSO e S-equolo per fornire una soluzione omogenea a tutti gli animali.
Infine, somministrare 100 microlitri della rispettiva soluzione a ciascun topo una volta al giorno. L'analisi del sangue ha rivelato che i topi trattati con equolo avevano livelli circolanti rilevabili di equolo, dimostrando un'efficace somministrazione del farmaco.
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