Fluorespirometria ad alta risoluzione per valutare i cambiamenti dinamici del potenziale di membrana mitocondriale nelle cellule immunitarie umane

Affinché una cellula funzioni e sopravviva dopo un periodo di stress fisiologico, deve essere in grado di soddisfare la domanda di energia necessaria per ripristinare l'omeostasi. Nel nostro laboratorio, cerchiamo di identificare come i mitocondri rispondono e si adattano ai fattori di stress nutrizionale per comprendere meglio come i mitocondri mediano il rischio di sviluppare la malattia. Gli attuali metodi per testare la bioenergetica PBMC prevedono la misurazione della capacità respiratoria dopo l'aggiunta di inibitori e disaccoppiatori.

Questi metodi ci hanno aiutato a comprendere i cambiamenti bioenergetici significativi nelle PBMC in diversi stati patologici. Il potenziale di membrana è essenziale per la sintesi dell'ATP e regola processi come il flusso respiratorio, le specie reattive dell'ossigeno e l'autofagia. Tuttavia, abbiamo ancora una conoscenza limitata su come la respirazione mitocondriale e il potenziale di membrana rispondano insieme alle concentrazioni fisiologiche del substrato nelle PBMC.

Il vantaggio di questa tecnica è che consente un'analisi integrata del potenziale di membrana mitocondriale e del consumo di ossigeno nelle PBMC umane in risposta all'aumento dei livelli di ADP. Questo metodo consente di quantificare la sensibilità dei mitocondri a una variazione della domanda di energia.