Un modello di stress sociale integrato multiplo per disturbi psichiatrici in topi femmina C57BL/6J

Questa ricerca mira a capire come lo stress sociale cronico porti a sintomi psichiatrici nei topi femmina stabilendo un modello di stress sociale multi-integrato. La maggior parte dei modelli attualmente disponibili per i disturbi psichiatrici sono stati stabiliti utilizzando animali maschi. Questo protocollo introduce un nuovo modello murino progettato per studiare questi disturbi nei topi femmina. Questo studio ha sviluppato un modello animale affidabile che ci permette di indagare i meccanismi neurofisiologici alla base dei disturbi psichiatrici nei topi femmina.

[Narratore] Per iniziare, posiziona un tubo acrilico lungo 10 centimetri e con un diametro interno di 26 millimetri in ogni gabbia di topi soggetti femminili e candidati vincitori per consentire loro di acclimatarsi e imparare a passarci attraverso per tre giorni. Per addestrare i topi alla competizione con il tubo, afferra delicatamente la coda di ciascun topo e posizionala sul tavolo. Quindi, tieni il mouse per la coda e posizionalo a un'estremità del tubo. Rilascia la coda una volta che il topo entra nel tubo e lascialo passare volontariamente. Ora, posiziona il mouse all'estremità opposta del tubo e ripeti la stessa procedura. Dopo aver ripetuto ancora una volta l'intero processo, riporta il topo nella sua gabbia di casa. Per la proiezione del vincitore, preparare un tubo acrilico lungo 30 centimetri e con un diametro interno di 26 millimetri e tracciare una linea mediana visibile sul tubo. Tieni entrambi i topi candidati vincitori per la coda e posizionali alle estremità opposte del tubo. Consenti loro di entrare e incontrarsi a metà, quindi rilasciali contemporaneamente e avvia il timer. Identifica il vincitore come il topo che spinge l'altro fuori dal tubo e assegnagli un punto. Rimetti entrambi i topi nella loro gabbia di casa. Classifica i topi in base ai loro punteggi totali. Per lo screening dell'aggressore CD1, posizionare un topo maschio C57 direttamente nella gabbia domestica di un maschio CD1 per tre minuti. Registrare la latenza al primo attacco, il numero di attacchi e la durata dei comportamenti aggressivi entro il periodo di tre minuti come indicatori di aggressività e ripetere la procedura di screening per altri due giorni. Per il fallimento della competizione sociale, posiziona un topo MISS multiplo integrato per lo stress sociale e un topo vincitore alle estremità opposte del tubo, in modo che camminino in avanti e si incontrino nel punto centrale. Il mouse MISS verrà spinto fuori dal tubo dal vincitore. Scambia le posizioni dei due mouse e ripeti l'interazione. Quindi, riporta sia il topo MISS che quello vincitore nelle loro gabbie di casa. Per la modellazione dello stress di sconfitta sociale vicaria modificata, posizionare una femmina di topo MISS all'interno della gabbia di un aggressore CD1, confinata sotto una copertura acrilica perforata per consentire l'osservazione vicaria delle interazioni aggressive. Introdurre un topo intruso maschio C57 nella gabbia per essere attaccato fisicamente dal topo CD1 per 10 minuti. Dopo 10 minuti, rimuovere l'intruso maschio e consentire al topo femmina MISS e altri cinque minuti di esposizione sensoriale al topo CD1. Dopo cinque minuti, sostituire il topo CD1 con un nuovo topo antintrusione maschio C57 e ripetere l'intera procedura tre volte. Quindi, riporta il topo MISS nella sua gabbia di casa. Successivamente, per modellare l'inevitabile stress da sovraffollamento, posizionare una guaina opaca all'interno di una gabbia standard contenente lettiera. Introdurre da 12 a 15 topi femmine, tutti topi MISS o mescolati con altre femmine nella manica per 30 minuti al giorno. Per l'isolamento sociale, ospita i topi MISS individualmente quando non stanno subendo un fallimento della competizione sociale, uno stress da sconfitta vicaria o uno stress da sovraffollamento per il resto del periodo di modellazione di 10 giorni. Il test di preferenza per il saccarosio, che valuta l'anedonia misurando la preferenza per una soluzione dolce rispetto all'acqua, ha mostrato che la preferenza per il saccarosio era significativamente più bassa nei topi esposti a MISS rispetto ai controlli naïve. L'assunzione totale di liquidi nel test di preferenza per il saccarosio, che includeva sia l'acqua che il saccarosio, non differiva significativamente tra i topi MISS e naïve, indicando che la ridotta preferenza per il saccarosio non era dovuta a un consumo alterato di liquidi. Il test della sospensione della coda, che valuta la disperazione comportamentale misurando l'immobilità passiva, ha rivelato che i topi esposti a MISS avevano tempi di immobilità significativamente più lunghi rispetto ai topi naïve. Inoltre, il test in campo aperto utilizzato per valutare l'ansia misurando il tempo trascorso al centro di un'arena all'aperto ha mostrato che i topi esposti a MISS hanno trascorso molto meno tempo nella zona centrale rispetto ai topi naïve. Il labirinto plus elevato, che misura l'ansia evitando le braccia aperte, ha dimostrato che i topi esposti a MISS hanno trascorso significativamente meno tempo nelle braccia aperte rispetto ai controlli naïve.