Name: Screening in vitro basato su LED per la valutazione di molecole fotoattivabili nellinattivazione fotodinamica batterica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Scopri un metodo economico per valutare fotoattivatori nell'inattivazione fotodinamica batterica usando piastre a 96 pozzetti e pannelli LED. Questa tecnica consente lo screening ad alto rendimento di composti flavylium contro Staphylococcus aureus.

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<ol><li>Correia, J. H., Rodrigues, J. A., Pimenta, S., Dong, T., Yang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+review%3A+principles%2C+photosensitizers%2C+applications%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy review: principles, photosensitizers, applications, and future directions.</a> Pharmaceutics. 13 (9), 1332(2021).</li>
<li>Hamblin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+photodynamic+inactivation%3A+A+bright+new+technique+to+kill+resistant+microbes%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial photodynamic inactivation: A bright new technique to kill resistant microbes.</a> Curr Opin Microbiol. 33 (6), 67-73 (2016).</li>
<li>Aroso, R. T., Oliveira, S. M., Almeida, A., Carvalho, C. M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+disinfection+and+its+role+in+controlling+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Photochem+Photobiol+Sci%22%5BJournal%5D)">Photodynamic disinfection and its role in controlling infectious diseases.</a> Photochem Photobiol Sci. 20 (11), 1497-1545 (2021).</li>
<li>Rapacka-Zdończyk, A., Woźniak, A., Podbielska, H., Kasprzycka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+determining+the+susceptibility+of+bacteria+to+antibacterial+photodynamic+inactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med%22%5BJournal%5D)">Factors determining the susceptibility of bacteria to antibacterial photodynamic inactivation.</a> Front Med. 8, 733501(2021).</li>
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<li>Lima, E., Reis, L. V., Silva, A. L. C., Carvalho, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy%3A+From+the+basics+to+the+current+progress+of+N-heterocyclic-bearing+dyes+as+effective+photosensitizers%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy: From the basics to the current progress of N-heterocyclic-bearing dyes as effective photosensitizers.</a> Molecules. 28 (13), 5103(2023).</li>
<li>Pérez-Laguna, V., Pérez-Artiaga, L., Royo-Díaz, D., Gilaberte, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+combination+of+photodynamic+therapy+and+antimicrobial+compounds+to+treat+skin+and+mucosal+infections%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Photochem+Photobiol+Sci%22%5BJournal%5D)">A combination of photodynamic therapy and antimicrobial compounds to treat skin and mucosal infections: A systematic review.</a> Photochem Photobiol Sci. 18 (5), 1020-1029 (2019).</li>
<li>Babilas, P., Karrer, S., Szeimies, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+in+dermatology%3A+state-of-the-art%5BTitle%5D)+AND+%22Photodermatol+Photoimmunol+Photomed%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy in dermatology: state-of-the-art.</a> Photodermatol Photoimmunol Photomed. 26 (3), 118-132 (2010).</li>
<li>Pérez-Laguna, V., Pérez-Artiaga, L., Gilaberte, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+combined+with+antibiotics+or+antifungals+against+microorganisms+that+cause+skin+and+soft+tissue+infections%3A+a+planktonic+and+biofilm+approach+to+overcome+resistances%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy combined with antibiotics or antifungals against microorganisms that cause skin and soft tissue infections: a planktonic and biofilm approach to overcome resistances.</a> Pharmaceutics. 14 (6), 1-16 (2021).</li>
<li>Almenara-Blasco, M., López-Roca, A., Pérez-Sanchez, A., Valiente, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+photodynamic+therapy+for+dermatological+infections%3A+current+insights+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Photobiol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial photodynamic therapy for dermatological infections: current insights and future prospects.</a> Front Photobiol. 2, 773502(2024).</li>
<li>de Oliveira, A. B., Reis, C., Soares, M. T., Batista, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+for+treating+infected+skin+wounds%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis+from+randomized+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Photodiagnosis+Photodyn+Ther%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy for treating infected skin wounds: a systematic review and meta-analysis from randomized clinical trials.</a> Photodiagnosis Photodyn Ther. 40 (5), 103-118 (2022).</li>
<li>Correia, P., Oliveira, S. R., Batista, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-activated+amino-substituted+dyes+as+dual-action+antibacterial+agents%3A+bio-efficacy+and+AFM+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Dyes+Pigm%22%5BJournal%5D)">Light-activated amino-substituted dyes as dual-action antibacterial agents: bio-efficacy and AFM evaluation.</a> Dyes Pigm. 224, 111975(2024).</li>
<li>Oliveira, H., Santos, A. R., Costa, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoactivated+cell-killing+amino-based+flavylium+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Photoactivated cell-killing amino-based flavylium compounds.</a> Sci Rep. 11 (1), 22005(2021).</li>
<li>Sharma, S., Singh, V., Kaur, S., Mehta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+biofilm%3A+A+review+on+formation%2C+infection%2C+antibiotic+resistance%2C+control+measures%2C+and+innovative+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Microbial biofilm: A review on formation, infection, antibiotic resistance, control measures, and innovative treatment.</a> Microorganisms. 11 (6), 1614(2023).</li>
<li>Barolet, D., Christiaens, F., Misery, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-emitting+diodes+%28LEDs%29+in+dermatology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cutan+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Light-emitting diodes (LEDs) in dermatology.</a> Semin Cutan Med Surg. 27 (3), 227-238 (2009).</li>
<li>Algorri, J. F., López-Higuera, J. M., Rodríguez-Cobo, L., Cobo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+light+source+technologies+for+photodynamic+therapy+of+skin+cancer+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Advanced light source technologies for photodynamic therapy of skin cancer lesions.</a> Pharmaceutics. 15 (7), 2075(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Spettrofotometro UV-Vis Cary 60</td><td>Agilent</td><td>G6860A</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil solfossido</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Cuvette monouso PMMA</td><td>BRAND GMBH + CO KG</td><td>759030</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorfs (500 mL)</td><td>Provette Fisher Scientific</td><td>15625367</td><td></td></tr><tr><td>Falcon (15 mL)</td><td>Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Provette Falcon ( 50 mL)</td><td>Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>Pannello LED IP65 50W</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (100 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705874</td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (1000 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705880</td><td></td></tr><tr><td>Mueller Hinton agar&nbsp;</td><td>Oxoid</td><td>CM0405</td><td></td></tr><tr><td>Pipete multicanale 12 canali</td><td>Transferpette S</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nunc MicroWell Micropiastre a 96 pozzetti</td><td>Thermo Scientific</td><td>260844</td><td></td></tr><tr><td>Compresse saline tamponate con fosfato pH 7,4</td><td>Panreac Applichem</td><td>A9177</td><td></td></tr><tr><td>Pipette sierologiche (10 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>Pipette sierologiche (5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170366N</td><td></td></tr><tr><td>Piatto per coltura tissutale</td><td>TPP Techno Plastic Products AG</td><td>93150</td><td></td></tr></tbody></table>

screening in vitro basato su led per la valutazione di molecole fotoattivabili nell'inattivazione fotodinamica batterica

LED-Based In Vitro Screening for Assessing Photoactivable Molecules in Bacterial Photodynamic Inactivation

Composti flavilici a base di amminici (Figura 2): 7-dietilammino-4′-dimetilamminoflavilio (7NEt24′NMe2), 7-dietilammino-2-(dimetilamminostil)-1-benzopirilio (7NEt2st4′NMe2), 7-dietilammino-4′-amminoflavilio (7NEt24′NH2) e 7-dietilammino-4′-idrossiflavilio (7NEt24′OH), la cui natura sensibile alla luce è stata precedentemente discussa12,13, sono stati incubat...

Screening in vitro basato su LED per la valutazione di molecole fotoattivabili nell'inattivazione fotodinamica batterica

The rise of multi-drug-resistant infections and the lack of new antibiotic classes have renewed interest in alternative therapies like photodynamic ...

led-based-vitro-screening-for-assessing-photoactivable-molecules

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JoVE Journal

Biochemistry

Biochimica

Fonte: Cheng, C., et al. Inattivazione di agenti patogeni tramite fotolisi in luce visibile della riboflavina-5'-fosfato. J. Vis. Exp. (2022)Questo video mostra un metodo per valutare gli effetti fototossici della flavina mononucleotide (FMN) sui batteri patogeni. Le colture batteriche sono esposte a concentrazioni crescenti di FMN e illuminate con luce visibile per generare specie reattive dell'ossigeno (ROS) che danneggiano i componenti cellulari. I batteri sopravvissuti vengono quindi...

Inattivazione dei batteri mediante mononucleotide flavina attivato dalla luce

Fonte: Cheng, C., et al. Inattivazione di agenti patogeni tramite fotolisi in luce visibile della riboflavina-5'-fosfato. J. Vis. Exp. (2022).In questo video, una miscela di reazione tamponata contenente L-metionina, nitro blu tetrazolio (NBT) e flavina mononucleotide (FMN) viene irradiata con luce viola per indurre la produzione di specie reattive dell'ossigeno (ROS). Ciò porta all'inattivazione batterica e alla formazione di formazan spettrometricamente rilevabile.

Quantificazione dell'inattivazione batterica indotta dalla luce attraverso la generazione di specie reattive dell'ossigeno

Fonte: Zhao, K., et al. Un modello in vitro per studiare l'effetto della terapia fotodinamica mediata da acido 5-aminolevulinico sul biofilm di Staphylococcus aureus . J. Vis. Esp. (2018)Il video mostra un protocollo di terapia fotodinamica per valutare gli effetti antibatterici sui biofilm batterici Gram-positivi. I biofilm sono suddivisi in quattro gruppi: due ricevono un precursore del fotosenziatore e due ricevono un buffer. Tutti vengono incubati al buio, seguiti dall'esposizione alla luce...

Trattamento attivato dalla luce dei biofilm batterici utilizzando un precursore fotosensibilizzatore

Le infezioni causate da ceppi batterici multiresistenti (MDR) sono emerse come una seria minaccia per la salute pubblica, rendendo necessario lo sviluppo di terapie alternative. Presentiamo un protocollo per valutare l'efficacia della terapia antimicrobica con luce blu (aBL) per le infezioni da MDR Acinetobacter baumannii nelle ustioni di topo utilizzando l'imaging a bioluminescenza.

In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy per la multi-resistente baumannii Acinetobacter Masterizzare Infezioni Utilizzando bioluminescenza Imaging

Questo manoscritto descrive un protocollo per studiare l'effetto antimicrobico della terapia fotodinamica mediata da acido 5-aminolevulinico (ALA-PDT) su un biofilm di Staphylococcus aureus . Questo protocollo può essere usato per sviluppare un modello in vitro per studiare il trattamento di biofilm batterici con PDT in futuro.

Un modello In Vitro per studiare l'effetto della terapia fotodinamica 5-aminolevulinico-mediata su Staphylococcus aureus Biofilm

Terapia fotodinamica (PDT) è una procedura medica che coinvolge l'incubazione di un fotosensibilizzatore esogenicamente applicata (PS) seguita dalla fotoattivazione di luce visibile di indurre apoptosi. Vi presentiamo un protocollo in vitro PDT progettato per simulare PDT che possono essere utilizzate per studiare le differenze nei parametri di trattamento con la luce e incubazione di PS.

Un approccio In Vitro alla terapia fotodinamica

Qui presentiamo un protocollo per inattivare i batteri patogeni con specie reattive dell'ossigeno prodotte durante la fotolisi del mononucleotide flavina (FMN) sotto irradiazione di luce blu e viola di bassa intensità. La fotolisi FMN ha dimostrato di essere un metodo semplice e sicuro per i processi sanitari.

Inattivazione di agenti patogeni tramite fotolisi in luce visibile della riboflavina-5′-fosfato

La crescente incidenza di Candida albicans resistente ai farmaci è un grave problema di salute in tutto il mondo. La terapia fotodinamica antimicrobica (aPDT) può offrire una strategia per combattere le infezioni fungine resistenti ai farmaci. Il presente protocollo descrive l'efficacia dell'aPDT mediata da Rose bengala su un ceppo di C. albicans multiresistente in vitro.

Terapia fotodinamica mediata dal Bengala Rosa per inibire la Candida albicans

Qui, descriviamo un dispositivo nuovo, semplice e a basso costo per eseguire con successo saggi di terapia fotodinamica in vitro (PDT) utilizzando colture cellulari HeLa bidimensionali e verteporfina come fotosensibilizzante.

Un dispositivo di terapia fotodinamica costruito internamente e basato su diodi emettitori di luce per migliorare la citotossicità delle verteporfine in un modello di coltura cellulare 2D

Questo protocollo presenta una serie di esperimenti adottati per la valutazione di peptidi antitumorali fotocommutabili, che possono essere utilizzati nello screening preclinico di tali composti. Ciò include la valutazione della citotossicità in colture cellulari 2D e 3D, la valutazione dell'efficienza di fotoisomerizzazione ex vivo (tessuto modello) e l'efficacia in vivo .

Valutazione in vitro e in vivo di composti biologicamente attivi fotocontrollati - potenziali farmaci candidati per la fotofarmacologia del cancro

Questo manoscritto presenta un nuovo e innovativo dispositivo di illuminazione stampato in 3D per lo studio della terapia fotodinamica mediata dal Rose Bengala in vitro.

Sviluppo di un innovativo dispositivo di illuminazione basato su LED per l'applicazione in vitro della terapia fotodinamica con il Rose Bengal

Scopri un metodo economico per valutare fotoattivatori nell'inattivazione fotodinamica batterica usando piastre a 96 pozzetti e pannelli LED. Questa tecnica consente lo screening ad alto rendimento di composti flavylium contro Staphylococcus aureus.

Screening in vitro basato su LED per la valutazione di molecole fotoattivabili nell'inattivazione fotodinamica batterica

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