Name: Unefficiente tecnica per una sola persona per il campionamento del latte da topi da laboratorio (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 56 s
Description: Impara una tecnica efficiente per il campionamento del latte nei topi da laboratorio utilizzando un dispositivo a vuoto. Questo metodo consente a una sola persona di raccogliere 0,1-0,5 mL in meno di 10 minuti, riducendo la perdita di campione e la complessità operativa.

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Tutte le procedure sperimentali e di cura degli animali hanno seguito le linee guida federali e hanno ricevuto l'approvazione dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali della Rutgers University. I topi femmina (C57BL/6 background) sono stati accoppiati a 8 settimane di età. Sono stati alimentati con un chow standard da riproduttore ad libitum e tenuti sotto un ciclo regolare di 12:12 ore luce/buio. Il giorno di consegna è stato conteggiato come giorno 1 post-consegna (PD1). Su PD2 (lattazione precoce) e PD10 (picco di lattazione), il latte è stato campionato come descritto di seguito.
1. Montaggio di un dispositivo di mungitura 
<ol>
	<li>Collegare un'estremità del tubo in cloruro di polivinile (PVC) da 5/32'' di diametro interno (ID) alla pompa del vuoto e utilizzare del nastro adesivo per fissare l'attacco (etichettato a nella Figura 1A). NOTA: La pompa per vuoto può essere sostituita con qualsiasi pompa adatta o con un vuoto centralizzato (a volte chiamato "vuoto domestico") disponibile in laboratorio.</li>
	<li>Collegare l'altra estremità del tubo in PVC ID da 5/32'' al tubo in PVC ID da 1/8'' tramite un connettore diritto spinato.</li>
	<li>Collegare l'altra estremità del tubo in PVC da 1/8'' ID a un ago ipodermico da 18G tramite un connettore (etichettato b nella Figura 1A).</li>
	<li>Tagliare l'estremità di un puntale per pipetta P200 ~0,2 cm per creare un'apertura più ampia. Inserire il puntale della pipetta P200 attraverso l'apertura del tappo del setto in modo che il puntale sia rivolto verso l'alto (Figura 1B). NOTA: Sostituire i puntali delle pipette tra un animale e l'altro.</li>
	<li>Collegare il tappo del setto a un tubo di raccolta sterile. Praticare una puntura attraverso il tappo del setto con l'ago ipodermico da 18 G.</li>
	<li>Controllare la pressione di aspirazione accendendo la pompa del vuoto e posizionando un dito (coperto da un guanto da laboratorio) contro l'apertura del puntale della pipetta. NOTA: Dovresti sentire una leggera aspirazione se è assemblato correttamente. Il tubo di raccolta, l'ago ipodermico da 18 G e i puntali delle pipette P200 devono essere sterili.</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig1.jpg"> 
Figura 1: Il dispositivo di mungitura. (A) Dispositivo di mungitura con pompa a vuoto collegata a un ago ipodermico da 18 G tramite un tubo in PVC. L'ago passa attraverso un tappo del setto che è attaccato a una provetta di raccolta per microcentrifuga. Un puntale per pipetta P-200 rovesciato, utilizzato per prelevare il latte da una tettarella, viene inserito attraverso un'apertura del tappo del setto. (B) Schema della sezione trasversale del dispositivo di mungitura. (C) Una madre che viene munta utilizzando il metodo descritto. (D) Un'aliquota rappresentativa (0,3 ml) di latte raccolto da una madre al picco della lattazione. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
2. Separazione della madre dai cuccioli
<ol>
	<li>Il giorno della mungitura, separare la madre dai suoi cuccioli per consentire l'accumulo di latte nelle ghiandole.</li>
	<li>Tieni i cuccioli al caldo in un nido.</li>
	<li>Consentire 2 ore di separazione se il latte viene raccolto durante l'inizio della lattazione (ad esempio, PD2 in questo studio).</li>
	<li>Consentire 30-45 minuti di separazione se il latte viene raccolto durante il picco di lattazione (ad esempio, PD10 in questo studio).</li>
</ol>
3. Anestesia della diga
<ol>
	<li>Quando la madre è pronta per essere munta, somministrare un'iniezione di soluzione di ketamina/xilazina (intraperitoneale, i.p.) in un lato della cavità peritoneale tra il 4° e il 5° paio di capezzoli. NOTA: La quantità di soluzione anestetica da somministrare è calcolata in base al peso della madre (80-100 mg/kg di ketamina, 5-12 mg/kg di xilazina, secondo il protocollo IACUC della Rutgers University). Questa dose sederà un topo per 45-60 minuti, fornendo ampio tempo per la raccolta del latte.</li>
	<li>Confermare l'anestesia stringendo con forza un piede, ma senza ferirlo, per testare la percezione della sensazione e del dolore dell'animale. Un'anestesia adeguata è indicata dall'assenza di movimenti di alcun tipo.</li>
	<li>Applicare un unguento oftalmico veterinario sugli occhi della diga per prevenire la secchezza durante l'anestesia.</li>
</ol>
4. Raccolta del latte
<ol>
	<li>Posizionare la madre anestetizzata sulla schiena su una superficie di lavoro solida. Pulisci delicatamente la sua zona mammaria con una salvietta sterile per la preparazione dell'alcol per pulire l'area prima della mungitura.</li>
	<li>Somministrare 1-2 unità di ossitocina (i.p.) tra il 4° e il 5° paio di capezzoli sul lato della cavità peritoneale che non ha ricevuto alcuna iniezione. NOTA: L'ossitocina è una piccola molecola che può essere assorbita rapidamente e ha una breve emivita 14,15. La mungitura dovrebbe iniziare entro un minuto dall'iniezione.</li>
	<li>Tieni la diga strofinando delicatamente la zona del collo con la mano non dominante.</li>
	<li>Estrarre manualmente il latte da una tettarella schiacciando il tessuto mammario dalla base alla punta della tettarella fino a quando non è visibile una goccia di latte.</li>
	<li>Accendere il dispositivo di aspirazione accendendo il pulsante di accensione.</li>
	<li>Iniziare la mungitura applicando delicatamente il puntale della pipetta P200 rovesciato su un capezzolo. Utilizzare un leggero movimento di trazione per estrarre il latte (Figura 1C).</li>
	<li>Ripetere i passaggi 4.4-4.6 su tutti i capezzoli fino a quando non viene raccolto un volume sufficiente di latte. NOTA: Durante la mungitura, il latte può essere aspirato accidentalmente nell'ago ipodermico da 18 g o nel tubo in PVC della linea del vuoto. Questo può essere facilmente rimediato cambiando l'ago o il tubo in PVC prima di mungere l'animale successivo.</li>
</ol>
5. Recupero della diga dopo la raccolta del latte
<ol>
	<li>Rimetti la madre anestetizzata nella gabbia con i suoi cuccioli e tienila al caldo. Monitora l'animale fino a quando non riprende conoscenza. NOTA: La madre può rifiutarsi di allattare di nuovo se le viene permesso di svegliarsi da sola in una gabbia separata prima di tornare dai suoi cuccioli. Questo è più comune quando la raccolta del latte avviene durante l'inizio della lattazione (PD2).</li>
	<li>Lascia che le madri si allontanino dai suoi cuccioli per riprendersi completamente quando inizia a svegliarsi; Questo è un comportamento normale. NOTA: Osserviamo che le madri tornano periodicamente dai loro cuccioli e tornano ad allattare completamente dopo poche ore.</li>
</ol>
6. Analisi del latte
<ol>
	<li>Utilizzare un kit per il dosaggio del lattosio in commercio (vedere la Tabella dei materiali) per misurare il lattosio del latte. Diluire il latte 75x con acqua sterile ed eseguire il test secondo il protocollo del kit.</li>
	<li>Misurare il grasso del latte utilizzando il metodo del creamatocrit dimostrato in altre pubblicazioni 16,17.</li>
	<li>Stimare le proteine del latte eseguendo il test proteico di Bradford18 con albumina sierica bovina come standard19. Prima di eseguire il test, centrifugare il latte a 4.000 × g per 15 minuti a 4 °C. Estrarre l'infranatante mediante pipettaggio e diluirlo a 1:10 con acqua sterile prima del test.</li>
	<li>Eseguire l'elettroforesi su gel di poliacrilammide (PAGE); separare 10 μg di proteine su un gel prefabbricato al 4%-12% di Bis-Tris come indicato dal produttore. Trasferire le proteine su membrane di fluoruro di polivinilidene (PVDF) e colorarle con Coomassie Blue R-250.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Metodo ottimizzato per una sola persona per la raccolta del latte negli studi sull'allattamento dei topi

<ol><li>Ericsson, A. C., Crim, M. J., Franklin, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+brief+history+of+animal+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">A brief history of animal modeling.</a> Mo Med. 110 (3), 201-205 (2013).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mighty+mouse%3A+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Mo Med. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Watford, M., Erbelding, E. J., Smith, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamine+metabolism+in+rat+small+intestine%3A+Response+to+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Trans%22%5BJournal%5D)">Glutamine metabolism in rat small intestine: Response to lactation.</a> Biochem Soc Trans. 14 (6), 1058-1059 (1986).</li>
<li>Robinson, A. M., Williamson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+glucose+metabolism+in+the+lactating+mammary+gland+of+the+rat+in+vivo+and+in+vitro.+Effects+of+starvation%2C+prolactin+or+insulin+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Comparison of glucose metabolism in the lactating mammary gland of the rat in vivo and in vitro. Effects of starvation, prolactin or insulin deficiency.</a> Biochem J. 164 (1), 153-159 (1977).</li>
<li>Kowalski, T. J., Wu, G., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+adipose+tissue+amino+acid+metabolism+in+vivo+as+assessed+by+microdialysis+and+arteriovenous+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rat adipose tissue amino acid metabolism in vivo as assessed by microdialysis and arteriovenous techniques.</a> Am J Physiol. 273 (3 Pt 1), E613-E622 (1997).</li>
<li>Ashcroft, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+assess+arteriovenous+differences+across+the+liver+and+hindlimb+muscles+in+mice+following+treadmill+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to assess arteriovenous differences across the liver and hindlimb muscles in mice following treadmill exercise.</a> STAR Protoc. 4 (1), 101985(2023).</li>
<li>Hallemeesch, M. M., Ten Have, G. A., Deutz, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+flux+measurements+across+portal+drained+viscera%2C+liver%2C+kidney+and+hindquarter+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Metabolic flux measurements across portal drained viscera, liver, kidney and hindquarter in mice.</a> Lab Animal. 35 (1), 101-110 (2001).</li>
<li>Le, H., Nguyen, M., Manso, H. E. C., Wang, M. D., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipocytes+are+the+only+site+of+glutamine+synthetase+expression+within+the+lactating+mouse+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Dev+Nutr%22%5BJournal%5D)">Adipocytes are the only site of glutamine synthetase expression within the lactating mouse mammary gland.</a> Curr Dev Nutr. 8 (6), 102168(2024).</li>
<li>Giordano, A., Smorlesi, A., Frontini, A., Barbatelli, G., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White%2C+brown+and+pink+adipocytes%3A+The+extraordinary+plasticity+of+the+adipose+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">White, brown and pink adipocytes: The extraordinary plasticity of the adipose organ.</a> Eur J Endocrinol. 170 (5), R159-R171 (2014).</li>
<li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+yield+and+composition+in+mice%3A+Effects+of+litter+size+and+lactation+number%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Physiol+A+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comp Biochem Physiol A Comp Physiol. 84 (1), 127-133 (1986).</li>
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<li>Muranishi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+collecting+mouse+milk+without+exogenous+oxytocin+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Method for collecting mouse milk without exogenous oxytocin stimulation.</a> Biotechniques. 60 (1), 47-49 (2016).</li>
<li>Gómez-Gallego, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+to+collect+high+volumes+of+milk+from+mice+%28mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anales+de+Veterinaria+de+Murcia%22%5BJournal%5D)">A method to collect high volumes of milk from mice (mus musculus).</a> Anales de Veterinaria de Murcia. 29, 55-61 (2014).</li>
<li>DePeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+collecting+milk+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Methods for collecting milk from mice.</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li>
<li>Oxytocin- oxytocin injection. , 
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<li>Lucas, A., Gibbs, J. A., Lyster, R. L., Baum, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creamatocrit%3A+Simple+clinical+technique+for+estimating+fat+concentration+and+energy+value+of+human+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Med+J%22%5BJournal%5D)">Creamatocrit: Simple clinical technique for estimating fat concentration and energy value of human milk.</a> Br Med J. 1 (6119), 1018-1020 (1978).</li>
<li>Paul, H. A., Hallam, M. C., Reimer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+in+the+rat+using+capillary+tubes+and+estimation+of+milk+fat+content+by+creamatocrit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection in the rat using capillary tubes and estimation of milk fat content by creamatocrit.</a> J Vis Exp. (106), e53476(2015).</li>
<li>Ernst, O., Zor, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linearization+of+the+Bradford+protein+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Linearization of the Bradford protein assay.</a> J Vis Exp. (38), e1918(1918).</li>
<li>Hueso, D., Fontecha, J., Gomez-Cortes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+the+most+commonly+used+methods+for+total+protein+determination+in+milk+of+different+species+and+their+ultrafiltration+products%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Comparative study of the most commonly used methods for total protein determination in milk of different species and their ultrafiltration products.</a> Front Nutr. 9, 925565(2022).</li>
<li>Anderson, S. M., Rudolph, M. C., Mcmanaman, J. L., Neville, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+stages+in+mammary+gland+development.+Secretory+activation+in+the+mammary+gland%3A+It%27s+not+just+about+milk+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Key stages in mammary gland development. Secretory activation in the mammary gland: It's not just about milk protein synthesis.</a> Breast Cancer Res. 9 (1), 204(2007).</li>
<li>Meier, H., Hoag, W. G., Mcburney, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characterization+of+inbred-strain+mouse+milk.+I.+Gross+composition+and+amino+acid+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Chemical characterization of inbred-strain mouse milk. I. Gross composition and amino acid analysis.</a> J Nutr. 85 (3), 305-308 (1965).</li>
<li>Hohlbaum, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severity+classification+of+repeated+isoflurane+anesthesia+in+c57bl%2F6jrj+mice-assessing+the+degree+of+distress%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Severity classification of repeated isoflurane anesthesia in c57bl/6jrj mice-assessing the degree of distress.</a> PLoS One. 12 (6), e0179588(2017).</li>
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<li>Kucia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-protein+diet+during+gestation+and+lactation+affects+mammary+gland+mrna+abundance%2C+milk+composition+and+pre-weaning+litter+growth+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">High-protein diet during gestation and lactation affects mammary gland mrna abundance, milk composition and pre-weaning litter growth in mice.</a> Animal. 5 (2), 268-277 (2011).</li>
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<li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+production+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Sci%22%5BJournal%5D)">Milk production in mice.</a> J Agric Sci. 37 (3), 224-235 (1947).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Fiale criogeniche da 1 mL</td><td>Corning</td><td>430658</td><td>Preferito per la raccolta precoce del latte</td></tr><tr><td>Siringa da 1 mL</td><td>Exel</td><td>26048</td><td></td></tr><tr><td>Provetta di raccolta per microcentrifuga da 2 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-681-344</td><td>Preferito per la raccolta del latte di picco e tardiva</td></tr><tr><td>Ago ipodermico da 18 G</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>305195</td><td></td></tr><tr><td>Ago ipodermico da 27 G</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>Salvietta per la preparazione dell'alcol</td><td>Honeywell</td><td>154818</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad Protein Assay Reagente colorante concentrato</td><td>Bio-Rad</td><td>5000006</td><td></td></tr><tr><td>Albumina sierica bovina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A2153</td><td></td></tr><tr><td>Immobilon -P Membrana PVDF</td><td>Immobilon</td><td>IPVH00010</td><td></td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Dechra</td><td>1000001250</td><td>Acquistato tramite Veternarian Office&nbsp;</td></tr><tr><td>Nastro di etichettatura da laboratorio</td><td>VWR International</td><td>89097</td><td></td></tr><tr><td>Kit per il dosaggio del lattosio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MAK487</td><td></td></tr><tr><td>Mini raccordi in polipropilene spinato</td><td>Cole-Parmer Instrument Company</td><td>6365-90</td><td></td></tr><tr><td>Dieta del topo</td><td>Lab Diet</td><td>5015</td><td></td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-Tris Mini Protein Gels, 4&ndash; 12%</td><td>Invitrogen</td><td>NP0335BOX</td><td></td></tr><tr><td>Optixcare Eye Lube</td><td>Aventix</td><td>N/A</td><td>acquistato tramite Veternarian Office&nbsp;</td></tr><tr><td>Oxytocin</td><td>Bimeda</td><td>1OXY015</td><td>acquistato tramite Veternarian Office.</td></tr><tr><td>Puntali per pipette P200</td><td>Gilson</td><td>F1733001</td><td></td></tr><tr><td>Tubo in PVC: 1/8'' ID</td><td>VWR International</td><td>MFLX07407-75&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tubo in PVC: 5/32'' ID</td><td>VWR International</td><td>MFLX07407-77</td><td></td></tr><tr><td>Tappo del setto</td><td>Chemglass Life Sciences</td><td>CG-3022-91</td><td></td></tr><tr><td>Pompa a vuoto</td><td>Drummond Scientific Co.</td><td>P-103635</td><td></td></tr><tr><td>xilazina</td><td>akorn salute animale</td><td>NDC 59399-110-20</td><td>acquistato tramite l'ufficio Veternarian.</td></tr></tbody></table>

un'efficiente tecnica per una sola persona per il campionamento del latte da topi da laboratorio

An Efficient Single-Person Technique for Milk Sampling from Laboratory Mice

Utilizzando questa tecnica, abbiamo campionato con successo una quantità sufficiente di latte in momenti diversi durante una lattazione di 21 giorni. Consideriamo il giorno del parto come il giorno 1 post-parto (PD1) e, in questo lavoro, abbiamo campionato il latte su PD2 (lattazione precoce) e PD10 (picco di lattazione), n = 4 ciascuno. Abbiamo ottenuto comodamente 0,1-0,5 ml di latte da ciascuna diga (Figura 1D). Per convalidare questo metodo, abbiamo misurato la composizione macronutritiva lorda di questi campioni di latte e confrontato le differenze tra il latte raccolto all'inizio e il picco di lattazione utilizzando il t-test di Student.
Abbiamo scoperto che la concentrazione di lattosio nel latte era in media di 12,3 ± 0,6 g/L su PD2 e 12,0 ± 0,9 g/L su PD10 (Tabella 1). La percentuale di grasso del latte è stata del 26,0 ± dell'1,0% e del 33,4 ± del 2,5% rispettivamente su PD2 e PD10. La concentrazione di grassi era di 174,4 ± 7,1 g/L su PD2 e significativamente più alta, 224,4 ± 17,1 g/L su PD10 (Tabella 1). Il contenuto proteico medio è stato di 70,1 ± 5,2 g/L su PD2 e 75,1 ± 2,6 g/L su PD10 (Tabella 1). Sebbene il contenuto totale di proteine del latte non fosse diverso tra PD2 e PD10, l'abbondanza relativa delle singole proteine del latte differiva. In particolare, l'αS1-caseina e le proteine acide del siero di latte erano più elevate nel latte PD10 rispetto al latte PD2 (p &lt; 0,05), mentre la β-caseina (p &lt; 0,05) ha mostrato una maggiore abbondanza in PD2 rispetto a PD10 (Figura 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig2.jpg"> 
Figura 2: Analisi delle proteine del latte. (A) Analisi PAGE di Coomassie Blue-stained del latte raccolto a PD2 e PD10. L'identificazione delle proteine è stata effettuata come descritto in precedenza14. (B) I singoli segnali proteici sono stati analizzati in ImageJ e normalizzati alla proteina totale colorata. I risultati sono stati espressi come media con barre di errore standard e singoli punti dati come punti. L'abbondanza media di ciascuna proteina su PD2 e PD10 è stata confrontata utilizzando un test t di Student a due code. *p &lt; 0,05, n = 4. Abbreviazioni: PAGE = elettroforesi su gel di poliacrilammide; PDn = giorno post-consegna n. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2"></td>
			<td>Nella media</td>
			<td>SEM</td>
			<td>Valore p</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Lattosio (g/L)</td>
			<td>PD2</td>
			<td>12.3</td>
			<td>0.6</td>
			<td rowspan="2">0.75</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10</td>
			<td>12.0</td>
			<td>0.9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Grasso (g/L)</td>
			<td>PD2</td>
			<td>174.4</td>
			<td>7.1</td>
			<td rowspan="2">0.04</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10</td>
			<td>224.4</td>
			<td>17.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Proteina (g/L)</td>
			<td>PD2</td>
			<td>70.1</td>
			<td>5.2</td>
			<td rowspan="2">0.42</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10</td>
			<td>75.1</td>
			<td>2.6</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabella 1: Composizione dei macronutrienti del latte raccolto a PD2 e PD10. I risultati, espressi come errore medio e standard della media (SEM), sono stati analizzati per esaminare gli effetti del giorno della lattazione sulla composizione del latte utilizzando un test t di Student a due code, n = 4.

Un'efficiente tecnica per una sola persona per il campionamento del latte da topi da laboratorio

Rodent models have been widely used in biology since the early 20th century to study basic physiology and biochemical mechanisms. In lactation and ...

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