Name: Istituzione di un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti e linfociti infiltranti il tumore (TIL) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-27T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 42 s
Description: Scopri come stabilire un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti con linfociti infiltranti il tumore. Questo metodo consente di studiare le interazioni immunitarie per terapie personalizzate contro il cancro.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>DMEM/F-12 avanzato</td><td>Gibco</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>2-mercaptoetanolo</td><td>sigma</td><td>63689</td><td></td></tr><tr><td>4% paraformaldeide</td><td>BBI</td><td>E672002-0100</td><td></td></tr><tr><td>7 AAD</td><td>Bioleggenda</td><td>420403</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Tocris</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>Supplemento B27</td><td>Gibco</td><td>17504-44</td><td></td></tr><tr><td>CD107a-PE-Cianina 7</td><td>Bioleggenda</td><td>328618</td><td></td></tr><tr><td>CD279-PE</td><td>Bioleggenda</td><td>329906</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo monoclonale CD3 (OKT3)</td><td>Invitrogen</td><td>14-0037-82</td><td></td></tr><tr><td>CD3-FITC</td><td>Bioleggenda</td><td>300406</td><td></td></tr><tr><td>CD45 (dominio intracellulare) (D9M8I)&nbsp;</td><td>CST</td><td>Codice: 13917S</td><td></td></tr><tr><td>CD4-APC/Cianina7</td><td>Bioleggenda</td><td>300518</td><td></td></tr><tr><td>CD8-APC</td><td>Bioleggenda</td><td>344722</td><td></td></tr><tr><td>CDX-2</td><td>MXB</td><td>Codice: RMA-0631</td><td></td></tr><tr><td>CK20</td><td>MXB</td><td>KIT-0025</td><td></td></tr><tr><td>CK7</td><td>MXB</td><td>KIT-0021</td><td></td></tr><tr><td>Dylight 488, IgG anti-coniglio di capra</td><td>Abbkine</td><td>Codice: A23220</td><td></td></tr><tr><td>Dylight 549, IgG anti-topo di capra</td><td>Abbkine</td><td>Codice A23310</td><td></td></tr><tr><td>FEG</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>EpCAM</td><td>CST</td><td>Codice 36746T</td><td></td></tr><tr><td>Siero fetale bovino (FBS)</td><td>Cellmax</td><td>SA211.02</td><td></td></tr><tr><td>FGF 10</td><td>Peprotech</td><td>100-26</td><td></td></tr><tr><td>Gastrin (Umano)</td><td>Tocris</td><td>3006</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMax 100x</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Sigma</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>Kit di separazione cellulare CD3+ umano (RUO)</td><td>RWD</td><td>K1201-10</td><td></td></tr><tr><td>Proteina ricombinante IFN-gamma umana</td><td>PeproTech</td><td>300-02-20UG</td><td></td></tr><tr><td>Ki-67</td><td>CST</td><td>9449</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>Corning</td><td>354234</td><td></td></tr><tr><td>N-acetilcisteina</td><td>Sigma</td><td>Codice: A9165</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinammide</td><td>Sigma</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>Nivolumab (anti-PD-1)</td><td>Sellerk</td><td>A2002&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Penicillina/Streptomicina</td><td>Sigma</td><td>V900929</td><td></td></tr><tr><td>penicillina-streptomicina</td><td>NCM Biotech</td><td>C100C5</td><td></td></tr><tr><td>Primocina</td><td>Invivogen</td><td>Formica-pm-1</td><td></td></tr><tr><td>Tampone di lisi dei globuli rossi</td><td>termo-innevatore</td><td>00-4300-54</td><td></td></tr><tr><td>IL-2 umana ricombinante (senza carrier)</td><td>Bioleggenda</td><td>589104</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Gibco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SB202190</td><td>Sellerk</td><td>Episodio 1077</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Macchia blu 0,4%</td><td>termo-innevatore</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Ultra-LEAF Anticorpo CD28 umano purificato</td><td>Bioleggenda</td><td>302934</td><td></td></tr><tr><td>Ultra-LEAF Anticorpo CD3 umano purificato</td><td>Bioleggenda</td><td>317325</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>Sellerk</td><td>Episodio 1049</td><td></td></tr></tbody></table>

istituzione di un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti e linfociti infiltranti il tumore (til)

Establishment of a Co-culture System of Patient-Derived Colorectal Tumor Organoids and Tumor-Infiltrating Lymphocytes (TILs)

Definizione e caratterizzazione delle DOP CRC I campioni tumorali sono stati ottenuti da pazienti con CRC. Il tessuto tumorale CRC appena resecato è stato utilizzato per stabilire PDO e TIL, che sono stati successivamente impiegati in esperimenti di co-coltura PDO-TIL (Figura 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68346/68346fig1.jpg"> 
Figura 1<...

Istituzione di un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti e linfociti infiltranti il tumore (TIL)

Colorectal cancer (CRC) is the third most common cancer worldwide. Tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) have been identified as an important prognostic ...

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Ricerca sul cancro

Un metodo semplice per determinare primario murino organoide tumore colon è descritto. Questo metodo utilizza la funzione che le cellule tumorali del colon sopravvivere e crescere in organoidi in terreni contenenti fattori di crescita limitate, mentre colon normale epiteliale non lo fanno.

In vitro organoide Cultura di primari tumori del colon mouse

Descriviamo la creazione di tumori colorettali ortotopici attraverso l'iniezione di cellule tumorali o organoidi nel cecum dei topi e il successivo isolamento di cellule tumorali circolanti (CTC) da questo modello.

Isolamento delle cellule tumorali circolanti in un modello di topo ortotopico del tumore del colon-retto

Un modello animale è necessario per decifrare il ruolo di fare circolare le cellule del tumore (CTCs) nel promuovere la colonizzazione del polmone durante la metastasi del cancro. Qui, abbiamo stabilito ed effettuato con successo un in vivo analisi specificamente prova il requisito dell'Assemblea polimerici fibronectina (polyFN) su CTCs per colonizzazione del polmone.

L'istituzione di un'analisi di colonizzazione del polmone per la visualizzazione di cellule del tumore nei tessuti polmonari di circolazione

Per consentire la rivelazione altamente sensibile del cancro colorettale umano diffondere cellule (CRC), colonizzando tessuti, mostriamo qui un protocollo per la trasduzione efficiente delle particelle lentivirali proteina fluorescente verde (GFP) in cellule di organoid PDX-derivato CRC prima del loro iniezione nel destinatari topi, con osservazione al microscopio stereo-fluorescenza.

Rilevamento ad alta sensibilità dei Micrometastases generati da GFP trasdotte Lentivirus Organoids coltivate da un tumore del Colon paziente-derivato

È stato sviluppato un sistema di modelli in vitro per catturare i cambiamenti architettonici dei tessuti durante la progressione del carcinoma squamoso polmonare (LUSC) in una co-coltura tridimensionale (3D) con fibroblasti associati al cancro (CAF). Questo sistema organoide fornisce una piattaforma unica per studiare i ruoli dei diversi cambiamenti delle cellule tumorali-intrinseche ed estrinseci che modulano il fenotipo tumorale.

Sistema di cocultura multidimensionale per modellare la progressione del carcinoma squamoso polmonare

Gli organoidi derivati dal paziente (DOP) sono un potente strumento nella ricerca traslazionale sul cancro, che riflette sia l'eterogeneità genetica che fenotipica della malattia e la risposta alle terapie antitumorali personalizzate. Qui, viene dettagliato un protocollo consolidato per generare DOP di carcinoma della vescica primario umano in preparazione per la valutazione delle analisi fenotipiche e delle risposte ai farmaci.

Coltura di organoidi del cancro della vescica come strumenti di medicina di precisione

Qui viene fornito un protocollo dettagliato per stabilire organoidi mammari umani da resezioni di tumore al seno derivate da pazienti o tessuto mammario normale. Il protocollo fornisce istruzioni dettagliate complete per la coltivazione, il congelamento e lo scongelamento degli organoidi mammari derivati dal paziente umano.

Istituzione e coltura di organoidi mammari derivati da pazienti

Gli organoidi tumorali hanno rivoluzionato la ricerca sul cancro e l'approccio alla medicina personalizzata. Rappresentano un modello tumorale clinicamente rilevante che consente ai ricercatori di stare un passo avanti rispetto al tumore in clinica. Questo protocollo stabilisce organoidi tumorali da campioni di tessuto tumorale pancreatico fresco e xenotrapianti derivati da pazienti di origine adenocarcinoma pancreatica.

Costituzione di organoidi e fibroblasti tumorali derivati dal cancro del pancreas da tessuto fresco

Questo protocollo descrive un metodo per isolare simultaneamente organoidi tumorali, fibroblasti associati al carcinoma (CAF) e fibroblasti (CF) non associati al tumore provenienti dallo stesso paziente con carcinoma a cellule squamose esofagee (ESCC). L'impiego di questi materiali abbinati ai pazienti potrebbe evitare problemi legati alla variabilità tra pazienti e fornire una piattaforma sperimentale adeguata per la ricerca ESCC.

Stabilimento di organoidi tumorali, fibroblasti associati al carcinoma e fibroblasti corrispondenti dallo stesso paziente con cancro esofageo

Il seguente protocollo si concentra sulla creazione di una coltura primaria di sarcoma dei tessuti molli paziente-derivato (STS). Questo modello potrebbe aiutarci a comprendere meglio le priorità bassa molecolare e il profilo farmacologico di queste malignità rare e potrebbe rappresentare un punto di partenza per ulteriori ricerche finalizzate a migliorare la gestione di STS.

Istituzione di una coltura primaria di Sarcoma dei tessuti molli paziente-derivato

Scopri come stabilire un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti con linfociti infiltranti il tumore. Questo metodo consente di studiare le interazioni immunitarie per terapie personalizzate contro il cancro.

Istituzione di un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti e linfociti infiltranti il tumore (TIL) (Video) | JoVE Journal

Istituzione di un sistema di co-coltura di organoidi tumorali colorettali derivati da pazienti e linfociti infiltranti il tumore (TIL)

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