Name: Saggio della cometa per quantificare il danno al DNA nelle cellule 32D che esprimono mutanti FLT3 dopo lesposizione a inibitori FLT3 di tipo I e II (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-17T13:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: Scopri l'uso del saggio della cometa per quantificare il danno al DNA nelle cellule 32D con mutanti FLT3 esposte agli inibitori di tipo I e II. Questo metodo aiuta a ottimizzare le strategie terapeutiche per la leucemia mieloide acuta.

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1. Costruzione di un modello di danno al DNA in cellule 32D con mutazioni FLT3-ITD 18
<ol>
	<li>Recupero cellulare<ol>
		<li>Utilizzando una pinza, trasferire rapidamente le cellule 32D mutanti FLT3-ITD crioconservate (conservate a -80 °C). Recuperare i crioviali utilizzando una pinza e immergerli immediatamente in un bagno d'acqua a temperatura regolata (37 °C ± 0,5 °C) per esattamente 60 s per completare lo scongelamento controllato. NOTA: Durante lo scongelamento, agitare a intermittenza i crioviali nel bagno d'acqua per garantire un riscaldamento uniforme.</li>
		<li>Centrifugare i campioni crioconservati a 150 × g per 5 minuti a 25 °C ± 1 °C. Aspirare con cura il surnatante utilizzando pipette sierologiche sterili conservando il pellet cellulare.</li>
		<li>Aggiungere 1 mL di terreno di coltura completo (RPMI 1640 + 10% siero fetale bovino + 1% penicillina/streptomicina) alla provetta per crioconservazione. Eseguire una triturazione delicata attraverso 10 cicli di pipettaggio sequenziali (volume da 1 mL) per garantire una risospensione completa. Trasferire la sospensione cellulare in una piastra per colture cellulari da 100 mm e aggiungere 7 mL di terreno completo per ottenere un volume finale di 8 mL.</li>
		<li>Agitare delicatamente il recipiente di coltura con cinque movimenti orizzontali e cinque movimenti rotatori. Mantenere le cellule in un incubatore umidificato a 37,0 °C ± 0,2 °C con il 5% di CO2 e il 95% di umidità. Incubare per 24 ore prima dell'elaborazione sperimentale.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Valutazione della vitalità cellulare<ol>
		<li>Selezionare le cellule 32D mutanti FLT3-ITD nella fase di crescita logaritmica con un buon stato cellulare per l'esperimento. NOTA: Le cellule nella fase di crescita logaritmica di solito hanno un ciclo di divisione breve e un'alta frequenza di divisione cellulare.<ol>
			<li>Osservare la morfologia e lo stato di crescita delle cellule 32D mutate in FLT3-ITD utilizzando un microscopio elettronico. Assicurarsi che i criteri per le soglie di proliferazione cellulare siano soddisfatti: cercare cellule che abbiano la forma di un singolo globulo con bordi lisci, dispersione uniforme, pochi aggregati, dimensioni cellulari uniformi, integrità della membrana plasmatica intatta e detriti cellulari &lt; 5%.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Utilizzare un contatore di cellule per determinare la concentrazione della sospensione cellulare. NOTA: Miscelare le sospensioni cellulari (10 cicli di pipettaggio sequenziali utilizzando puntali sterili da 1 mL al 50% della velocità massima della pipetta).</li>
		<li>Standardizzare la sospensione cellulare a 2,0 × 105 cellule/mL in un terreno di crescita completo utilizzando la diluizione iterativa. Utilizzando una pipetta, erogare aliquote da 50 μl nei pozzetti centrali (B2-G7) di una piastra a fondo piatto a 96 pozzetti. Riempire i pozzetti periferici (A1-H12) con 100 μL di PBS sterile per mantenere l'umidità e ridurre al minimo gli effetti dell'evaporazione dei bordi.</li>
		<li>Preparazione del terreno contenente inibitore FLT3: selezionare nove pozzetti in una piastra di coltura cellulare a 12 pozzetti ed etichettarli secondo la scala di concentrazione dell'inibitore FLT3 (0, 3,90625, 7,8125, 15,625, 31,25, 62,5, 125, 250, 500 e 1000 nM). Aggiungere 400 μL di terreno completo ai pozzetti etichettati con 10,0 μM e 200 μL di terreno completo ai pozzetti rimanenti.<ol>
			<li>Diluizione di Gilteritinib: aggiungere 4 μL di reagente Gilteritinib da 100 μM (Gilteritinib in dimetilsolfossido) a ciascuno dei pozzetti etichettati con 1000 nM utilizzando una pistola pipettatrice e miscelare accuratamente la soluzione. Pipettare 200 μL di Gilteritinib da 1000 nM nei pozzetti marcati con 500 nM e mescolare; quindi pipettare 200 μl di Gilteritinib da 500 nM nei pozzetti etichettati con 250 nM e mescolare. Ogni volta, prelevare 200 μl della diluizione precedente nel pozzetto successivo e mescolare per ottenere la concentrazione desiderata.</li>
			<li>Diluizione AC220: aggiungere 4 μl di reagente AC220 da 100 μM (AC220 in dimetilsolfossido) a ciascuno dei pozzetti etichettati con 1000 nM utilizzando una pistola per pipette. Seguire il passaggio 1.2.4.1 per gli altri pozzetti. NOTA: Assicurarsi che la soluzione madre dell'inibitore FLT3 nella pipetta sia completamente trasferita nei pozzetti per evitare residui di soluzione. Assicurarsi che la soluzione sia ben miscelata prima di procedere con la diluizione.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Incubazione: Erogare il terreno contenente inibitori FLT3 in appositi pozzetti (50 μL/pozzetto) utilizzando una pipetta. Mantenere la piastra a 96 pozzetti in condizioni di coltura fisiologiche (37,0 °C ± 0,2 °C, 5% CO2, 95% di umidità) per esattamente 72 ore ± 15 minuti.</li>
		<li>Aliquotare 10 μL di reagente CCK-8 in tutti i pozzetti di controllo sperimentali e in bianco utilizzando una pipetta. Proteggere la piastra dalla luce e incubarla in condizioni normossiche (37 °C, 5% CO2) per 2,0 H ± 10 min. NOTA: Erogare il reagente a bassa velocità della pipetta con una profondità di immersione del puntale di 2 mm per ridurre al minimo la formazione di bolle. Evitare la formazione di bolle d'aria durante l'aggiunta del campione per evitare interferenze con le letture OD.</li>
		<li>Rimuovere la piastra a 96 pozzetti dall'incubatore e misurare l'assorbanza a 450 nm utilizzando un lettore di micropiastre. Registra i risultati.</li>
		<li>Calcolare la % di inibizione secondo la formula di calcolo IC50 : Inibizione (%) = <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68469/68469eq1.jpg" style="margin: auto;"> × 100% Il pozzetto sperimentale del farmaco denota pozzetti cellulari trattati con il farmaco. Il pozzetto di controllo cellulare denota i pozzetti cellulari che non sono stati trattati con il farmaco. I pozzetti di controllo in bianco indicano solo il fluido senza celle.</li>
		<li>Analizzare i dati dose-risposta normalizzati attraverso la regressione non lineare, utilizzando un modello logistico a quattro parametri. Fare clic sul pulsante Raccordo curva (Fitting Curve) per l'adattamento della curva. Ricavare la concentrazione inibitoria semimassimale (IC50) dalla convergenza del modello (R2 &gt; 0,98, somma residua dei quadrati &lt; 0,15) e calcolare gli intervalli di confidenza al 95% attraverso il ricampionamento bootstrap di 1000 iterazioni.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Esperimento di danno al DNA di cellule 32D con mutazione FLT3-ITD indotta da un inibitore di FLT3<ol>
		<li>Selezionare le cellule 32D mutanti FLT3-ITD che mostrano uno scatto di crescita (tempo di raddoppio della popolazione &lt; 24 ore) per la valutazione del danno al DNA.</li>
		<li>Contare le celle (vedere il passaggio 1.2.2 per i dettagli).</li>
		<li>Semina cellulare: regolare la densità della sospensione cellulare a 1 × 106 cellule per piastra, utilizzando una piastra di 6 cm di diametro e 4 ml di sospensione cellulare per piastra.</li>
		<li>Preparare tre repliche per ogni concentrazione di inibitore: 55 nM gilteritinib: 4 mL di terreno + 2,2 μL di stock da 100 μM, 0,15 nM AC220: 4 mL di terreno + 6 μL di stock da 100 nM. Mescolare le soluzioni a vortice ed equilibrarle a 37 °C per 15 min; Agitare delicatamente i tubi per garantire un'adeguata miscelazione. Aspirare il terreno originale e sostituirlo con 4 mL/piatto di terreno contenente inibitori appena preparato utilizzando pipette sierologiche sterili.</li>
		<li>Incubare le cellule trattate in condizioni fisiologiche (37 °C, 5% CO2, 95% di umidità) per intervalli definiti (0, 2, 4, 6 H). Elaborate immediatamente i controlli a tempo zero per la valutazione del danno al DNA di base.</li>
		<li>Saggio di esclusione del blu di tripano<ol>
			<li>Centrifugare le cellule raccolte a 150 × g per 1 minuto. Scartare il surnatante e risospendere le cellule con 1 mL di terreno di coltura.</li>
			<li>Pipettare 100 μl di cellule risospese in una provetta da centrifuga di plastica, aggiungere 100 μl di colorante blu di tripano (2x), mescolare delicatamente e colorare per 3 minuti.</li>
			<li>Contare le celle (vedere il passaggio 1.2.2 per i dettagli).</li>
			<li>Calcolare la vitalità cellulare come segue: %Sopravvivenza cellulare = <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/68469/68469eq2.jpg" style="margin: auto;"> × 100% NOTA: Solo i campioni con vitalità ≥90% sono stati processati per il test della cometa.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Preparazione del reagente e preparazione del campione cellulare
<ol>
	<li>Equilibrare la soluzione di lisi (contenente 2,5 M NaCl, 100 mM EDTA, 10 mM Tris, pH 10, 1% Triton X-100, 10% DMSO) a 4 °C ± 0,5 °C per 30 minuti utilizzando un frigorifero.</li>
	<li>Sciogliere l'agarosio bassofondente (LMA) a 95 °C per 15 minuti, quindi tenerlo a bagnomaria a 37 °C per evitare la solidificazione.</li>
	<li>Preparare il tampone per elettroforesi alcalina (300 mM NaOH, 1 mM EDTA, pH &gt;13) pesando 12 g di NaOH utilizzando una bilancia elettronica, pipettando 2 mL di soluzione 500 mM EDTA e quindi aggiungendo ddH2O per ottenere fino a 1 L di tampone.</li>
	<li>Prelievo di cellule<ol>
		<li>Raccogliere la sospensione cellulare in una provetta da centrifuga da 15 mL. Centrifugare le sospensioni cellulari a 800 × g per 5 min. Aspirare i surnatanti utilizzando la filtrazione sottovuoto.<ol>
			<li>Risospendere delicatamente le cellule in 1 mL di terreno completo utilizzando puntali per pipette a foro largo da 1 mL, seguiti da 10 inversioni verticali.</li>
			<li>Contare le celle come nel passaggio 1.2.</li>
			<li>Centrifugare la sospensione cellulare in una provetta da centrifuga da 15 mL a 150 × g per 5 minuti per rimuovere l'intero terreno. Risospendere le cellule lavate in PBS privo di calcio a ~5,0 × 105 cellule/mL.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Procedura di analisi della cometa
<ol>
	<li>Preparare in anticipo i vetrini del saggio delle comete e i campioni di cellule. Preparare una miscela 10:1 (v/v) di agarosio LMA e sospensione cellulare (5 × 105 cellule/mL) in provette da 1,5 mL utilizzando una pipetta e mescolare delicatamente. Erogare 55 μL di aliquote della miscela di cellule di agarosio sui vetrini cometa utilizzando una pipetta tenuta a un angolo di 45°, mantenendo una distanza di 2 mm dalla superficie del vetrino. Posizionare i vetrini rivestiti con la miscela a 4 °C per 30 minuti per evitare la luce. NOTA: Durante l'aggiunta della LMA e della miscela cellulare ai vetrini del saggio della cometa, erogare la sospensione lentamente e in modo uniforme per prevenire la formazione di bolle e garantire una distribuzione omogenea del gel.</li>
	<li>Immergere i vetrini solidificati in una soluzione di lisi preraffreddata (contenente 2,5 M di NaCl, 100 mM di EDTA, 10 mM di Tris, pH 10, 1% di Triton X-100, 10% di DMSO) ed eseguire la lisi per ≥1 ora a 4 °C in condizioni di protezione dalla luce.</li>
	<li>Dopo la lisi, rimuovere il vetrino dal lisato e utilizzare una pistola per pipette per aspirare quanto più liquido possibile attorno alla paletta. Quindi posizionare il vetrino in tampone per elettroforesi alcalina (300 mM NaOH, 1 mM EDTA, pH &gt;13) e pre-equilibrare per 1 ora a 4 °C, facendo attenzione a evitare la luce.</li>
	<li>Elettroforesi: posizionare i vetrini in una camera di elettroforesi e aggiungere una quantità sufficiente di soluzione alcalina per elettroforesi per immergere i vetrini. Condurre l'elettroforesi a 24 V (equivalente a 0,74 V/cm) con corrente costante (300 mA) per 30 minuti utilizzando un tampone pre-bilanciato (4 °C) per ridurre al minimo i danni al DNA.</li>
	<li>Neutralizzazione: Dopo l'elettroforesi, utilizzare una pistola per pipette per aspirare la soluzione alcalina per elettroforesi dal vetrino, immergere i vetrini per 2 x 5 minuti in dH2O, quindi immergerli in etanolo al 70% per 5 minuti. Asciugare i vetrini in un'incubatrice a 37 °C per 15 minuti.</li>
	<li>Colorazione: Applicare un'aliquota da 100 μl di colorante di acido nucleico 1x YeaRed per pozzetto e incubare per 30 minuti a temperatura ambiente in condizioni di protezione dalla luce. Rimuovere le macchie in eccesso con un delicato risciacquo acquoso seguito da asciugatura termica a 37 °C.</li>
	<li>Imaging: Esecuzione della visualizzazione a fluorescenza utilizzando un microscopio a fluorescenza dotato di un obiettivo 4x, con acquisizione di immagini digitali condotta in condizioni di esposizione standardizzate.</li>
</ol>
4. Trattamento dei dati
<ol>
	<li>Esegui l'analisi quantitativa delle immagini per determinare i parametri standard della cometa, tra cui il DNA della coda (%), il momento della coda dell'oliva e la lunghezza della coda (μm).<ol>
		<li>Aprire l'interfaccia del software (Figura 5).</li>
		<li>Importare un'immagine nel software, fare clic su File, quindi fare clic su Seleziona file per importare l'immagine che si desidera analizzare nel software. Quindi, tieni premuto il pulsante del mouse e trascina finché non viene visualizzata una casella blu. Trascinare la casella blu per assicurarsi che la cella che si desidera analizzare sia racchiusa all'interno della casella. L'opzione Regola nella figura può essere utilizzata per regolare la posizione della cornice in modo da includere l'intera cella (Figura 5).</li>
		<li>Prima di iniziare l'analisi, fare clic su Avvia, quindi su Analizza. I risultati dell'analisi a cella singola verranno visualizzati sul lato destro sotto "Profili". Dopo aver analizzato ogni cella, fai clic su Salva. I parametri che possono essere rilevati vengono visualizzati sul lato destro di "Profili" e i valori numerici dei vari parametri vengono visualizzati nella parte inferiore. Infine, fai clic su File | Esporta risultati. I risultati ottenuti includono HeadArea, TailArea, HeadDNA, TailDNA, HeadDNA%, TailDNA%, HeadRadius, TailLength, CometLength, HeadMeanX, TailMeanX, TailMoment e OliveTailMoment.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Swaminathan, M., Wang, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+therapies+for+AML%3A+A+round-up+for+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Novel therapies for AML: A round-up for clinicians.</a> Expert Rev Clin Pharmacol. 13 (12), 1389-1400 (2020).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>0,5 M EDTA</td><td>Beyotime</td><td>ST066</td><td></td></tr><tr><td>1x Colorazione di acido nucleico YeaRed</td><td>Yeasen</td><td>Codice 10202ES</td><td></td></tr><tr><td>CELLA 32D</td><td>Cobioer</td><td>CBP60995</td><td></td></tr><tr><td>AC220</td><td>TargetMol</td><td>T2066</td><td></td></tr><tr><td>Kit di conteggio cellulare-8</td><td>Dojindo</td><td>CK04</td><td></td></tr><tr><td>Piastra di conteggio delle cellule</td><td>QiuJing</td><td>XB-K-25</td><td></td></tr><tr><td>Incubatore CO2</td><td>Termo</td><td>51032872</td><td></td></tr><tr><td>Progetto software per il saggio delle comete (CASP)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kit di analisi della cometa&nbsp;</td><td>Trevigen</td><td>4250-050-K</td><td></td></tr><tr><td>Citazione 5</td><td>BioTek</td><td>16280004</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>PADELLA</td><td>ST30-3302</td><td></td></tr><tr><td>Gilteritinib</td><td>TargetMol</td><td>Codice: T4409</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prisma 9.0</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>centrifuga ad alta velocità</td><td>Termo</td><td>&nbsp; 9AQ2861</td><td></td></tr><tr><td>Pipette L-1000XLS+</td><td>Rainin</td><td>17014382</td><td></td></tr><tr><td>Pipette L-20XLS+</td><td>Rainin</td><td>17014392</td><td></td></tr><tr><td>serbatoio di azoto liquido</td><td>Mvecryoge</td><td>YDS-175-216</td><td></td></tr><tr><td>Fotometro per micropiastre Multiskan FC</td><td>Termo</td><td>1410101</td><td></td></tr><tr><td>Na2OH</td><td>DAMAO</td><td>1588</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Distretto di Solarbio</td><td>P1020</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di penicillina-streptomicina, 100x</td><td>Beyotime</td><td>Codice: C0222</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 medio</td><td>Gibco</td><td>C22400500BT</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio trinoculare per cellule vive</td><td>Motico</td><td>1.1001E+12</td><td></td></tr><tr><td>Congelatore a bassissima temperatura</td><td>Capelli</td><td>V118574</td><td></td></tr></tbody></table>

saggio della cometa per quantificare il danno al dna nelle cellule 32d che esprimono mutanti flt3 dopo l'esposizione a inibitori flt3 di tipo i e ii

Comet Assay to Quantify DNA Damage in FLT3 Mutant-expressing 32D Cells after Exposure to Type I and Type II FLT3 Inhibitors

Il test della cometa è stato sistematicamente impiegato per quantificare i profili differenziali di danno al DNA indotti da gilteritinib e AC220 in linee cellulari mutanti FLT3. Le analisi hanno mostrato che la differenza nel danno al DNA tra le popolazioni cellulari non trattate con gilteritinib e AC220 non era statisticamente significativa (P &gt; 0,05). Aumenti dose-dipendenti dei valori di DNA della coda (%) e di Olive Moment Tail (OMT) hanno raggiunto la significatività statistica (P &lt; 0,05) dopo esposizioni di 2...

Saggio della cometa per quantificare il danno al DNA nelle cellule 32D che esprimono mutanti FLT3 dopo l'esposizione a inibitori FLT3 di tipo I e II

FMS-like tyrosine kinase 3 (FLT3), a class III receptor tyrosine kinase, exhibits a mutation frequency of approximately 30% in acute myeloid leukemia ...

comet-assay-to-quantify-dna-damage-flt3-mutant-expressing-32d-cells

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Il video mostra il test della cometa per rilevare danni al DNA in seguito all'esposizione ad agenti nocivi. In condizioni alcaline, il DNA si srotola e si denatura, e dopo l'elettroforesi, il DNA integro e danneggiato migra in modo diverso nel gel di agarosio, formando una struttura a forma di cometa. Il DNA intatto che migra lentamente forma la testa circolare della cometa, mentre i frammenti di DNA danneggiati che migrano rapidamente formano la coda allungata della cometa.

Saggio della cometa per il rilevamento del danno al DNA nelle cellule

Il test della cometa è un modo efficiente di rilevare rotture a singolo e doppio filamento, compresi alcali-labili siti e DNA-DNA/DNA-protein legami incrociati sul DNA in tutte le cellule, compresi i neuroni dell'ippocampo. Il metodo sfrutta la migrazione differenziale di DNA in un campo elettrico dovuto a differenze nelle quantità di danno al DNA.

Il saggio danneggiare il DNA in neuroni ippocampali Utilizzo del Comet Assay

Descriviamo qui una piattaforma che consente di rilevare test della cometa di danno al DNA con velocità senza precedenti. Il dispositivo modelli di cellule di mammifero in un microarray e consente l'elaborazione parallela di 96 campioni. L'approccio facilita l'analisi del danno al DNA livello di base, danno al DNA indotto da esposizione e di riparazione del DNA cinetica.

CometChip: A High-throughput di 96-Well Piattaforma per la misurazione dei danni cagionati DNA in cellule umane Microarrayed

Il test della cometa è un metodo efficace per rilevare danni al DNA compreso singolo e doppio filamento di DNA si rompe. Descriviamo la cometa alcalino e neutro saggi per misurare il danno del DNA in cellule di cancro per valutare l'effetto terapeutico della chemioterapia.

Valutazione In Vitro del DNA danni utilizzando test della cometa

Questo protocollo descrive diverse procedure per la preparazione di campioni di tessuto congelato di alta qualità al momento della necroscopia per l'uso nel saggio della cometa per valutare il danno al DNA: 1) tessuto macinato, 2) cellule epiteliali raschiate dal tratto gastrointestinale e 3) tessuto immatolato campioni, richiedendo l'omogeneizzazione utilizzando un dispositivo di mincing dei tessuti.

Uso di tessuto congelato nel saggio Cometa per la valutazione del danno del DNA

Il saggio della cometa è un mezzo popolare per rilevare danni al DNA. Questo studio descrive un approccio per eseguire diapositive in varianti rappresentative del saggio della cometa. Questo approccio ha aumentato significativamente il numero di campioni diminuendo il tempo di esecuzione del test, il numero di manipolazioni dei vetrini e il rischio di danni ai gel.

Un approccio di analisi delle comete ad alto rendimento per la valutazione del danno al DNA cellulare

Ipersensibilità di tipo ritardato (DTH) è una reazione infiammatoria mediata dai linfociti memoria CCR7-T effettrici. Qui mostriamo come per indurre DTH attivo nei ratti Lewis e monitorare la risposta infiammatoria.

Induzione e Monitoraggio di Active ipersensibilità di tipo ritardato (DTH) in ratti

Cellule T regolatorie: potenziale terapeutico per terapia antirigetto nei trapianti e diabete di tipo I

Ipersensibilità di tipo ritardato (DTH) è una reazione infiammatoria mediata da CCR7-memoria T effettrici (TEM) linfociti. Qui mostriamo come attivare antigene-specifiche cellule TEM, inducono DTH adottivi nei ratti Lewis e monitorare la risposta infiammatoria.

Induzione e Monitoraggio adottivi di ipersensibilità ritardata nei ratti

Un protocollo dettagliato è descritto per l'imaging in tempo reale la formazione di complessi di riparazione del DNA...

Imaging mismatch repair e risposte cellulari al danno del DNA in Bacillus subtilis</em

Scopri l'uso del saggio della cometa per quantificare il danno al DNA nelle cellule 32D con mutanti FLT3 esposte agli inibitori di tipo I e II. Questo metodo aiuta a ottimizzare le strategie terapeutiche per la leucemia mieloide acuta.

Saggio della cometa per quantificare il danno al DNA nelle cellule 32D che esprimono mutanti FLT3 dopo lesposizione a inibitori FLT3 di tipo I e II (Video) | JoVE Journal

Saggio della cometa per quantificare il danno al DNA nelle cellule 32D che esprimono mutanti FLT3 dopo l'esposizione a inibitori FLT3 di tipo I e II

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