Name: Un framework di imaging multimodale per far progredire la fenotipizzazione di cellule viventi di cancro al seno senza etichetta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-22T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 37 s
Description: Scopri un approccio di imaging multimodale per la fenotipizzazione morfo-chimica di cellule di cancro al seno umane senza etichetta. Questo metodo combina microspettroscopia Raman confocale e microscopia a fase tomografica per analisi biochimiche e morfologiche rapide e non invasive.

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<ol><li>Gosnell, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+non-invasive+cell+characterisation+and+discrimination+based+on+multispectral+autofluorescence+features%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Quantitative non-invasive cell characterisation and discrimination based on multispectral autofluorescence features.</a> Sci Rep. 6 (1), 23453(2016).</li>
<li>Bresci, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+morpho-molecular+phenotyping+of+living+cancer+cells+by+combined+Raman+spectroscopy+and+phase+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Label-free morpho-molecular phenotyping of living cancer cells by combined Raman spectroscopy and phase tomography.</a> Commun Biol. 7 (1), 1-13 (2024).</li>
<li>Rocha, R. A., Fox, J. M., Genever, P. G., Hancock, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomolecular+phenotyping+and+heterogeneity+assessment+of+mesenchymal+stromal+cells+using+label-free+Raman+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Biomolecular phenotyping and heterogeneity assessment of mesenchymal stromal cells using label-free Raman spectroscopy.</a> Sci Rep. 11 (1), 4385(2021).</li>
<li>Vicar, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+segmentation+methods+for+label-free+contrast+microscopy%3A+review+and+comprehensive+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Bioinform%22%5BJournal%5D)">Cell segmentation methods for label-free contrast microscopy: review and comprehensive comparison.</a> BMC Bioinform. 20 (1), 360(2019).</li>
<li>Kang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+confocal+Raman+and+quantitative+phase+microscopy+system+for+biomedical+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Combined confocal Raman and quantitative phase microscopy system for biomedical diagnosis.</a> Biomed Opt Express. 2 (9), 2484-2492 (2011).</li>
<li>Pandey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+diffraction+phase+microscopy+and+Raman+imaging+for+label-free+morpho-molecular+assessment+of+live+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Integration of diffraction phase microscopy and Raman imaging for label-free morpho-molecular assessment of live cells.</a> J Biophotonics. 12 (4), e201800291(2019).</li>
<li>Zhao, W., Sun, D., Yue, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+multimodal+non-linear+optical+imaging+of+three-dimensional+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Phys%22%5BJournal%5D)">Label-free multimodal non-linear optical imaging of three-dimensional cell cultures.</a> Front Phys. 10, 1100090(2023).</li>
<li>Hanna, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy%3A+current+applications+in+breast+cancer+diagnosis%2C+challenges+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy: current applications in breast cancer diagnosis, challenges and future prospects.</a> Br J Cancer. 126 (8), 1125-1139 (2022).</li>
<li>Dodo, K., Fujita, K., Sodeoka, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+for+chemical+biology+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy for chemical biology research.</a> J Am Chem Soc. 144 (43), 19651-19667 (2022).</li>
<li>Puppels, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+single+living+cells+and+chromosomes+by+confocal+Raman+microspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Studying single living cells and chromosomes by confocal Raman microspectroscopy.</a> Nature. 347 (6290), 301-303 (1990).</li>
<li>Elumalai, S., Managó, S., De Luca, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+microscopy%3A+progress+in+research+on+cancer+cell+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Raman microscopy: progress in research on cancer cell sensing.</a> Sensors (Basel). 20 (19), 5525(2020).</li>
<li>Chandra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unveiling+the+molecular+secrets%3A+a+comprehensive+review+of+Raman+spectroscopy+in+biological+research%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">Unveiling the molecular secrets: a comprehensive review of Raman spectroscopy in biological research.</a> ACS Omega. 9 (51), 50049-50063 (2024).</li>
<li>Cacace, T., Bianco, V., Ferraro, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+phase+imaging+trends+in+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Laser+Eng%22%5BJournal%5D)">Quantitative phase imaging trends in biomedical applications.</a> Opt Laser Eng. 135, 106188(2020).</li>
<li>Nguyen, T. L., Pradeep, S., Judson-Torres, R. L., Reed, J., Teitell, M. A., Zangle, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+phase+imaging%3A+recent+advances+and+expanding+potential+in+biomedicine%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Quantitative phase imaging: recent advances and expanding potential in biomedicine.</a> ACS Nano. 16 (8), 11516-11544 (2022).</li>
<li>Kuś, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tomographic+phase+microscopy+of+living+three-dimensional+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Tomographic phase microscopy of living three-dimensional cell cultures.</a> J Biomed Opt. 19 (4), 046009(2014).</li>
<li>Memmolo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+minimized+data+reduction+in+single-cell+tomographic+phase+microscopy+using+3D+Zernike+descriptors%5BTitle%5D)+AND+%22Intell+Comput%22%5BJournal%5D)">Loss minimized data reduction in single-cell tomographic phase microscopy using 3D Zernike descriptors.</a> Intell Comput. 2, 0010(2023).</li>
<li>Jin, D., Zhou, R., Yaqoob, Z., So, P. T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tomographic+phase+microscopy%3A+principles+and+applications+in+bioimaging+%5BInvited%5D%5BTitle%5D)+AND+%22JOSA+B%22%5BJournal%5D)">Tomographic phase microscopy: principles and applications in bioimaging [Invited].</a> JOSA B. 34 (5), B64-B77 (2017).</li>
<li>Pirone, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stain-free+identification+of+cell+nuclei+using+tomographic+phase+microscopy+in+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Photonics%22%5BJournal%5D)">Stain-free identification of cell nuclei using tomographic phase microscopy in flow cytometry.</a> Nat Photonics. 16 (12), 851-857 (2022).</li>
<li>Bresci, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+morpho-molecular+imaging+reveals+early+therapy-induced+senescence+in+human+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Non-invasive morpho-molecular imaging reveals early therapy-induced senescence in human cancer cells.</a> Sci Adv. 9 (37), eadg6231(2023).</li>
<li>Ghislanzoni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+diffraction+tomography+and+Raman+confocal+microscopy+for+the+investigation+of+vacuoles+associated+with+cancer+senescent+engulfing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors%22%5BJournal%5D)">Optical diffraction tomography and Raman confocal microscopy for the investigation of vacuoles associated with cancer senescent engulfing cells.</a> Biosensors. 13 (11), 973(2023).</li>
<li>Bischof, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+bioimaging+across+disciplines+and+scales%3A+challenges%2C+opportunities+and+breaking+down+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22npj+Imageing%22%5BJournal%5D)">Multimodal bioimaging across disciplines and scales: challenges, opportunities and breaking down barriers.</a> npj Imageing. 2 (1), 1-6 (2024).</li>
<li>Kobayashi-Kirschvink, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prediction+of+single-cell+RNA+expression+profiles+in+live+cells+by+Raman+microscopy+with+Raman2RNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Prediction of single-cell RNA expression profiles in live cells by Raman microscopy with Raman2RNA.</a> Nat Biotechnol. 42 (11), 1726-1732 (2024).</li>
<li>Popescu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+imaging+of+cell+mass+and+growth+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Optical imaging of cell mass and growth dynamics.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 295 (2), C538-C544 (2008).</li>
<li>Kim, K., Lee, S., Yoon, J., Heo, J., Choi, C., Park, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+label-free+imaging+and+quantification+of+lipid+droplets+in+live+hepatocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional label-free imaging and quantification of lipid droplets in live hepatocytes.</a> Sci Rep. 6 (1), 36815(2016).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Stringer, C., Pachitariu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellpose3%3A+one-click+image+restoration+for+improved+cellular+segmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Cellpose3: one-click image restoration for improved cellular segmentation.</a> Nat Methods. 22 (3), 592-599 (2025).</li>
<li>Talari, A. C. S., Movasaghi, Z., Rehman, S., Umapathy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+of+biological+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Spectrosc+Rev%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy of biological tissues.</a> Appl Spectrosc Rev. 50 (1), 46-111 (2015).</li>
<li>Hobro, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+and+Raman+optical+activity+%28ROA%29+analysis+of+RNA+structural+motifs+in+Domain+I+of+the+EMCV+IRES%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Raman and Raman optical activity (ROA) analysis of RNA structural motifs in Domain I of the EMCV IRES.</a> Nucleic Acids Res. 35 (4), 1169-1177 (2007).</li>
<li>Samuel, A. Z., Sugiyama, K., Ando, M., Takeyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+imaging+of+intracellular+RNA%2C+DNA%2C+and+liquid-liquid+phase+separated+membraneless+organelles+with+Raman+microspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct imaging of intracellular RNA, DNA, and liquid-liquid phase separated membraneless organelles with Raman microspectroscopy.</a> Commun Biol. 5 (1), 1-9 (2022).</li>
<li>Kuhar, N., Sil, S., Umapathy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+Raman+spectroscopic+techniques+to+study+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Spectrochim+Acta+A+Mol+Biomol+Spectrosc%22%5BJournal%5D)">Potential of Raman spectroscopic techniques to study proteins.</a> Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 258, 119712(2021).</li>
<li>Park, C., Shin, S., Park, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generalized+quantification+of+three-dimensional+resolution+in+optical+diffraction+tomography+using+the+projection+of+maximal+spatial+bandwidths%5BTitle%5D)+AND+%22JOSA+A%22%5BJournal%5D)">Generalized quantification of three-dimensional resolution in optical diffraction tomography using the projection of maximal spatial bandwidths.</a> JOSA A. 35 (11), 1891-1898 (2018).</li>
<li>Bresci, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+monitoring+of+embryonic+development+in+living+colonies+by+combining+Raman+spectroscopy+and+tomographic+phase+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Multiscale+Imaging+Spectrosc+VI%22%5BJournal%5D)">Label-free monitoring of embryonic development in living colonies by combining Raman spectroscopy and tomographic phase microscopy.</a> Multiscale Imaging Spectrosc VI. PC13327, PC1332703(2025).</li>
<li>Baczewska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refractive+index+changes+of+cells+and+cellular+compartments+upon+paraformaldehyde+fixation+acquired+by+tomographic+phase+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Refractive index changes of cells and cellular compartments upon paraformaldehyde fixation acquired by tomographic phase microscopy.</a> Cytometry A. 99 (4), 388-398 (2021).</li>
<li>Movasaghi, Z., Rehman, S., Umapathy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+of+biological+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Spectrosc+Rev%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy of biological tissues.</a> Appl Spectrosc Rev. 42 (5), 493-541 (2007).</li>
<li>Butler, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+Raman+spectroscopy+to+characterize+biological+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Using Raman spectroscopy to characterize biological materials.</a> Nat Protoc. 11 (4), 664-687 (2016).</li>
<li>Allakhverdiev, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy+and+its+modifications+applied+to+biological+and+medical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy and its modifications applied to biological and medical research.</a> Cells. 11 (3), 386(2022).</li>
<li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unveiling+cancer+metabolism+through+spontaneous+and+coherent+Raman+spectroscopy+and+stable+isotope+probing%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Unveiling cancer metabolism through spontaneous and coherent Raman spectroscopy and stable isotope probing.</a> Cancers. 13 (7), 1718(2021).</li>
<li>Swain, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cell+line+models+of+primary+human+cells+by+Raman+spectral+phenotyping%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Assessment of cell line models of primary human cells by Raman spectral phenotyping.</a> Biophys J. 98 (8), 1703-1711 (2010).</li>
<li>Smith, R., Wright, K., Ashton, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+spectroscopy%3A+an+evolving+technique+for+live+cell+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Raman spectroscopy: an evolving technique for live cell studies.</a> Analyst. 141 (12), 3590-3600 (2016).</li>
<li>Du, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman-guided+subcellular+pharmaco-metabolomics+for+metastatic+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Raman-guided subcellular pharmaco-metabolomics for metastatic melanoma cells.</a> Nat Commun. 11 (1), 4830(2020).</li>
<li>Jones, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+techniques%3A+fundamentals+and+frontiers%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale+Res+Lett%22%5BJournal%5D)">Raman techniques: fundamentals and frontiers.</a> Nanoscale Res Lett. 14, 231(2019).</li>
<li>Shirokova, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possibilities+of+holotomographic+microscopy+for+studying+primary+cell+cultures+of+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+IEEE+CNN%22%5BJournal%5D)">Possibilities of holotomographic microscopy for studying primary cell cultures of the brain.</a> Proc IEEE CNN. 208 (211), 208-211 (2024).</li>
<li>Choi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tomographic+phase+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Tomographic phase microscopy.</a> Nat Methods. 4 (9), 717-719 (2007).</li>
<li>Park, Y., Depeursinge, C., Popescu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+phase+imaging+in+biomedicine%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Photonics%22%5BJournal%5D)">Quantitative phase imaging in biomedicine.</a> Nat Photonics. 12 (10), 578-589 (2018).</li>
<li>Jung, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+non-invasive+quantitative+measurement+of+lipid+contents+in+individual+microalgal+cells+using+refractive+index+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Label-free non-invasive quantitative measurement of lipid contents in individual microalgal cells using refractive index tomography.</a> Sci Rep. 8 (1), 6524(2018).</li>
<li>Debnath, S. K., Park, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+quantitative+phase+imaging+with+a+spatial+phase-shifting+algorithm%5BTitle%5D)+AND+%22Opt+Lett%22%5BJournal%5D)">Real-time quantitative phase imaging with a spatial phase-shifting algorithm.</a> Opt Lett. 36 (23), 4677-4679 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Telecamera CCD</td><td>Strumenti di Princeton</td><td>PIXIS 100BR eXcelon</td><td>Rivelatore per segnale di scattering Raman.</td></tr><tr><td>Software di controllo della telecamera CCD</td><td>Strumenti di Princeton</td><td>Campo luminoso</td><td></td></tr><tr><td>Laser Ti-Sapphire a onda continua (lunghezza d'onda: 785 nm)</td><td>Spettri-Fisica</td><td>3900 S</td><td>Viene utilizzato per l'eccitazione al microscopio Raman.</td></tr><tr><td>Specchio dicroico</td><td>ThorLabs</td><td>DMSP750B</td><td>Specchio dicroico da 749 nm, devia l'eccitazione Raman da 785 nm al campione, filtra la fluorescenza e i segnali di campo chiaro.</td></tr><tr><td>Siero fetale bovino</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>Corpo del microscopio a fluorescenza</td><td>Olimpo</td><td>IX83</td><td></td></tr><tr><td>Laser (lunghezza d'onda: 532 nm)</td><td>Spettri-Fisica</td><td>Millenni eV</td><td>Laser a pompa per sistema laser Ti-Sapphire da 785 nm.</td></tr><tr><td>Software MATLAB</td><td>MathWorks</td><td>2023a</td><td></td></tr><tr><td>Linea cellulare MDA-MB-231</td><td>ATCC</td><td>HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>Spettrografo NIR</td><td>Andror</td><td>Holospec HS-HSG-785-LF</td><td>Viene utilizzato per l'analisi spettrale della luce retrodiffusa.</td></tr><tr><td>Obiettivo (60& 1,2 NA ad immersione in acqua)</td><td>Olimpo</td><td>UPLSAPO60&volte;</td><td></td></tr><tr><td>Camera di incubazione sul palco</td><td>Colpo Tokai</td><td>stxg-welsx-set</td><td></td></tr><tr><td>Software di controllo del microscopio open source</td><td>&micro; Direttore</td><td>Micro-Manager-2.0</td><td></td></tr><tr><td>Penicillina-Streptomicina (10.000 U/mL)</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Senza fenoli DMEM/F-12</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>21041025</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Gibco</td><td>10-010-023</td><td></td></tr><tr><td>Piastre Petri con fondo in vetro di quarzo</td><td>Sveglia B Tech</td><td>SF-S-D12</td><td></td></tr><tr><td>Software di analisi dati Raman</td><td>RamApp</td><td></td><td>Strumento web-based per l'elaborazione di dati iperspettrali Raman.</td></tr><tr><td>Fotocamera sCMOS</td><td>Fotonica di Hamamatsu</td><td>Orca Flash 4.0 v2</td><td></td></tr><tr><td>Pompa a siringa</td><td>Chemyx</td><td>Fusione 720</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio di fase tomografico</td><td>Tomocube, Inc.</td><td>HT-2H</td><td>Sistema commerciale per l'ottenimento di immagini di fase quantitative.</td></tr><tr><td>Software di analisi dati TPM</td><td>Tomocube, Inc.</td><td>TomoStudio</td><td>Software utilizzato per l'analisi dei dati di microscopia di fase tomografica (TPM).</td></tr></tbody></table>

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Un approccio di segmentazione senza etichette per l'imaging intravitale del microambiente del tumore mammario

Nell'era dell'immunoterapia del cancro, l'interesse nel chiarire le dinamiche del microambiente tumorale è aumentato in modo sorprendente. Questo protocollo descrive in dettaglio una tecnica di imaging con spettrometria di massa rispetto alle sue fasi di colorazione e imaging, che consentono un'analisi spaziale altamente multiplexata.

Espansione della comprensione del microambiente tumorale mediante spettrometria di massa Imaging di campioni di tessuto fissati in formalina e incorporati in paraffina

Questo protocollo descrive un metodo semi-automatico per screening di farmaci organoidi a medio-alto rendimento e un software di analisi delle immagini automatizzato indipendente dal microscopio per quantificare e visualizzare risposte multiparametriche a singolo organoide per catturare l'eterogeneità intratumorale.

Screening multiparametrico di farmaci organoidi tumorali mediante imaging a cellule vive a campo ampio per analisi di massa e organoidi singoli

L'analisi delle immagini con codici a barre multiplexed ha recentemente migliorato la caratterizzazione del microambiente tumorale, consentendo studi completi sulla composizione cellulare, sullo stato funzionale e sulle interazioni cellula-cellula. Qui, descriviamo un protocollo di colorazione e imaging che utilizza il codice a barre di anticorpi coniugati con oligonucleotidi e l'imaging ciclico, che consente l'uso di una tecnica di analisi delle immagini ad alta dimensionalità.

Analisi di immagini di codici a barre multiplexed per l'immunoprofilazione e la caratterizzazione della mappatura spaziale nell'analisi a singola cellula di campioni di tessuto di paraffina

Utilizzando una piattaforma multimodale che combina modalità di imaging ottico label-free, abbiamo sviluppato un protocollo per la visualizzazione e la quantificazione delle dinamiche cellulari e del metabolismo. Attraverso l'imaging tramite fluorescenza multifotone, generazione di seconda armonica e microscopia a scattering Raman stimolato, possiamo generare una panoramica olistica dell'ambiente cellulare e molecolare.

Piattaforma di imaging ottico multimodale per lo studio del metabolismo cellulare

Questo protocollo fornisce una guida passo passo per la progettazione di un pannello di anticorpi in immunofluorescenza multiplex per l'imaging basato su codici a barre del DNA di tessuti murini di melanoma FFPE. Descriviamo anche una pipeline di analisi delle immagini utilizzando strumenti open-source per generare approfondimenti di proteomica spaziale nel microambiente immunitario del tumore del melanoma murino.

Imaging multiplex a immunofluorescenza basato su codice a barre del DNA per analizzare campioni FFPE da melanoma murino geneticamente riprogrammato

Questo protocollo descrive in dettaglio una metodologia per la rilevazione multiplex dell'mRNA con citometria di massa per imaging proteico in sezioni di tessuto incluse in formalina fissate con paraffina.

Cartografia molecolare a doppia modalità: integrazione del rilevamento multiplex dell'mRNA con la citometria di massa per imaging proteico

Scopri un approccio di imaging multimodale per la fenotipizzazione morfo-chimica di cellule di cancro al seno umane senza etichetta. Questo metodo combina microspettroscopia Raman confocale e microscopia a fase tomografica per analisi biochimiche e morfologiche rapide e non invasive.

Un framework di imaging multimodale per far progredire la fenotipizzazione di cellule viventi di cancro al seno senza etichetta

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