Name: Una valutazione quantitativa della fagocitosi degli eritrociti allogenici e xenogenici da parte dei macrofagi di ratto in vitro (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-22T14:05:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Scopri un metodo standardizzato per valutare la fagocitosi di eritrociti allogenici e xenogenici da parte dei macrofagi di ratto. Questo protocollo quantitativo elimina la variabilità individuale e offre risultati riproducibili per la ricerca in immunologia e xenotrapianto.

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<ol><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NOD%2FSCID%2FGAMMAC%28null%29+mouse%3A+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">NOD/SCID/GAMMAC(null) mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li>
<li>Szpirer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+models+of+human+diseases+and+related+phenotypes%3A+A+novel+inventory+of+causative+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Rat models of human diseases and related phenotypes: A novel inventory of causative genes.</a> Mamm Genome. 33 (1), 88-90 (2022).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival-assured+liver+injury+preconditioning+%28SALIC%29+enables+robust+expansion+of+human+hepatocytes+in+Fah+Rag2%28-%2F-%29+IL2rg%28-%2F-%29+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Survival-assured liver injury preconditioning (SALIC) enables robust expansion of human hepatocytes in Fah Rag2(-/-) IL2rg(-/-) rats.</a> Adv Sci (Weinh). 8 (19), e2101188(2021).</li>
<li>Rongvaux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corrigendum%3A+Development+and+function+of+human+innate+immune+cells+in+a+humanized+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Corrigendum: Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model.</a> Nat Biotechnol. 35 (12), 1211(2017).</li>
<li>Furuya, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evidence+of+a+macrophage+barrier+in+the+xenotransplantation+of+human+hematopoietic+stem+cells+to+severely+immunodeficient+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">The evidence of a macrophage barrier in the xenotransplantation of human hematopoietic stem cells to severely immunodeficient rats.</a> Xenotransplantation. 28 (4), e12702(2021).</li>
<li>Barclay, A. N., Van den Berg, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+between+signal+regulatory+protein+alpha+%28SIRP%CE%B1%29+and+CD47%3A+Structure%2C+function%2C+and+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The interaction between signal regulatory protein alpha (SIRPα) and CD47: Structure, function, and therapeutic target.</a> Annu Rev Immunol. 32, 25-50 (2014).</li>
<li>Ide, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+CD47-SIRPalpha+signaling+in+xenograft+rejection+by+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Role for CD47-SIRPalpha signaling in xenograft rejection by macrophages.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (12), 5062-5066 (2007).</li>
<li>Matlung, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD47-SIRP%CE%B1+signaling+axis+as+an+innate+immune+checkpoint+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Rev%22%5BJournal%5D)">The CD47-SIRPα signaling axis as an innate immune checkpoint in cancer.</a> Immunol Rev. 276 (1), 145-164 (2017).</li>
<li>Oldenborg, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+CD47+as+a+marker+of+self+on+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Role of CD47 as a marker of self on red blood cells.</a> Science. 288 (5473), 2051-2054 (2000).</li>
<li>Gu, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+method+for+measuring+innate+phagocytosis+by+human+monocytes+using+real-time+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">A quantitative method for measuring innate phagocytosis by human monocytes using real-time flow cytometry.</a> Cytometry A. 85 (4), 313-321 (2014).</li>
<li>Joffe, A. M., Bakalar, M. H., Fletcher, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+phagocytosis+assay+with+reconstituted+target+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Macrophage phagocytosis assay with reconstituted target particles.</a> Nat Protoc. 15 (7), 2230-2246 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,05% Tripsina-EDTA</td><td>ThermoFisher</td><td>25300062</td><td></td></tr><tr><td>Tracciatore di Cellule Rosse Profonde</td><td>ThermoFisher</td><td>&nbsp; C34565</td><td>La polvere (15 & mu; g) fu sciolto nel DMSO (20 e mu; L)</td></tr><tr><td>Dimetil Solfossido (DMSO)</td><td>Sigma</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco (DPBS)</td><td>ThermoFisher</td><td>C10010500BT</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll-Paque PLUS</td><td>Cytiva</td><td>17144002</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll-Paque PREMIUM</td><td>Cytiva</td><td>17544602</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo anti-umano CD235a BV421 per topi</td><td>BD in Biologia</td><td>562938</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo FITC Anti-Rat del topo CD163</td><td>BIO-RAD</td><td>MCA342F</td><td></td></tr><tr><td>Proteina K</td><td>Sigma</td><td>P2308</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ThermoFisher</td><td>11875093</td><td></td></tr></tbody></table>

una valutazione quantitativa della fagocitosi degli eritrociti allogenici e xenogenici da parte dei macrofagi di ratto in vitro

A Quantitative Assessment of the Phagocytosis of Allogeneic and Xenogeneic Erythrocytes by Rat Macrophages In Vitro

Una valutazione quantitativa della fagocitosi degli eritrociti allogenici e xenogenici da parte dei macrofagi di ratto in vitro

Xenogeneic cell transplantation often faces significant immune rejection, even in immunodeficient animal models. Among residual immune components, ...

a-quantitative-assessment-phagocytosis-allogeneic-xenogeneic

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JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Un nuovo metodo per ottenere i macrofagi da colture primarie di cellule di fegato di ratto è descritto. Questo metodo utilizza la proliferazione dei macrofagi nella cultura, seguita da agitazione di palloni cultura e la purificazione di attaccamento selettivo ai piatti di plastica. Questa tecnica fornisce in modo efficiente i macrofagi del fegato, senza attrezzature complesse e competenze.

Un metodo semplice ed efficace per isolare i macrofagi da Mixed colture primarie di cellule del fegato degli adulti

Fonte: Nagre, N., et al. Macrofagi alveolare, fagocitosi e eliminazione dei batteri nei topi. J. Vis. Esp. (2019).Questo video dimostra la valutazione della fagocitosi mediata dai recettori del complemento utilizzando globuli rossi di pecora opsonizzati con IgM e complemento, seguita dalla loro acquisizione da parte dei macrofagi del topo. L'entità della fagocitosi viene quantificata midendo un prodotto cromogenico blu formato tramite ossidazione catalizzata dall'emoglobina del diaminofluorene.

Modellazione della fagocitosi mediata dal complemento utilizzando globuli rossi opsonizzati in vitro

Questo video mostra un test per monitorare gli eventi di fagocitosi dei globuli rossi (RBC) mediati da macrofagi indipendenti. I globuli rossi umani opsonizzati con immunoglobuline G (IgG) di topo vengono incubati con macrofagi di topo e osservati al microscopio confocale. I globuli rossi sono inghiottiti dai macrofagi attraverso la formazione di una coppa fagocitaria e mirati alla degradazione lisosomiale.

Imaging in tempo reale della fagocitosi macrofagica dei globuli rossi opsonizzati IgG

Questo video mostra un test di fagocitosi basato sulla citometria a flusso che coinvolge eritrociti infettati da Plasmodium falciparum marcati e opsonizzati da monociti. La citometria a flusso identifica la fluorescenza nei monociti, confermando il successo dell'identificazione degli eritrociti opsonizzati attraverso la fagocitosi.

Un test per quantificare la fagocitosi mediata da anticorpi di eritrociti infetti da parassiti

Questo video mostra un test monostrato di monociti che utilizza monociti primari provenienti da sangue periferico per valutare la fagocitosi mediata dal recettore Fcγ con globuli rossi R2R2 opsonizzati con anticorpi poli D.

Un test per lo studio della fagocitosi guidata dal recettore Fcγ nei monostrati di monociti

fagocitosi microglia è fondamentale per il mantenimento della omeostasi tissutale e fagocitaria inadeguata è stato implicato nella patologia. Tuttavia, valutare la funzione microglia in vivo è tecnicamente impegnativo. Abbiamo sviluppato una tecnica semplice ma robusto per monitorare e quantificare il potenziale di fagocitosi microglia in un ambiente fisiologico preciso.

La valutazione della retina microglia fagocitaria Funzione<em&gt; In Vivo</em&gt; Usando un test citometria a flusso basato su

Il test monostrato dei monociti (MMA) è un test in vitro che utilizza monociti primari isolati ottenuti da sangue intero periferico di mammifero per valutare la fagocitosi mediata dal recettore Fcγ (FcγR).

L&#39;uso di un monociti monostrato test per valutare fagocitosi Fcy recettore-mediata

Qui descriviamo i metodi usando la microscopia di confocal di filatura disco ai singoli eventi fagocitica immagine di residenti macrofagi peritoneali del topo. I protocolli possono essere esteso ad altre cellule fagocitiche.

Time-lapse Imaging 3D della fagocitosi dai macrofagi del topo

Qui, presentiamo un protocollo per valutare la fagocitosi dei macrofagi peritoneali del mouse usando una maggiore fluorescenza verde Escherichia coliche esprimono proteine.

Utilizzando Enhanced fluorescenza verde che esprimono proteine Escherichia Coli per valutare la fagocitosi dei macrofagi peritoneali del Mouse

Qui segnaliamo i metodi comuni per analizzare la funzione fagocitica dei macrofagi alveolari murini e lo spazio batterico dal polmone. Questi metodi di studio in vitro fagocitosi dei branelli di isotiocianato di fluorescina e fagocitosi in vivo di Pseudomonas aeruginosa Green Fluorescent Protein. Inoltre descriviamo un metodo per l'eliminazione di p. aeruginosa nei topi.

Fagocitosi del macrofago alveolare e la Clearance di batteri nei topi

Abbiamo sviluppato miglioramenti e metodi aggiornati per l'attuale test monocita-monostrato (MMA), in cui i macrofagi vengono utilizzati per aiutare a prevedere meglio la rilevanza clinica degli alloanticorpi dei globuli rossi nella medicina trasfusionale e nell'immunologia. Questo test è chiamato test dei monociti-macrofagi (M-MA).

Previsione del significato degli anticorpi dei globuli rossi utilizzando il test dei monociti-macrofagi

Scopri un metodo standardizzato per valutare la fagocitosi di eritrociti allogenici e xenogenici da parte dei macrofagi di ratto. Questo protocollo quantitativo elimina la variabilità individuale e offre risultati riproducibili per la ricerca in immunologia e xenotrapianto.

Una valutazione quantitativa della fagocitosi degli eritrociti allogenici e xenogenici da parte dei macrofagi di ratto in vitro

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