Procedura semplice ed efficace per l'emostasi nelle arterie del topo

Questa ricerca sviluppa un metodo per sigillare le punture arterie preservando il flusso sanguigno. Indaga se l'involucro grasso previene l'ischemia dopo una puntura arteriosa. Una sfida sperimentale chiave in questa procedura è il raggiungimento di un'emostosi efficace dopo la puntura arteriosa senza causare occlusione arteriosa.

Per cominciare, posiziona il topo anestetizzato sul tavolo operatorio. Dopo aver confermato l'anestesia, rimuovere i peli dalle regioni cervicale e cranica utilizzando un depilatore. Disinfettare la pelle esposta con iodio di povidone, seguito dal 75% di etanolo per eliminare eventuali residui.

Posiziona il mouse su una borsa riscaldante impostata a 37 gradi Celsius e lascialo lì per tutta la durata delle procedure sperimentali. Riposiziona il mouse in posizione supina sul cuscinetto riscaldante. Dopo aver effettuato un'incisione cervicale mediana, si estrae un innesto di tessuto adiposo sottocutaneo di tre per tre per un millimetro per un uso futuro.

Eseguire una dissezione smussata della ghiandola submandibolare, del muscolo ioide sternale e del muscolo sternocleidomastoideo per esporre entrambe le arterie carotide comuni. Poi libera con cura l'arteria carotide comune per esporre le arterie carotide interne ed esterne. Posizionare la pinza vascolare uno all'estremità distale dell'arteria carotide comune, poi posizionare la pinza vascolare due all'estremità prossimale dell'arteria.

Successivamente, perforare l'arteria carotide comune tra le due pinze con un ago calibro 23. Dopo aver rimosso l'ago, avvolgi l'arteria carotide comune nel punto di puntura usando la superficie tagliata o il lato non serosa del cuscinetto adiposo precedentemente prelevato. Posiziona una sutura 4-0 sotto l'arteria avvolta nel grasso.

Lega delicatamente una sola mossa sulla superficie grassa per applicare pressione e garantire un contatto sicuro tra il cuscinetto adiposo e la parete del vaso. Poi regola gradualmente la legatura per bilanciare la pressione e raggiungere l'emostasi. Eleva l'arteria carotide comune distale usando un cotton fioc umido.

Rilascia la pinza vascolare uno e ritira lentamente il tampone per permettere un graduale ritorno del flusso sanguigno verso il sito della puntura. Ora, controlla il flusso sanguigno nel punto della puntura. Se si osserva sanguinamento attivo, applicare nuovamente una pinza vascolare sull'arteria carotide comune distale.

Dopo un minuto, rilascia lentamente la pinza vascolare uno. Se il sanguinamento persiste, si riposiziona il cuscinetto adiposo o si stringe leggermente la legatura per aumentare la pressione fino a raggiungere l'emostosi completa. Eleva l'arteria carotide comune prossimale usando un cotton fioc inumido.

Successivamente, rilascia la pinza vascolare due e ritira lentamente il tampone per permettere un flusso sanguigno controllato verso il sito della puntura. Se si verifica un'epistassia, riapplicare la pinza vascolare due sull'arteria carotide comune distale. Ora, stringi leggermente il singolo movimento della sutura per aumentare la pressione e aspetta un minuto.

Poi solleva l'arteria carotide comune prossimale e rilascia la clamp vascolare due facendo lentamente rotolare il tampone umido verso il sito della puntura. Aggiungi un altro lancio usando la stessa sutura per formare un doppio nodo sopra il lancio iniziale, migliorando la fissazione del cuscinetto adiposo e favorendo un'emostosi equilibrata. Conferma che le arterie carotidi comuni su entrambi i lati del cuscinetto adiposo siano riempite e mantengano un diametro costante dei vasi, indicando un ripristino del flusso sanguigno riuscito.

Infine, sutura l'incisione cervicale e applica un antisettico sul sito della ferita. L'imaging laser con contrasto speckle e le misurazioni di unità di perfusione sia su topi fittizi che chirurgici non hanno mostrato cambiamenti significativi, confermando che il flusso sanguigno cerebrale non era compromesso dalla tecnica dell'emostasi arteriosa. L'esame istologico del tessuto cerebrale tramite colorazione di ematossilina ed eosina a sette, quattordici e 28 giorni dall'intervento in topi operati e in topi sham ha mostrato un'architettura tissutale intatta nella corteccia, nell'ippocampo e nel talamo, senza alterazioni patologiche.

La colorazione Nissl ha mostrato un allineamento neuronale organizzato, una struttura cellulare normale e corpi Nissl preservati in tutti i gruppi e i momenti temporali, indicando nessun danno strutturale dovuto alla chiusura arteriosa. Il metodo attuale mira a sigillare il sito della puntura dopo la procedura, mantenendo al contempo un normale flusso sanguigno, prevenendo così l'ischemia post-operatoria.