Survivable Chirurgia Stereotassica in roditori

Ciao, sono Brenda Geiger del laboratorio di Emmanuel POTOs del Dipartimento di Farmacologia e Terapia Sperimentale della Tufts University School of Medicine. E io sono Lauren Frank, anch'io del laboratorio. Oggi dimostreremo un intervento chirurgico stereotassico sopravvivibile nei roditori.

Questa procedura prevede l'impostazione degli strumenti e la preparazione dell'animale per l'intervento chirurgico, seguita dall'esecuzione della chirurgia stereotassica. Cominciamo. Prima di iniziare la procedura, impostare lo strumento stereotassico e tutti i materiali necessari.

Assicurarsi che l'area e gli strumenti siano puliti e sterilizzati. Successivamente, preparare l'animale per l'intervento chirurgico. Oggi dimostrerò l'intervento chirurgico utilizzando un ratto Sprague dawley di 10 settimane.

Utilizziamo anche ratti spray dolly di tre mesi e topi C57 Black Six J di due mesi, che richiedono un adattatore di piattaforma specializzato. Anestetizzare il ratto mediante iniezione intraperitoneale di un cocktail contenente 60 milligrammi per chilogrammo di ketamina e 10 milligrammi per chilogrammo di xilazina. Mantenere l'animale al caldo utilizzando un tappetino riscaldante regolato da un termostato.

Dopo aver verificato che l'animale sia sedato e stabilizzato a una temperatura corporea adeguata, procedere con l'intervento chirurgico. Per iniziare l'intervento, rasare il pelo dell'animale con un rasoio elettrico, dalla regione delle orecchie fino a poco al di sopra degli occhi. Applicare iodio sulla zona rasata, avendo cura di proteggere gli occhi.

Ora montare l'animale sull'apparato stereotassico. A tale scopo, inserire innanzitutto una barretta auricolare nel condotto uditivo e mantenerla ferma, quindi far scivolare l'altra barretta auricolare in modo che la testa non possa muoversi lateralmente, ma il muso possa essere spostato verso l'alto e verso il basso. Fissare la bocca con il supporto anteriore dello strumento stereotassico utilizzando il righello per assicurarsi che la testa sia in posizione orizzontale.

Deve esserci un angolo di 90 gradi tra il righello e la parte centrale del cuoio capelluto dell'animale. Una volta posizionato l'animale, effettuare un'incisione antero-posteriore sul cuoio capelluto con un bisturi sterile. Estendere l'incisione dal lambda fino a metà strada tra gli occhi dell'animale.

Utilizzare emostatici per pinzare la pelle e mantenere l'incisione aperta. Asciugare la superficie del cranio esposta con diversi bastoncini di cotone. Successivamente, posizionare la cannula guida sul suo supporto.

Quindi individuare il bgma sul cranio e posizionare la cannula guida direttamente su questa posizione. Registrare le coordinate anteriore, posteriore e laterale del bgma. Individuare le coordinate corrette necessarie per il posizionamento della sonda.

Con l'aiuto della posizione dell'atlante stereotassico, posizionare la cannula guida alle coordinate corrette aggiungendo o sottraendo da bgma. Abbassare la cannula guida fino a quando non tocca il cranio, quindi registrare questa coordinata ventrale. Fare un segno a matita in corrispondenza di questa posizione sul cranio.

Qui è dove effettuerete la perforazione. Per iniziare la perforazione, rimuovere la cannula guida e sterilizzare la punta del trapano.

Quindi praticare un foro di 0,5 millimetri sul segno a matita finché non si attraversa completamente lo spessore del cranio. Verificare con la cannula guida se riesce a passare attraverso il foro senza toccare i lati. Continuare a trapanare e verificare finché la cannula non riesce a passare attraverso il foro in linea retta.

Attenzione a non penetrare attraverso le membrane meningee o i vasi sanguigni. Una volta praticato il foro, utilizzare un ago sterile per forare delicatamente le meningi, in modo da permettere l'inserimento senza ostacoli della cannula guida. Successivamente, utilizzando un trapano manuale, praticare sei fori per le viti craniche.

Due anteriori, due laterali e due posteriori rispetto al foro della cannula. Sterilizzare sei viti ossee in acciaio inossidabile e posizionarle sul cranio fino a quando non sono saldamente ancorate. Dopo aver inserito le viti, pulire la cannula guida con etanolo e lasciarla asciugare, quindi montare e abbassare lentamente la guida fino alla corretta coordinata ventrale.

La cannula viene abbassata e sollevata per evitare di danneggiare il cervello. Assicurarsi che i lati non tocchino e che venga inserita perfettamente in verticale. Successivamente, rimuovere gli emostatici.

Mescolare un sottile strato di cemento dentale liquido e coprire la cannula guida, le viti e il resto del cranio con una spatola in uno strato sottile. Successivamente, posizionare la vite di ancoraggio medialmente e dietro le viti del cranio posteriore e mantenerla in posizione con pinzette. Preparare un altro lotto di cemento, questa volta più denso, e coprire completamente la cannula e le viti di ancoraggio con una quantità sufficiente di cemento per fissarle quando il cemento si sarà indurito.

Ma prima che si solidifichi, separare la pelle dal tappo di cemento e modellare il tappo di cemento con la spatola per assicurarsi che sia liscio su tutti i lati e non irriti la pelle. Successivamente, si aggiunge altro cemento per rinforzare la cannula guida e collegarla al resto del supporto cranico. Una volta che il cemento odontoiatrico è completamente asciutto, rimuovere l'animale dall'apparecchiatura.

Applicare quindi l'antibiotico locale bacitracina tutto intorno al cappuccio di cemento. Successivamente, somministrare un'iniezione intramuscolare di penicillina seguita da un'iniezione sottocutanea di soluzione salina oneill. Posizionare l'animale nella sua gabbia e monitorarlo fino a quando non riprende conoscenza.

Quindi riportare l'animale nella sua stanza per il recupero. Dopo il recupero, monitorare l'animale quotidianamente fino al termine dell'esperimento per rilevare segni di infezione e valutare dolore e stress.

Somministrare da 0,1 a 0,5 milligrammi per chilogrammo di buprenorfina per via sottocutanea due volte al giorno secondo necessità, se l'animale mostra segni di dolore. Inoltre, si somministra un trattamento locale con bacitracina e un tratt游戏副本

Abbiamo appena mostrato come eseguire un intervento stereotassico sopravvivibile nei roditori. Durante questa procedura, è importante ricordare di mantenere un ambiente sterile durante l'intervento e di monitorare attentamente l'animale dopo l'intervento per evitare infezioni, nonché di posizionare correttamente l'animale sui supporti ad aria in modo che la posizione della cannula guida sia precisa.

Ecco fatto. Grazie per aver guardato e buona fortuna con i vostri esperimenti.