14.11
パッチクランプ法は、ニューロンや筋線維などの興奮性細胞のイオンチャネルの挙動を研究するための電気生理学的ツールです。
パッチクランプセットアップには、1つ以上のイオンチャネルを含む細胞膜の小さな領域に対してガラスマイクロピペットが配置されています。電解質溶液と塩素化銀電極で構成されており、電圧と電流を測定します。
小さな吸引力を加えると、「メンブレンパッチ」がピペットの先端にしっかりと密着します。
このメガシェイプのメンブレン領域はギガオームシールと呼ばれ、電気的に絶縁されているため、チャネルを流れるイオンはピペットにのみ通過します。
マイクロピペット内の記録電極は、イオンチャネル内のイオンの移動に起因する電流または電圧の変動を増幅する高感度アンプに接続されており、生成された電気信号の測定を可能にします。
「電圧クランプ」では、電圧が特定の値に設定され、その結果生じる電流の流れの変化が測定されます。あるいは、電流を設定値にクランプして、メンブレン全体の電圧変動を測定することもできます。
筋収縮や神経伝達などの多くの基本的な細胞機能は、細胞膜を貫通する正および負に帯電したイオンの移動によって生成される電気信号に依存しています。 細胞全体または単一のイオンチャネルを流れる電流を記録する有効な方法の 1 つは、パッチクランプ法です。
この方法では、電解質溶液を含むガラス製マイクロピペット…
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