マウス歯状回における神経細胞の活性化と神経新生を強化するための高周波刺激

要約

出典: Zhao, Z. et al.高周波刺激によるマウス歯状回の活性化のための侵襲的方法J. Vis. 経験。(2018年)

このビデオでは、マウス海馬歯状回に高周波脳深部刺激を送達するためのプロトコルを示し、ニューロンの活性化、シナプス可塑性、および神経新生に対するその効果を詳しく説明します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. High-Frequency Stimulation Delivery
   1. マウスの脳に埋め込まれた電極をリードを介してプログラム可能な刺激装置に接続します。図 1 に示すように、ソフトウェア インターフェイスをセットアップします。高周波刺激(HFS)パラメータを、400Hzで6パルスの6列の6列の6列として設定します(図2B、列間100ms、直列間20秒)。刺激強度を200μAに設定します。
   2. 設定どおりに、希望の期間 HFS を配信します。1日2回、午前8:00と午後8:00に刺激を与えます。
   3. 対照群については、マウスに電極を埋め込み、刺激は行わない。
   4. c-fos染色では、実験マウスを鋭敏に刺激します(1日2回)。ブロモデオキシウリジン(BrdU)標識のために、実験マウスを急性刺激群(1日2回適用)と慢性刺激群(5日間で10回、1日2回適用)に分けます。刺激の過程で、マウスが起きていることを確認してください。リードがねじれていないことを確認することを忘れないでください。
      注:手順の最終日に、急性刺激群のマウスを同時に刺激しました。
   5. 刺激が完了したら、電極ピンを電極ホルダーと記録システムのコネクタから慎重に外します。

結果

図1.マルチスティミュレーターのインターフェースとパラメータ。刺激装置はデジタルアナログコンバーターに接続され、独自のソフトウェアによって起動されました。高周波刺激 (HFS) の刺激タイプは単相性でした。

材料