ブタモデルにおける腰椎後根神経節への標的注射のための椎弓切開術

要約

出典: Unger, M. D., et al., Lambar Dorsal Root Ganglion Access and Injection for Lumbar Dernlion Access and Injection in S豚.J. Vis. 経験。(2017年)

このビデオは、対流増強送達を使用した標的神経治療送達のために腰椎後根神経節にアクセスするための麻酔ブタの椎弓切開手順を示しています。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

シングルレベル椎弓

切開術

1. 椎弓切開術のターゲットを、2 つの接合骨端関節の間と内側に位置する最も中央の椎弓板として特定します。
2. 椎板をその下縁まで、尾側接合骨端関節の隣接する下関節突起のすぐ内側の点までたどります。
3. 5 mm Freer エレベーターまたはキュレットを使用して、椎板の尾端と中心管の間の移行を触診します。
   注: 触診器具を前方に無理に押し付けると硬膜嚢と脊髄に接触するため、注意してください。豚の脊髄は腰椎を越えて伸びていることに注意してください。椎間板ロンジャーを使用して、触診を容易にするために、この領域を覆う追加の軟部組織を除去できます。
4. 2mmの上向きの45度のケリソンロンジャーを使用して、骨を区分的に抽出します。棘突起の基部に沿って、脊椎の尾側表面のちょうど尾側のレベルまで骨を除去し、横方向にその最大範囲まで取り除きます。
5. 骨の除去を補助するために、角度の付いた骨ロンジャーを使用します。椎弓弓切開術がほぼ完了するまで、椎弓板に接続されていた下関節突起をそのままにしておきます。
6. 下関節突起が自由に可動し、接合骨端関節包によってのみ付着していることを確認します。#15または#11の刃を使ってカプセルを切開します。
7. 下関節突起を区分的に除去しますが、隣接する上関節突起はそのままにしておきます。
   注:椎弓切開が完了すると、バイポーラ電気手術による止血が行われます。モノポーラ電気手術は、神経構造が近接しているため使用されません。骨ワックスは露出した骨からの出血部位に沿って配置でき、吸収性ゼラチンスポンジを使用して軟部組織の近くで止血を得ることができます。コットノイドは、漿液と血液を解剖から逃がすのに役立つツールです。

背根神経節の解剖 (DRG)硬

1. 膜外脂肪を、内側から開始し、外側に進む浅層から深部まで、区分ごとに排出します。バイポーラ鉗子を使用した穏やかな解剖と、6〜10個のフレンチフレイジャー吸引チップによる吸引によって脂肪を除去します。
   注:ルーペの拡大または解剖顕微鏡の使用は、硬膜外脂肪を安全に排出し、バイポーラ電気手術を使用して硬膜外静脈叢の細心の注意を払った止血を達成するために必要な詳細レベルを提供するのに役立ちます。
2. 皮膚切開の軸に平行な上下方向に走る正中線に沿って硬膜嚢を特定します。硬膜嚢が硬膜神経根スリーブを生じさせることが見られるまで、硬膜嚢に沿って硬膜外脂肪を除去します。
3. 硬膜外脂肪の排出によって硬膜スリーブを横方向および下部にトレースし、DRG(後根神経節)の周囲で拡大することが見られるまで追跡します。
   注:DRGの楕円形と黄色からオレンジ色を識別します。腰椎中央部では、DRGは通常、サイズが4〜6 mmで、内側から外側方向で最も長く、それぞれの椎弓根の真下または内側に2〜3 mmに位置します。鈍い直角の神経フックを使用して、椎弓根を優しく触診できます。
隣
4. 接する脊髄神経が見えるまで、DRGを過ぎて硬膜外脂肪を横方向に排出します。
   注:硬膜切開術が発生した場合は、6-0ナイロン縫合糸と滑らかなマイクロニードルドライバーを簡単なランニングステッチで水密閉鎖して修復します。

後根神経節の注射

1. 22 ゲージの脊髄針を使用して、32 ゲージの対流増強送達 (CED) 針の軌道をガイドします。22ゲージのガイド針を皮膚と傍脊髄筋に穿刺します。
   注:CED針は、圧力勾配により、バルクフローとしても知られる組織内の流体対流を達成するように設計されています。
2. DRGの縦軸に近似する軌道に沿ってガイド針を向け、針先が解剖野の外側傍脊椎壁から出るようにします。
3. 針の内腔がDRGの中心に揃うまで、針の経路を微調整します。
   注: ガイド針がDRGに接触しないようにしてください。
4. 滅菌注射液を滅菌注射器に引き出し、注射器を滅菌輸液チューブに接続します。
5. チューブを CED 針に固定し、シリンジを無菌フィールドから取り出します。シリンジをプログラム可能なシリンジポンプに接続します。
   注:チューブは、無菌性と可動性が維持されるように、5フィートの長さに準備されています。また、溶液に気泡を混入させないことも最も重要です。
6. CED針の先端から発現が見えるまで注射液を進めます。
7. CED針をガイド針内腔内に置き、ガイド針の先端から出るまでCED針をゆっくりと進めます。針の位置合わせ中に DRG に穴が開いていないことを確認してください。
8. ガイド針の軌道の長軸に沿ってガイド針の位置を微調整し、CEDチップの最終的な位置を決定します。
9. ガイド針とCED針の深さと位置合わせが達成されたら、インターロッキング針ハブを使用してガイド針とCED針を固定します。
10. ガイド針、CED針、および注射液が充填された接続されたチューブを含む、すべての注射装置の接続が完全に固定されていることを確認します。
11. ガイド針を長軸に沿って進めて、CED針先とDRGに近づけます。
12. CED針先でDRGに穴を開けます。
13. CED針の先端をDRGの3次元中心に沈めます。
    注: DRGは可変サイズと形状の3次元構造であるため、CED針の先端をDRGの真の中心に正確に配置するには、DRGの露光を完了する必要があります。真のDRG中心は、その3つの解剖学的軸、すなわち前軸から後軸、外側軸から内側
軸、および上軸から下軸の交点にあります。
14. 100 μLの注射液をCEDで3段階の段階的な速度と容量で送達します。
15. 最初のステップで 4 μl を 2 μL/分で供給します。2番目のステップでは、4 μL/分で8 μLを供給します。3番目で最後のステップで88 μLを8 μL/分で送達します。
    注:圧力平衡化を可能にするために、ステップ間および最終ステップ後に3分間の一時停止を許可します。
16. 最後の注入ステップの後、注入装置を引き出し、その長軸に沿って滑らかで穏やかな動きで3分間一時停止します。
    注:無色の注入溶液の場合、注入液分布の視覚的評価を支援するために、0.1%重量/体積の濃度で着色染料が溶液に含まれています。また、重要な色素 4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール (DAPI) は、研究デザインで注射液分布の組織学的評価が必要な場合、0.25 μg/μL の濃度で溶液に含まれています。

閉鎖

1. 閉鎖前に手術部位に温食塩水洗浄を 3 回適用し、破片、つまり骨片の部位を動員して洗い流します。 吸引を使用して生理食塩水と破片を回収します。
   注:灌漑が透明なままであれば、細心の注意を払った止血が保証されます。このとき、止血剤(ゼラチンスポンジ)とコットノイドが除去されます。閉じる前に、すべての材料と器具が切開部位から取り除かれていることを確認してください。
2. 閉鎖には3層のテクニックを使用します。
3. 0 縫合糸を使用して胸腰筋膜を、シンプルで断続的で反転しない方法で縫合します。5〜8mmごとにステッチを配置して、防水クロージャーを実現します。
4. 2-0縫合糸を使用して皮下組織を、適切な強度を達成するために5〜8mmごとにステッチを配置し、単純で中断された逆さまの方法で縫合します。
5. 0 縫合糸を使用して、単純な方法、実行方法、または中断された方法で皮膚を閉じます。
6. ニードルカウンターを使用して、鋭利物が不明になっていないことを確認します。
7. 生理食塩水で皮膚を洗浄し、皮膚を乾燥させ、切開部に垂直に絆創膏ストリップを置きます。
8. 包帯ストリップの上にガーゼを置き、最終的な接着剤抗菌切開ドレープを取り付けます。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
使い捨て吸引キャニスターおよびチューブ	Medline	DYND44703H
ボタンスイッチ 電気外科用モノポーラ鉛筆	Medtronic	E2450H-15
ブレード	Miltex	4-315	-
11枚刃	ルテックス	4-311-4x4
外科用ガーゼ	ナレックス	3262	-
フリーアエレベーター、5mm	Medline	MDS4641518F	-
骨ワックス	Ethicon	W31G	-
スパーリング椎間板ロンジュール、3mm	Sklar	42-2852	-
スパーリング45度、アップバイトケリソンロンジュール、2mm	メドライン
MDS4052802-Leksellアングルロンジュール、2 mm	Sklar	40-4097-Frazier
クションチップ、6 Fr	Sklar	50-2006-Frazier
クションチップ、10 Fr	Sklar	50-2010-Dandy
い直角神経フック	Medline	MDS4005220	-
ナイロン縫合糸、6-0	Ethicon	697G-22
ゲージクインケポイント脊髄針	ハリヤードヘルス	18397	-
ポリエチレンチューブ、5フィート	科学商品	BB31695-PE/05-DAPI
	シグマアルドリッチ	D9542	-
ビクリル縫合糸、0	Ethicon	J603H	-
ビクリル縫合糸、2-0	Ethicon	J317H	-
ニードルカウンター	Medline	NC20FBRGS	-
ステリストリップスキンクロージャー、1/2x4インチ	3M	R1547	-

ミダイササ鈍