マウス神経膠芽腫モデルにおける治療用ナノ粒子の静脈内投与

要約

出典: Kim, B. D., et al.多形性膠芽腫動物モデルにおけるオリゴヌクレオチドペイロードのナノ粒子送達J. Vis. 経験。(2024年)

このビデオは、神経膠芽腫を有するマウスにおける治療用ナノ粒子の静脈内注射を示しています。この方法は、血液脳関門を介した標的送達を可能にし、脳腫瘍におけるナノ粒子の生体内分布と治療効果を評価するための非侵襲的イメージングをサポートします。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. MN-抗 miR10b 投与

注

: この研究では、注射は移植後 7 日間から 6 週間、週に 1 回行われましたが、同じプロトコルをさまざまな注射頻度に使用できます。

1. マウスの体重を量り、マウスに投与するMN(磁性ナノ粒子)-抗miR10bの体積を計算します。MN 抗 miR10b の用量は、マウス GBM (多形性膠芽腫) モデルで 20 mg Fe (鉄)/kg で投与されます。たとえば、20 gのマウスに、5 mg Fe / mL MN-anti-miR10bの80 μLの投与量を受け取ります。対照マウスは、この投与スキームと一致する同量のPBS(リン酸緩衝生理食塩水)を受け取ります。
2. MN-anti-miR10bの用量で28Gシリンジを準備し、注射液に気泡がないことを確認します。
誘導
3. ボックス内で1.5 L / minの流量で、誘導のために2%〜4%のイソフルラン、維持のために1.5%〜2%のマウスを麻酔します。マウスをノーズコーンに移動し、麻酔を投与し続けます。麻酔の深さを確認し、獣医軟膏を塗ります。
4. 70%イソプロパノールワイプで尾を滅菌し、余分なアルコールを乾かします。
5. 尾を回転させて、尾側の尾静脈を尾の上部に配置します。次に、静脈を狙って尾に針を挿入し、プランジャーを引き戻して真空を作ります。
6. 血液が注射器に入るまで針を挿入し、静脈への侵入が成功したことを示します。
7. MN-anti-miR10bをゆっくりと注入し、完全な送達後に針を引っ込めます。出血が止まるまでガーゼで注射部位を圧迫します。
8. ノーズコーンからマウスを取り外します。完全に回復して歩行可能になるまでマウスを監視します。
   注:ナノ粒子のボーラス投与は呼吸困難を引き起こす可能性があります。マウスを注意深く監視し、呼吸困難の兆候がある場合はすぐに軽い胸骨圧迫を加えます。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
無気性ヌード「J:NU」マウス	Jackson Laboratory RRID	:IMSR_JAX:007850	免疫不全マウスモデル
70% イソプロポイル アルコール ワイプ	Cardinal	MW-APL	腫瘍移植および尾静脈注射用の局所消毒ワイプ
イソフルラン	コベトルス	11695067772	アネテシア イ
ソフルラン気化器	SOMNI Scientific	VS6002	アネテシア装置
インスリンシリンジ 1CC 29G X 1/2 インチ	ベクトン、ディキンソン	324704	シリンジ D-ルシフェリン注射および尾静脈注射用 ナノ粒子